目的:尿路感染包括膀胱炎和腎盂腎炎主要由尿路致病性大腸桿菌（UPEC）引起,并且如果早期急性炎癥沒有控制將會形成慢性持續(xù)性感染,腎瘢痕和腎衰竭。因此發(fā)現(xiàn)尿路致病性大腸桿菌的主要致病毒力因子及探究它引起尿路感染的致病機制對于預防和治療尿路感染疾病尤為重要。細胞毒性壞死因子（CNF1）是尿路致病性大腸桿菌關鍵毒素蛋白,但是它對尿路致病性大腸桿菌的致病機制及宿主的具體防御作用還不清楚。天然免疫應答是宿主有效抵御UPEC感染的主要方式,中性粒細胞和巨噬細胞在急性尿道感染中對細菌清除起主要作用。然而天然免疫應答必須得到有效調(diào)控,否則會造成嚴重的組織損傷。CD36是重要的清道夫受體之一,在巨噬細胞中負責病原體和凋亡細胞清除,因此在宿主免疫防御和動態(tài)平衡中發(fā)揮重要作用。目前尚未報道細菌毒素對CD36的調(diào)節(jié)。本論文擬解決以下三個問題:1.系統(tǒng)研究CNF1在急性尿道感染中對細菌清除和組織炎性損傷的作用;2.研究CNF1對巨噬細胞CD36在表達和轉(zhuǎn)錄水平的影響;3.研究CNF1對CD36的分子調(diào)節(jié)機制。方法:1.在UPEC菌株CFT073中引入cnf1基因,構建CNF1的組成型表達菌株（CFT073-CN... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

(A)CFT073-CNF1和CFT073空載菌生長曲線

16圖 1.2 尿路感染雌鼠 C57BL/6J 109CFT073-CNF1 和 CFT073 空載菌，以 3小時間隔分別感染 2 次。在感染 24，48 和 72 小時流式檢測外周血（A），膀胱（B）和腎臟（C）中性粒細胞占總細胞的比例 (n=6 至 10, 2 次重復實驗)。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準誤表示，非參數(shù)秩和檢驗，*P< 0.05。1.2.3 CNF1 對巨噬細胞募集無影響使用小鼠腎盂腎炎模型，小鼠尿道感染表達 CNF1 的 CFT073 和空載對照CFT073。在感染 48 小時后取小鼠眼球外周血，膀胱和腎臟組織，流式檢測巨噬細胞（CD11b+F4/80 雙陽性代表組織巨噬細胞）量變化。結(jié)果表明 CFT073-CNF1感染小鼠的膀胱，腎臟組織和血液中巨噬細胞比例和 CFT073 空載對照組無差別（圖 1.3）。這表明 CNF1 對尿路感染組織巨噬細胞浸潤無影響。

17圖 1.3 尿路感染雌鼠 C57BL/6J 109CFT073-CNF1 和 CFT073 空載菌，以 3小時間隔分別感染 2 次。在感染 48 小時流式檢測外周血（A），膀胱（B）和腎臟（C）中巨噬細胞占總細胞的比例 (n= 10, 2 次重復實驗)。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準誤表示，非參數(shù)秩和檢驗，*P< 0.05。1.2.4 CNF1 加重腎臟和膀胱的損傷使用小鼠腎盂腎炎模型，小鼠尿道感染表達 CNF1 的 CFT073 和空載對照CFT073。在感染 48 小時后取材，膀胱和腎臟大體拍照并且做石蠟包埋，切片和H＆E 染色。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，感染 CNF1-CFT073 的膀胱和腎組織中募集更多炎性細胞浸潤（白色箭頭指示浸潤的炎性細胞），更嚴重的水腫和尿路上皮損傷（圖1.4）。


本文編號：3494038