研究背景:隨著生活質(zhì)量的提高,人類(lèi)西方化的飲食結(jié)構(gòu)中脂肪類(lèi)攝入比例已高達(dá)40%,大量臨床研究發(fā)現(xiàn),高脂飲食在引發(fā)肥胖和脂代謝紊亂的同時(shí),對(duì)男性精子質(zhì)量也會(huì)造成影響,主要表現(xiàn)為精子數(shù)量及活力下降、染色體受損以及精子形態(tài)異常。有研究表明高脂飲食會(huì)改變?nèi)梭w內(nèi)腸道微生物的組成,進(jìn)而打破腸道微生物的生態(tài)平衡。腸道微生物在宿主的營(yíng)養(yǎng)吸收、腸道與免疫系統(tǒng)的功能、脂肪代謝、能量供應(yīng)等諸多重要生理過(guò)程中發(fā)揮作用。腸道菌群組成的變化與肥胖、代謝綜合征、癌癥、神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病的等的發(fā)生、發(fā)展和治療密切相關(guān)。然而,腸道菌群組成的變化是否會(huì)影響精子質(zhì)量尚不明確。因此,我們應(yīng)用C57BL/6雄鼠模型以及臨床不育男性的樣品進(jìn)行了以下研究:研究目的:研究高脂飲食誘導(dǎo)的腸道菌群失衡對(duì)雄性小鼠精子質(zhì)量影響及相關(guān)機(jī)制。研究方法:1.動(dòng)物研究:（1）腸道菌群失衡供體雄鼠模型的構(gòu)建:在實(shí)驗(yàn)的全過(guò)程中,分別給予供體雄鼠正常飲食（Normal Diet,ND）和高脂飲食（High-fat Diet,HFD）,構(gòu)建ND、HFD腸道菌群供體模型;（2）腸道菌群受體雄鼠模型的構(gòu)建:通過(guò)腸道菌群替代實(shí)驗(yàn)（Fecal microbiota... 

【文章來(lái)源】：廣東工業(yè)大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：130 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１技術(shù)路線圖??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?Ｒｏａｄｍａｐ??

廣東工業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文??②ＭｇＳ〇４母液：�。矗埃恚坛兯尤耄埃常玻绲模停纾樱茫�，渦旋至完全溶解即可；??③Ｋ２ＨＰＯ４母液：取４０?ｍＬ超純水加入１．６?ｇ的Ｋ２ＨＰ０４，渦旋至完全溶解即可；??④ＫＨ２Ｐ〇４母液：取４０ｍＬ超純水加入１．６ｇ的ＫＨ２Ｐ０４，渦旋至完全溶解即可；??⑤０．１％刃天青：取４０?ｍＬ超純水加入０．０４?ｇ刃天青，渦旋至完全溶解即可。??（３）調(diào)節(jié)ｐＨ：用ｌＭＮａＯＨ于室溫下調(diào)節(jié)培養(yǎng)液ｐＨ至７．３±０．２；??（４）抽真空：用抽真空裝置（圖５－２．１６）抽真空到－０．０６?Ｐａ，保持３０?ｓ?（２００?ｍＬ??血清瓶保持３０?ｓ，?１５?ｍＬ西林瓶保持１５?ｓ），充氮?dú)庵粒埃埃?Ｐａ，保持３０?ｓ／１５ｓ，抽空氣??吹氮?dú)庵貜?fù)３次；??ｍ??圖５－２．１６抽真空裝置??Ｆｉｇｕｒｅ?５－２．１６?Ｅｖａｃｕａｔｉｎｇ?ｄｅｖｉｃｅ??（５）滅菌：高壓蒸汽滅菌鍋１２１°Ｃ滅菌２０分鐘；??（６）液體接種：（在生物安全柜中操作）�。�°Ｃ存放的配置好的培養(yǎng)基，按比例加??入氯化血紅素后，吸取母液１?ｍＬ至添加好氯化血紅素的培養(yǎng)液中；??（７）接種后的西林瓶放置在３７°Ｃ，２２０?ｒｐｍ的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)。??（８）菌種的保種與凍存：取對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期菌液７?ｍＬ，加入到含有７?ｍＬ?５０％甘油水??溶液的２０?ｍＬ抽真空滅菌的西林瓶中，放置于超低溫冰箱長(zhǎng)期保存。其中甘油是在凍??存時(shí)減少冰晶的形成，冰晶會(huì)刺破細(xì)胞壁。同樣西林瓶中加好甘油水溶液抽真空后滅??菌使用。??２．２．４．１７腸粘膜通透性檢測(cè)??（１）血清樣本收集：用純水將ｎＴＣ－ｌａｂｌｅｄｄｅｘｔｒａｎ４０００稀釋成５０ｍｇ／ｍ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Tight junctions in inflammatory bowel diseases and inflammatory bowel disease associated colorectal cancer[J]. Jonathan Landy,Emma Ronde,Nick English,Sue K Clark,Ailsa L Hart,Stella C Knight,Paul J Ciclitira,Hafid Omar Al-Hassi.  World Journal of Gastroenterology. 2016(11)



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