目的探討整合素連接激酶（integrin linked kinase,ILK）調(diào)控polo樣激酶1（polo-like kinase 1,PLK1）的表達對膀胱癌細胞惡性生物學(xué)行為的影響。方法將構(gòu)建好的針對ILK基因的過表達質(zhì)粒在脂質(zhì)體介導(dǎo)下穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人膀胱癌5637細胞,并命名為5637/ILK組,同時設(shè)轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的5637細胞作為陰性對照,并命名為5637/NC組;運用Western blot分別檢測5637/ILK和5637/NC組中ILK的表達。再將低表達PLK1的PLK1 siRNA質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染過表達ILK的膀胱癌5637/ILK細胞,同時設(shè)未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的5637/ILK細胞為陰性對照,并將實驗分為5637/ILK+PLK1 siRNA組和5637/ILK組。運用Western blot分別檢測兩組細胞中PLK1的表達; TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒檢測兩組細胞的凋亡;劃痕實驗檢測兩組細胞遷移能力;運用流式細胞儀檢測兩組細胞中活性氧（ROS）的含量。結(jié)果 Western blot結(jié)果顯示,5637/ILK組ILK蛋白表達較5637/NC組明顯增高（P <0.05）; PLK... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,51(08)

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【部分圖文】：

Western blot檢測5637/NC組和5637/ILK組中ILK基因的蛋白表達水平

Western blot檢測5637/ILK組和5637/ILK+PLK1siRNA組中PLK1基因的蛋白表達水平

劃痕實驗結(jié)果顯示，5637/ILK+PLK1 siRNA組細胞在24 h內(nèi)遷移距離小于5637/ILK組(見圖4)，通過計算得出5637/ILK+PLK1 siRNA組細胞的遷移距離為(953.73±95.24)μm，而5637/ILK組細胞的遷移距離為(1 771.47±92.86)μm，結(jié)果表明siRNA PLK1可以促使5637/ILK細胞的遷移能力顯著下降。圖4 細胞劃痕實驗檢測5637/ILK+PLK1siRNA和5637/ILK組細胞的遷移能力(×200)


本文編號：3346883