目前,長(zhǎng)段尿道缺損是尿道疾病治療中的難題,雖然組織工程研究領(lǐng)域的快速發(fā)展給尿道缺損的再生修復(fù)帶來(lái)了希望,但如何促進(jìn)組織和血管新生仍然是一個(gè)瓶頸問(wèn)題。為探究該問(wèn)題的解決辦法。我們采用凍融-十二烷基硫酸鈉-核酸酶的方法對(duì)人羊膜進(jìn)行脫細(xì)胞,獲得羊膜脫細(xì)胞基質(zhì)支架（decellularized Human Amniotic Scaffold,dHAS）,并在dHAS上種植骨髓MSCs（Bone Mesenchymal Stem Cells,BMSCs）和內(nèi)皮祖細(xì)胞（Endo thelial Progenitor Cells,EPCs）,通過(guò)HE染色和掃描電鏡檢測(cè)羊膜的脫細(xì)胞情況及dHAS與細(xì)胞的相容性。最后選用25只健康的雜種成年犬,建立3 cm長(zhǎng)尿道缺損模型,分別采用負(fù)載BMSCs和EPCs（BMSCs+EPCs組）、EPCs（EPCs組）、BMSCs（BMSCs組）的dHAS橋接修復(fù)缺損,并設(shè)dHAS修復(fù)組（dHAS組）和不修復(fù)組（缺損組）作對(duì)照。術(shù)后通過(guò)觀察犬排尿情況,4周和8周后的尿道造影,2月后的剖檢和樣品的組織學(xué)觀察,評(píng)估再生尿道缺損修復(fù)和塑型效果。研究結(jié)果如下:1.羊膜細(xì)胞成分完... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：42 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 尿道缺損修復(fù)方法的研究進(jìn)展
    1.1 雄性尿道的解剖結(jié)構(gòu)
    1.2 尿道缺損的修復(fù)方法
        1.2.1 端端吻合術(shù)修復(fù)方法
        1.2.2 替代物修補(bǔ)法
            1.2.2.1 皮瓣修補(bǔ)法
            1.2.2.2 口腔黏膜修補(bǔ)法
        1.2.3 組織工程修復(fù)法
            1.2.3.1 支架修復(fù)法
            1.2.3.2 細(xì)胞復(fù)合支架的修復(fù)方法
    1.3 展望
第二章 羊膜脫細(xì)胞基質(zhì)支架的制備
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 試劑的配置
        2.1.3 主要儀器設(shè)備和耗材
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 羊膜脫細(xì)胞基質(zhì)支架的制備
        2.2.2 羊膜脫細(xì)胞情況的檢測(cè)
        2.2.3 羊膜脫細(xì)胞基質(zhì)與細(xì)胞相容性的檢測(cè)
    2.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 人羊膜脫細(xì)胞前后的大體觀察
        2.3.2 羊膜脫細(xì)胞基質(zhì)的HE染色及掃描電鏡觀察
        2.3.3 羊膜脫細(xì)胞基質(zhì)上種植細(xì)胞前后HE染色及掃描電鏡觀察
    2.4 討論
第三章 負(fù)載骨髓MSCs和/或EPCs的羊膜支架修復(fù)犬長(zhǎng)段尿道缺損的研究
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 試劑與藥品
        3.1.2 試驗(yàn)耗材
        3.1.3 試驗(yàn)儀器設(shè)備
        3.1.4 試驗(yàn)動(dòng)物
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 工程化尿道的構(gòu)建
        3.2.2 尿道缺損模型的建立
        3.2.3 尿道缺損的修復(fù)
        3.2.4 逆行尿道造影
        3.2.5 剖檢觀察
        3.2.6 組織學(xué)觀察
            3.2.6.1 HE染色觀察
            3.2.6.2 Van Gieson染色觀察
        3.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3.3 試驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 構(gòu)建工程化尿道的結(jié)果
        3.3.2 建立犬尿道缺損模型并手術(shù)修復(fù)
        3.3.3 修復(fù)效果的檢測(cè)結(jié)果
            3.3.3.1 術(shù)后排尿觀察結(jié)果
            3.3.3.2 尿道逆行造影結(jié)果
            3.3.3.3 剖檢結(jié)果
            3.3.3.4 組織學(xué)觀察結(jié)果
    3.4 討論
        3.4.1 排尿和尿道腔的變化
        3.4.2 尿道上皮的再生與覆蓋
        3.4.3 尿道海綿體的再生
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向尿路上皮分化后構(gòu)建膀胱組織工程化移植物[J]. 熊云鶴,楊嗣星,孟令超,廖文彪,宋超.  中國(guó)組織工程研究. 2014(32)
[2]再生醫(yī)學(xué)在尿道修復(fù)重建中的應(yīng)用[J]. 趙仁淹,傅強(qiáng).  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2013(02)
[3]組織工程與干細(xì)胞技術(shù)在尿道重建中的應(yīng)用[J]. 王營(yíng),傅強(qiáng).  中華男科學(xué)雜志. 2012(03)
[4]多孔絲素復(fù)合脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞支架修復(fù)兔尿道缺損能促進(jìn)血管的形成[J]. 張亞,周云,賈立山,翟景梅,苗小芬,王睿.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(47)
[5]絲素蛋白膜對(duì)犬不同長(zhǎng)度尿道缺損的修復(fù)效果[J]. 劉春曉,陳偉豪,鄭少波,李虎林.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(19)
[6]小腸黏膜下層修復(fù)尿道的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 黃翔,羅靜聰,廖勇,屈藝,楊志明.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2006(03)

碩士論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與人脫細(xì)胞羊膜構(gòu)建組織工程骨膜的體外成骨研究[D]. 許偉陽(yáng).福建醫(yī)科大學(xué) 2013



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