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活性維生素D3調(diào)控炎癥信號(hào)通路對(duì)糖尿病腎病大鼠腎臟保護(hù)作用及機(jī)制的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-25 16:52
  [目的]1.探討活性維生素D3調(diào)控NF-kB炎癥信號(hào)通路對(duì)2型糖尿病腎病大鼠腎臟保護(hù)作用及機(jī)制;2.尋找維生素D在治療糖尿病腎病中的最佳濃度。[方法]將SD大鼠60只隨機(jī)分成正常對(duì)照組(10只)、DKD模型組(50只),且DKD模型組據(jù)處理方式分為:花生油組、厄貝沙坦組、維生素D低劑量組、維生素D中劑量組、維生素D高劑量組,每組各10只。正常組以普通飼料喂養(yǎng),模型組分別以上述處理方式進(jìn)行灌胃。6周后處死大鼠并稱取體重,分離血清檢測(cè)空腹血糖(FPG),甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)、胰島素(INS)、C肽(CP),收集24小時(shí)尿液計(jì)算尿量、測(cè)24h尿蛋白定量(uPro);留取腎臟組織,HE染色觀察腎組織病理學(xué)變化;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)腎臟組織中NF-kB及其下游單核細(xì)胞趨化因子(MCP-1)的mRNA的表達(dá);Western booting檢測(cè)炎癥因子NF-kB及MCP-1蛋白的表達(dá)。組間兩兩比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),等級(jí)資料秩和檢驗(yàn)。[結(jié)果](1)在血糖、24h 尿蛋白、TG、LDL-c 水平,維生素 D 低劑量組(18.20±5.95、32.24±... 

【文章來源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】:89 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

活性維生素D3調(diào)控炎癥信號(hào)通路對(duì)糖尿病腎病大鼠腎臟保護(hù)作用及機(jī)制的研究


空腹胰島素水平標(biāo)準(zhǔn)曲線

標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線,腎臟,凝膠電泳


(6)BCA法測(cè)定蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線:(圖4)??StancardCurvG??|? ̄^??\?Z??I??0.35??z,??°-15〇?2?4?6?8?1丨3??Concentration????5iTnfl1?(?^tanfi?rrl5@Prnrpinf\iiant_Rr.A???M^anDn?w??Stanriarr?)??fun/p?Fit?Rp^ult*:?A??Curve?Fit:?Linear?-?A-r?Bx??ParaiTieter?Estimated?\^lue?Std.?Error?Confidena?Inter/al??STU01?A?0.169?0.005?[ai55,0.182]??fp-?=?0.99S??E.?0.050?9.29S-4?[£1048,0.053】??圖4?BCA法測(cè)定蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線??2.6.2?Western?blot檢測(cè)腎臟樣本中蛋白表達(dá)量??1.?Western?blot?凝膠電泳??(1)

完整性檢測(cè)


2.?RNA完整性檢測(cè)??1%瓊脂糖凝膠電泳,TAE電泳緩沖液中,150v,電泳25min,檢測(cè)RNA的??完整性。(見圖5)??正1?花1?厄1?VDl?VZl?VGl|?正2?花2?厄2?VD2?VZZ?VG2)正3?花3?厄3?VD3?VZ3?VG3?丨卜:4?花4?厄4?VD4?VZ4?VG4??28S?I?叫??18S|?,?'?I??5s?I?^?:r‘,'I??圖5各樣本RNA完整性檢測(cè)??2.7.3逆轉(zhuǎn)錄步驟??1.按照下表的基因組DNA的去除體系配制混合液,徹底混勻。簡(jiǎn)短離心,并??置于42°C,孵育3?min。然后置于冰上放置。(表9)??27??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3362497

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