目的:1、探討氧化低密度脂蛋白（Oxidized Low Density Lipoprotein,ox-LDL）對造影劑誘導腎小管上皮細胞凋亡的影響。2、建立ox-LDL加重造影劑所致急性腎損傷（Contrast-induced Acute Kidney Injury,CI-AKI）的體外模型。3、在ox-LDL加重CI-AKI體外模型的基礎(chǔ)上探討線粒體損傷、線粒體自噬、氧化應(yīng)激在ox-LDL加重造影劑誘導腎小管上皮細胞凋亡中作用。方法:1、本實驗采用大鼠腎小管上皮細胞（NRK-52E）作為體外培養(yǎng)的研究對象。2、不同濃度（0、25、50mg/mL）的ox-LDL和碘海醇（100 mgI/mL）共同培養(yǎng)NRK-52E細胞4小時,流式細胞儀檢測各組NRK-52E細胞的凋亡情況。探索不同濃度的ox-LDL對造影劑誘導腎小管上皮細胞的影響,并摸索出ox-LDL加重CI-AKI體外模型的最佳ox-LDL濃度。3、在上述實驗中得到的最佳ox-LDL濃度進行后續(xù)實驗。將NRK-52E細胞分為4組:對照組（control組）、碘海醇組（Iohexol組）、ox-LDL組、碘海醇和ox-LDL組;（1... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Ox-LDL對造影劑誘導NRK-52E細胞凋亡的影響

圖 2 Ox-LDL 對造影劑誘導 ROS 表達的影響注：Relative fluorescence intensity:相對熒光強度；A06:陽性對照組；A01:陰性對照組；對照組;A03:碘海醇組；A04:ox-LDL 組；A05:ox-LDL 和碘海醇組；Control:對照組；Ioh碘海醇組；ox-LDL:ox-LDL 組；Iohexol+ox-LDL:碘海醇和 ox-LDL 組；*P<0.05 vs co#P<0.05 vs iohexol，&P<0.05 vs ox-LDL。1.2.3 Ox-LDL 對造影劑誘導線粒體內(nèi) Cyt c 釋放的影響線粒體功能正常時，Cyt c 主要存在于線粒體，當線粒體損傷后，Cyt 會從線粒體釋放到細胞質(zhì)。因此胞質(zhì)內(nèi) Cyt c 與線粒體內(nèi) Cyt c 的比值可線粒體損傷程度。如圖 4 所示，與對照組相比，碘海醇組、ox-LDL 組及碘和 ox-LDL 組的胞質(zhì)內(nèi) Cyt c 與線粒體內(nèi) Cyt c 的比值升高（P<0.05)；與醇組相比，碘海醇 ox-LDL 組的細胞質(zhì)內(nèi) Cyt c 與線粒體內(nèi) Cyt c 的比值更加明顯（P<0.05)，表明碘海醇可誘導線粒體內(nèi) Cyt c 釋放， ox-LDL 進加重碘海醇誘導的線粒體內(nèi) Cyt c 釋放。

圖 2 Ox-LDL 對造影劑誘導 ROS 表達的影響注：Relative fluorescence intensity:相對熒光強度；A06:陽性對照組；A01:陰性對照組； A02:對照組;A03:碘海醇組；A04:ox-LDL 組；A05:ox-LDL 和碘海醇組；Control:對照組；Iohexol:碘海醇組；ox-LDL:ox-LDL 組；Iohexol+ox-LDL:碘海醇和 ox-LDL 組；*P<0.05 vs control，#P<0.05 vs iohexol，&P<0.05 vs ox-LDL。1.2.3 Ox-LDL 對造影劑誘導線粒體內(nèi) Cyt c 釋放的影響線粒體功能正常時，Cyt c 主要存在于線粒體，當線粒體損傷后，Cyt c 則會從線粒體釋放到細胞質(zhì)。因此胞質(zhì)內(nèi) Cyt c 與線粒體內(nèi) Cyt c 的比值可代表線粒體損傷程度。如圖 4 所示，與對照組相比，碘海醇組、ox-LDL 組及碘海醇和 ox-LDL 組的胞質(zhì)內(nèi) Cyt c 與線粒體內(nèi) Cyt c 的比值升高（P<0.05)；與碘海醇組相比，碘海醇 ox-LDL 組的細胞質(zhì)內(nèi) Cyt c 與線粒體內(nèi) Cyt c 的比值升高更加明顯（P<0.05)，表明碘海醇可誘導線粒體內(nèi) Cyt c 釋放， ox-LDL 進一步加重碘海醇誘導的線粒體內(nèi) Cyt c 釋放。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]高膽固醇血癥對大鼠造影劑腎損害的影響[J]. 楊定位,林珊,楊定平,韋麗,商文雅.  中華醫(yī)學雜志. 2012 (20)
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[3]氧化應(yīng)激在碘海醇誘導人腎小管上皮細胞凋亡中的作用[J]. 戴寧,吳華,李天慧,趙班,陳歡,李湛.  北京醫(yī)學. 2010(05)
[4]Dietary hypercholesterolemia aggravates contrast media-induced nephropathy[J]. 楊定位,賈汝漢,楊定平,丁國華,黃從新.  Chinese Medical Journal. 2004(04)



本文編號：3330161