發(fā)布時(shí)間：2021-10-10 23:33

　　目的：建立漢族人腎肉瘤樣癌細(xì)胞系，研究該細(xì)胞系的生物學(xué)特性，篩選腎肉瘤樣癌高轉(zhuǎn)移性細(xì)胞亞型；構(gòu)建腎癌噬菌體展示肽庫和腎透明細(xì)胞癌特異性噬菌體展示肽庫，進(jìn)行腎細(xì)胞癌早期檢測(cè)分子標(biāo)志物的篩選。方法：（1）采用1例腎肉瘤樣癌新鮮手術(shù)標(biāo)本，于手術(shù)后30-60min內(nèi)用植塊法進(jìn)行體外培養(yǎng)，確定腫瘤病理學(xué)特點(diǎn)和染色體眾數(shù)，記錄細(xì)胞系的生長(zhǎng)曲線，集落形成率，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)志物。（2）構(gòu)建腎癌噬菌體展示肽庫：收集腎癌組織標(biāo)本30例和腎癌細(xì)胞系3種48瓶。利用Trizol試劑抽提總RNA，用純化試劑盒抽提mRNA，再經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄、末端平齊化、加EcoRⅠ/HindⅢ接頭、HindⅢ和EcoRⅠ雙酶切、大小片段篩選、連接載體臂、噬菌體體外包裝等一系列反應(yīng)，成功構(gòu)建了腎癌噬菌體展示肽庫。（3）腎癌特異性的噬菌體的富集：用正常對(duì)照和腎癌患者的血清進(jìn)行五輪正負(fù)向親和篩選，以富集可以和腎癌患者血清中自身抗體相結(jié)合的特異性噬菌體單克隆。（4）腎癌特異性噬菌體的篩選：五輪正負(fù)向篩選后，隨機(jī)挑選了的2000個(gè)噬菌體單克隆，用ELISA法進(jìn)行初篩。結(jié)果：（1）腫瘤組織樣本免疫組化結(jié)果顯示：Vime... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
前言
第一部分 腎肉瘤樣細(xì)胞癌細(xì)胞系的建立
    一、材料
    二、方法
    三、結(jié)果
    四、討論
第二部分 腎癌噬菌體展示肽庫的構(gòu)建
    一、材料
    二、方法
    三、結(jié)果
    四、討論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
碩士期間研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Vimentin、Ki-67在透明細(xì)胞性腎細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及其與MVD的相關(guān)性研究[J]. 張麗娜,張淑敏.  中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 2012(03)
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博士論文
[1]USP11抑制TNFα介導(dǎo)的NF-κB激活途徑及其在轉(zhuǎn)移性腎透明細(xì)胞癌中的作用[D]. 譚曉（？）.第二軍醫(yī)大學(xué) 2010

碩士論文
[1]B7-H4在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義[D]. 徐一鵬.福建醫(yī)科大學(xué) 2012
[2]肺癌和大腸癌早期篩查自身抗體標(biāo)志群的篩選[D]. 吳玲玲.第二軍醫(yī)大學(xué) 2010
[3]噬菌體展示肽庫篩選大腸癌早期檢測(cè)分子標(biāo)志群[D]. 曹付傲.第二軍醫(yī)大學(xué) 2010
[4]人原代腎細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移性和非轉(zhuǎn)移性細(xì)胞的體內(nèi)外篩選[D]. 譚曉（豐刀女）.第二軍醫(yī)大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3429360