一、研究背景前列腺癌是發(fā)生在男性中最常見的惡性腫瘤之一,并且隨著年齡的增長,其發(fā)病率越來越高。據(jù)報道,在20世紀80年代晚期以及90年代早期,美國新診斷的前列腺癌病例已超過肺癌作為男性中發(fā)病率最高的的腫瘤疾病[1]。目前,前列腺癌的常見治療方法包括：根治性的手術、放療、內(nèi)分泌治療、化療等。放射治療作為傳統(tǒng)治療手段之一,廣泛應用于不同分期的前列腺癌：早期前列腺癌的放射治療可以達到根治的目的,效果與根治性手術相似；局部晚期前列腺癌采取放療結合內(nèi)分泌治療可提高存活率[2]；有遠處轉移者,姑息放療可以緩解局部癥狀,改善生活質(zhì)量。但臨床發(fā)現(xiàn)部分病人因放療抵抗導致放療后局部復發(fā),預后不佳[3]。提高放射劑量可以減低腫瘤局部復發(fā)率,但是高劑量放療伴隨的副反應,如腸道損傷、泌尿系統(tǒng)受損、性功能障礙等,卻嚴重影響患者的生活質(zhì)量[4]。此外,內(nèi)分泌治療是晚期前列腺癌姑息治療的主要方法,雖然最初可獲得很高的有效率,但是相當一部分病人在治療2-5年后病情進展為激素抵抗性前列腺癌（HRPC）,最終導致治療失敗。長時間內(nèi)分泌治療誘導腫瘤細胞產(chǎn)生激素抵抗性的同時,對放射治療的耐受性同樣得到提高[5]。因此,如何提高... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 質(zhì)粒
        2.1.3 主要試劑及耗材
        2.1.4 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)與轉染
        2.2.2 RT-PCR測定GnT-V mRNA
        2.2.3 Western blot檢測蛋白表達
        2.2.4 平板克隆實驗檢測細胞克隆形成率
        2.2.5 CCK-8檢測細胞增殖性
        2.2.6 劃痕實驗檢測細胞遷移能力
        2.2.7 Hoechst 33258核染色及流式細胞術檢測細胞凋亡
        2.2.8 比色分析法測定Caspase-3活性
        2.2.9 流式細胞術檢測細胞周期
        2.2.10 雙熒光素酶實驗檢測細胞信號通路2.2.10.1實驗分組
        2.2.11 皮下成瘤實驗
        2.2.12 免疫組化檢測種植瘤切片GnT-V、Bcl-2、Bcl-xl、Bax表達情況(切片制作)
        2.2.13 統(tǒng)計學分析
第三章 結果
    3.1 重組質(zhì)粒的穩(wěn)定轉染
    3.2 干擾效果檢測
    3.3 GnT-V shRNA對放療前后細胞克隆形成的影響
    3.4 CCK-8法測定GnT-V shRNA對放療后細胞增殖能力變化
    3.5 劃痕實驗檢測GnT-V shRNA對Lncap細胞照射前后遷移能力改變
    3.6 Hoechst 33258核染色及流式細胞術檢測GnT-V shRNA對Lncap細胞照射前后凋亡改變
    3.7 比色分析法檢測GnT-V shRNA對細胞放療后Caspase-3活性的影響
    3.8 流式細胞術檢測GnT-V shRNA對Lncap細胞照射前后周期改變
    3.9 雙熒光素酶實驗檢測GnT-V shRNA對PCa細胞照射前后NF-kB信號通路改變
    3.10 GnT-V shRNA對裸鼠皮下成瘤實驗的影響
    3.11 生存曲線
    3.12 Western blot檢測GnT-V shRNA對Lncap細胞照射前后相關凋亡蛋白的改變
    3.13 CCK-8法測定GnT-V shRNA對激素治療后PCa細胞增殖能力變化
    3.14 Western blot檢測GnT-V shRNA對PCa細胞氟他胺作用前后相關凋亡蛋白的改變
    3.15 雙熒光素酶實驗檢測GnT-V shRNA對PCa細胞氟他胺作用前后WNT信號通路表達的改變
第四章 討論
第五章 結論
參考文獻
致謝



本文編號：3455117