發(fā)布時間：2021-12-12 12:42

　　目的P-糖蛋白是一類能量依賴性的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，能將許多結(jié)構(gòu)不同的抗腫瘤藥物逆向轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞，是導(dǎo)致腫瘤化療失敗的主要原因。本研究主要探討膀胱癌細(xì)胞BIU-87耐藥株與敏感株間是否存在功能性P一糖蛋白（P-gp）的轉(zhuǎn)移及P-gp與多藥耐藥基因（mdrl）的關(guān)系。方法流式細(xì)胞檢測分別檢測BIU-87和BIU-87/ADM細(xì)胞的P-gp表達(dá)水平，將Hoechst33342染色BIU-87敏感株（BIU-87/Hoechst33342），并與BIU-87耐藥株（BIU-87/ADM）通過Transwell系統(tǒng)共培養(yǎng)，激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞間P-gp的轉(zhuǎn)移。收集共培養(yǎng)體系下室的BIU-87/Hoechst33342細(xì)胞（BIU-87/aqMDR），采用western blot分析BIU-87/ADM、BIU-87/aqMDR、BIU-87/Hoechst33342、BIU-87細(xì)胞P-gp表達(dá)水平，同時應(yīng)用RT-PCR分析這些細(xì)胞mdr1mRNA的表達(dá)水平。采用流式細(xì)胞術(shù)測BIU-87/ADM、BIU-87/aqMDR、BIU-87細(xì)胞羅丹明123外排功能。結(jié)果熒光顯微鏡下大量呈藍(lán)色熒光細(xì)胞。激光共... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英漢縮略詞對照表
第一章 引言
第二章 材料與試劑
    1 實驗材料
        1.1 實驗對象
        1.2 主要試劑、耗材
        1.3 主要實驗設(shè)備
        1.4 試驗中試劑的配制
第三章 實驗方法
    1. 細(xì)胞培養(yǎng)
    2. 流式細(xì)胞檢測 P-gp 表達(dá)
    3. BIU-87 細(xì)胞 Hoechst33342 染色
    4. 建立人膀胱癌細(xì)胞敏感株 BIU-87、耐藥株 BIU-87/ADM 共培養(yǎng)體系
    5. 激光掃描共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞間P-gp的轉(zhuǎn)移
    6. western blot分析P-gp蛋白表達(dá)水平
    7. RT-PCR檢測mdr1基因mRNA表達(dá)
    8. 羅丹明 123 外排實驗檢測 P-gp 的轉(zhuǎn)運(yùn)功能
    9. 數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計處理
第四章 實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
前瞻
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
碩士在讀期間發(fā)表的文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞Transwell共培養(yǎng)誘導(dǎo)形成軟骨[J]. 王萬宗,陳宗雄,劉曉強(qiáng).  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(38)
[2]肝癌細(xì)胞HepG2間的P-糖蛋白傳遞作用[J]. 陳龍,左國慶,吳進(jìn)峰,曾貴利,李濤,劉作金,唐開福.  中華肝臟病雜志. 2009 (11)
[3]人膀胱癌阿霉素耐藥株BIU－87／ADM的建立及其耐藥機(jī)理的研究[J]. 郭和清,魯功成,熊旭林,董繼華,劉紹春,趙時宇.  中華泌尿外科雜志. 1996(12)



本文編號：3536697