目的：探討Nrf2/HO-1通路在氧化應(yīng)激（Oxidative stress,OS）致終末期腎病血管鈣化中作用和機制,為終末期腎病血管鈣化的干預(yù)提供新思路。方法：1.取對數(shù)生長期大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞（Rat aortic vascular smooth muscle cells,RASMCs）傳代分組（n=4）培養(yǎng)48h:完全培養(yǎng)基培養(yǎng)組;鈣化培養(yǎng)基培養(yǎng)組;完全培養(yǎng)基培養(yǎng)42h+含5μM萊菔硫烷（Sulforaphane,SFN）完全培養(yǎng)基干預(yù)6h組;完全培養(yǎng)基培養(yǎng)46h+含0.01m M過氧化氫完全培養(yǎng)基干預(yù)2h組。以Western blot檢測細(xì)胞核內(nèi)核轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子2（Nuclearfactor-erythroid2-relatedfactor-2,Nrf2）的表達(dá)。2.取對數(shù)生長期RASMCs傳代分組（n=4）:單獨鈣化培養(yǎng)基組、過氧化氫預(yù)處理2h+鈣化培養(yǎng)基組、SFN預(yù)處理6h+鈣化培養(yǎng)基組、SFN預(yù)處理6h+過氧化氫預(yù)處理2h+鈣化培養(yǎng)基組。各組以DCFH-DA為探針檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平,western ... 

【文章來源】：川北醫(yī)學(xué)院四川省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度過氧化氫預(yù)處理2h鈣化培養(yǎng)基培養(yǎng)48h后顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化（×100）

川北醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文2.1.2 CCK-8 檢測細(xì)胞活性表 1 過氧化氫預(yù)處理 2h，鈣化培養(yǎng) 48h 后 RASMCs 活性比較注：* 與對照組相比較 P<0.05。過氧化氫濃度（mM）0（陰性對照組） 0.01 0.02 0.05 0.08OD 值 1.013±0.040 0.988±0.017 0.612±0.007*0.571±0.008*0.559±0.006*（x±S）

圖 3 各實驗組 RASMCs 內(nèi) ROS 熒光強度 D 值比較A：單獨鈣化培養(yǎng)基組； B：過氧化氫預(yù)處理 2h+鈣化培養(yǎng)基組； C：SFN 預(yù)處理 6h+鈣化培養(yǎng)基組；D：SFN 預(yù)處理 6h+ 過氧化氫預(yù)處理 2h+鈣化培養(yǎng)基組； E：0 h 時段不同干預(yù)組； F：48 h 時段不同干預(yù)組（* 與 0h 時段相比較，P<0.05；** 與 0h 時段相比較，P<0.01；# 與單獨鈣化培養(yǎng)基組相比較，P<0.05；## 與單獨鈣化培養(yǎng)基組相比較，P<0.01）。2.3 Western blot 檢測 RASMCs 蛋白的表達(dá)2.3.1 鈣化培養(yǎng)基誘導(dǎo) RASMCs 總 Nrf2 表達(dá)增強，對 Nrf2 核轉(zhuǎn)位表達(dá)水平無影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Why do young people with chronic kidney disease die early?[J]. Shankar Kumar,Richard Bogle,Debasish Banerjee.  World Journal of Nephrology. 2014(04)
[2]Lowering vascular calcification burden in chronic kidney disease:Is it possible?[J]. Sinee Disthabanchong.  World Journal of Nephrology. 2013(03)
[3]Vascular calcification in chronic kidney disease: Pathogenesis and clinical implication[J]. Sinee Disthabanchong.  World Journal of Nephrology. 2012(02)



本文編號：3326560