目的:本研究通過建立小鼠不育模型,檢測Piwil2蛋白及Stat3、Bcl-2蛋白在雄性不育小鼠睪丸組織中的表達狀況,及探討三者表達之間存在的潛在位置及量的相關(guān)性;并進一步闡明Piwil2蛋白在不育發(fā)生發(fā)展中的作用及相關(guān)機制。方法:取雄性昆明種小鼠60只,隨機分為實驗組與對照組,每組30只。實驗組小鼠采用雷公藤多苷藥物造小鼠不育模型。每天對小鼠進行雷公藤多苷混懸液灌胃,劑量按照小鼠體重以0.001 ml/g進行,每天一次,持續(xù)28 d。對照組小鼠使用生理鹽水進行灌胃,劑量、及持續(xù)時間與實驗組一致。造模后將兩組雄性小鼠分別與雌性小鼠交配,觀察雌性小鼠的受孕狀況;一周后再將雄性小鼠處死,分別取出兩組小鼠的雙側(cè)睪丸組織及附睪。對兩組小鼠的附睪分別進行精子計數(shù);分別采用免疫組織化學染色法和蛋白印跡檢測法來以分別檢測兩側(cè)睪丸組織樣本中Piwil2、Stat3及Bcl-2蛋白的表達狀況,并采用定量PCR方法檢測三種蛋白在睪丸組織中的mRNA的表達水平。將實驗組與對照組的檢測結(jié)果進行比較,觀察兩組的蛋白表達的差異性及三種蛋白表達的相關(guān)性。結(jié)果:1.H.E染色結(jié)果顯示,對照組小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)發(fā)育正常,... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
第二章 材料與方法
    2.1.試劑與耗材
        2.1.1 使用試劑
        2.1.2 使用耗材
    2.2.實驗儀器
    2.3.實驗方法
        2.3.1 技術(shù)路線
        2.3.2 實驗動物
        2.3.3 實驗方法
        2.3.4 蘇木素伊紅染色(H.E染色)
        2.3.5 免疫組織化學染色(IHC染色)
        2.3.6 蛋白印跡法(Western Blot)
        2.3.7 定量PCR
    2.4.統(tǒng)計分析
第三章 結(jié)果
    3.1.小鼠體重及附睪精子計數(shù)
    3.2.H.E染色及造模結(jié)果分析
    3.3.IHC染色結(jié)果分析
    3.4.Western Blot結(jié)果分析
    3.5.定量PCR結(jié)果分析
第四章 討論
    4.1 Piwil2蛋白在精子生成過程中的作用
    4.2 Stat3及Bcl-2蛋白在精子生成過程中的作用
    4.3 在調(diào)節(jié)精子生成過程中Piwil2與Stat3、Bcl-2蛋白可能存在潛在正相關(guān)性
第五章 結(jié)論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
縮略詞表(附錄)
致謝



本文編號：3437647