目的:以急性腎損傷（AKI）大鼠的腎臟勻漿上清孵育骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）,體外模擬AKI微環(huán)境,觀察經(jīng)血紅素加氧酶-1（HO-1）基因修飾的BMSCs的存活能力,并探討其機(jī)制。方法:基因轉(zhuǎn)染技術(shù)獲得HO-1-BMSCs和e GFP-BMSCs（空載體對(duì)照）,檢測(cè)HO-1水平。制作缺血再灌注誘導(dǎo)的AKI大鼠腎臟勻漿上清（AKI-KHS）和正常大鼠腎臟勻漿上清（N-KHS）用于孵育BMSCs,檢查各組BMSCs的存活差異,并對(duì)影響B(tài)MSCs存活的凋亡蛋白及炎癥因子水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:成功轉(zhuǎn)染的HO-1-BMSCs可高效表達(dá)HO-1。AKI-KHS孵育的BMSCs有絲分裂停滯,伴隨著PCNA表達(dá)減弱。HO-1過表達(dá)可顯著降低G0/G1期BMSCs細(xì)胞比例,增加PCNA+BMSCs的比例,細(xì)胞內(nèi)cleaved Caspase-3水平顯著降低,Bcl-2表達(dá)升高。AKI-KHS孵育的BMSCs上清中可檢測(cè)到大量的炎癥因子,HO-1過表達(dá)可降低炎癥因子水平。結(jié)論:HO-1過表達(dá)可恢復(fù)AKI微環(huán)境中培養(yǎng)BMSCs正常的有絲分裂,存活能力增強(qiáng),抗氧化、抗凋亡和抗炎為其發(fā)揮作用的可能機(jī)制。 

【文章來源】：中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志. 2020,21(09)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)染細(xì)胞的HO-1水平

Western印跡檢測(cè)顯示:經(jīng)AKI-KHS干預(yù)后，BMSCs的cleaved Caspase-3水平顯著增加，伴隨著Bcl-2的表達(dá)降低。但經(jīng)HO-1基因修飾后，孵育的BMSCs的cleaved Caspase-3表達(dá)降低，Bcl-2的表達(dá)增加(P<0.05)。見圖4。5 HO-1過表達(dá)對(duì)炎癥因子水平的影響

實(shí)驗(yàn)中，AKI-KHS孵育的BMSCs上清中的MCP-1、TNF-α和IL-1β濃度顯著升高(P<0.05)(見圖5)。但與BMSCs/AKI-KHS組相比，HO-1-BM-SCs/AKI-KHS組上清中的MCP-1、TNF-α和IL-1β濃度卻有著顯著降低(P<0.05)。見圖5。討論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]血紅素加氧酶-1在腎臟疾病中的研究進(jìn)展[J]. 沈倩,王利,王浩,彭文.  中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志. 2019(06)
[2]HO-1基因修飾對(duì)急性腎損傷微環(huán)境下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增生分化的影響[J]. 劉楠梅,王會(huì)玲,韓國鋒,于秀峙,田軍,胡偉鋒,張金元.  中華腎病研究電子雜志. 2015(04)
[3]Heme oxygenase-1 protects rat liver against warm ischemia/reperfusion injury via TLR2/TLR4-triggered signaling pathways[J]. Han-Fei Huang,Zhong Zeng,Kun-Hua Wang,Hai-Yan Zhang,Shuai Wang,Wen-Xiang Zhou,Zhan-Bo Wang,Wang-Gang Xu,Jian Duan.  World Journal of Gastroenterology. 2015(10)
[4]干細(xì)胞在腎臟疾病中的研究進(jìn)展[J]. 汪年松,姜珍珍.  中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志. 2014(03)



本文編號(hào)：3330292