目的:本研究通過(guò)建立小鼠不育模型,檢測(cè)Piwil2蛋白及Stat3、Bcl-2蛋白在雄性不育小鼠睪丸組織中的表達(dá)狀況,及探討三者表達(dá)之間存在的潛在位置及量的相關(guān)性;并進(jìn)一步闡明Piwil2蛋白在不育發(fā)生發(fā)展中的作用及相關(guān)機(jī)制。方法:取雄性昆明種小鼠60只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組,每組30只。實(shí)驗(yàn)組小鼠采用雷公藤多苷藥物造小鼠不育模型。每天對(duì)小鼠進(jìn)行雷公藤多苷混懸液灌胃,劑量按照小鼠體重以0.001 ml/g進(jìn)行,每天一次,持續(xù)28 d。對(duì)照組小鼠使用生理鹽水進(jìn)行灌胃,劑量、及持續(xù)時(shí)間與實(shí)驗(yàn)組一致。造模后將兩組雄性小鼠分別與雌性小鼠交配,觀察雌性小鼠的受孕狀況;一周后再將雄性小鼠處死,分別取出兩組小鼠的雙側(cè)睪丸組織及附睪。對(duì)兩組小鼠的附睪分別進(jìn)行精子計(jì)數(shù);分別采用免疫組織化學(xué)染色法和蛋白印跡檢測(cè)法來(lái)以分別檢測(cè)兩側(cè)睪丸組織樣本中Piwil2、Stat3及Bcl-2蛋白的表達(dá)狀況,并采用定量PCR方法檢測(cè)三種蛋白在睪丸組織中的mRNA的表達(dá)水平。將實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較,觀察兩組的蛋白表達(dá)的差異性及三種蛋白表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果:1.H.E染色結(jié)果顯示,對(duì)照組小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)發(fā)育正常,... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
第二章 材料與方法
    2.1.試劑與耗材
        2.1.1 使用試劑
        2.1.2 使用耗材
    2.2.實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3.實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 技術(shù)路線
        2.3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.4 蘇木素伊紅染色(H.E染色)
        2.3.5 免疫組織化學(xué)染色(IHC染色)
        2.3.6 蛋白印跡法(Western Blot)
        2.3.7 定量PCR
    2.4.統(tǒng)計(jì)分析
第三章 結(jié)果
    3.1.小鼠體重及附睪精子計(jì)數(shù)
    3.2.H.E染色及造模結(jié)果分析
    3.3.IHC染色結(jié)果分析
    3.4.Western Blot結(jié)果分析
    3.5.定量PCR結(jié)果分析
第四章 討論
    4.1 Piwil2蛋白在精子生成過(guò)程中的作用
    4.2 Stat3及Bcl-2蛋白在精子生成過(guò)程中的作用
    4.3 在調(diào)節(jié)精子生成過(guò)程中Piwil2與Stat3、Bcl-2蛋白可能存在潛在正相關(guān)性
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表(附錄)
致謝



本文編號(hào)：3437647