目的探討H19調(diào)控自然殺傷（NK）細(xì)胞對(duì)前列腺癌（PC）細(xì)胞的殺傷作用及其機(jī)制。方法將si-NC、si-H19、pcDNA3.1、pcDNA3.1-H19、miR-NC、miR-130-5p、anti-miR-NC、anti-miR-130-5p質(zhì)粒載體分別轉(zhuǎn)染至正常培養(yǎng)的PC細(xì)胞中;將si-NC,si-H19、miR-NC、miR-130-5p質(zhì)粒載體分別轉(zhuǎn)染至PC-3細(xì)胞與NK細(xì)胞共培養(yǎng)的細(xì)胞中;將si-H19分別與anti-miR-NC、anti-miR-130-5p質(zhì)粒載體共轉(zhuǎn)染至PC-3細(xì)胞與NK細(xì)胞共培養(yǎng)的細(xì)胞中;轉(zhuǎn)染均采用脂質(zhì)體法。噻唑藍(lán)（MTT）法檢測(cè)細(xì)胞增殖;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)干擾素（IFN）-γ和腫瘤壞死因子（TNF）-α的表達(dá)水平;qRT-PCR檢測(cè)miR-130-5p和H19 mRNA的表達(dá)水平;Western印跡檢測(cè)白細(xì)胞抗原（HLA）-G蛋白表達(dá);雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)熒光活性。結(jié)果 PC細(xì)胞中H19高表達(dá),miR-130-5p低表達(dá)。干擾H19表達(dá)和過(guò)表達(dá)miR-130-5p均抑制與NK細(xì)胞共培養(yǎng)的PC-3細(xì)胞的存活,抑制HLA-G... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)老年學(xué)雜志. 2020,40(24)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

抑制H19對(duì)HLA-G蛋白表達(dá)的影響

miR-NC組比較,miR-130-5p組PC-3細(xì)胞與NK細(xì)胞共培養(yǎng)后miR-130-5p的表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)。與miR-NC組比較,miR-130-5p組PC-3細(xì)胞與NK細(xì)胞共培養(yǎng)后對(duì)PC-3細(xì)胞存活率顯著降低(P<0.05)。miR-NC組比較,miR-130-5p組PC-3細(xì)胞與NK細(xì)胞共培養(yǎng)后NK細(xì)胞中IFN-γ、TNF-α的表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)。與miR-NC組比較,miR-130-5p組PC-3細(xì)胞HLA-G蛋白的表達(dá)水顯著降低(P<0.05)。見(jiàn)圖3,表4。表3 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn) ( x ˉ ±s,n=3) 組別 WT-H19 MUT-H19 miR-NC組 1.01±0.07 1.03±0.08 miR-130-5p組 0.34±0.02 0.98±0.06 t/P值 15.940/0.000 0.866/0.435

表3 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn) ( x ˉ ±s,n=3) 組別 WT-H19 MUT-H19 miR-NC組 1.01±0.07 1.03±0.08 miR-130-5p組 0.34±0.02 0.98±0.06 t/P值 15.940/0.000 0.866/0.4352.5 抑制miR-130-5p表達(dá)的PC-3細(xì)胞與NK細(xì)胞共培養(yǎng)后能逆轉(zhuǎn)干擾H19增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)PC-3細(xì)胞的殺傷作用

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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