發(fā)布時間：2021-08-03 07:24

　　目的研究CD4+T淋巴細胞的亞型特別是Th2亞型在腎間質(zhì)纖維化進程中發(fā)揮的作用，為防治腎間質(zhì)纖維化提供新思路。方法選擇野生型BALB/c小鼠和BALB/c裸鼠，采用單側(cè)輸尿管梗阻（UUO）的方法建立小鼠腎纖維化模型。將野生型BALB/c小鼠進行UUO手術(shù)，以正常野生型BALB/c小鼠為對照，手術(shù)后3天、7天、14天處死小鼠并分別提取脾CD4+T淋巴細胞并誘導(dǎo)分化，采用流式檢測各亞型的CD4+T淋巴細胞。將BALB/c裸鼠隨機分為四組，A組為假手術(shù)組，B組為PBS+UUO手術(shù)組，C組為Th1細胞免疫重建+UUO手術(shù)組，D組為Th2細胞免疫重建+UUO手術(shù)組。于術(shù)后14天處死小鼠，取輸尿管梗阻側(cè)腎臟，用HE、MASSON染色以及免疫組化來比較各組腎臟炎性細胞的浸潤程度和纖維化程度，采用qRT-PCR檢測腎臟fibronectin,TGF-β，CollagenⅠ的mRNA的表達。使用ELISA和qRT-PCR檢測Th1、Th2細胞免疫重建裸鼠脾臟CD4+T淋巴細胞的相關(guān)細胞因子和轉(zhuǎn)錄因子的表達。結(jié)果Th1細胞在野生型BALB/c小鼠UUO術(shù)后第三天所占比例最多，隨后逐天減少，Th2細胞所占比... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

流式檢測各亞型的CD4+T淋巴細胞比例變化

23圖 2 Th1/Th2 免疫重建 BALB/c 裸鼠行 UUO 術(shù)后纖維化程度（a）對 A、B、C、D 四組裸鼠的腎臟行 H E 染色、MASSON 染色以及 α-SMA 和 vimentin免疫組織化學(xué)染色（光鏡×400）（b）對四組 MASSON 染色結(jié)果陽性面積的定量分析（c）對四組α-SMA 和vimentin免疫組織化學(xué)染色結(jié)果陽性面積的定量分析（d）qRT-PCR 檢測四組腎臟組織 fibronectin、TGF-β 和 CollagenⅠ的 mRNA 的表達 *表示與 B 組比較p<0.05，**表示與 B 組比較 p<0.01，##表示與 C 組比較 p<0.01，***表示與 B 組比較p<0.001。

3 ELISA 檢測野生型 BALB/c 小鼠脾臟 Th1 和 Th2 細胞以及 Th1、Th2 細疫重建 BALB/c 裸鼠脾臟 CD 4+T 淋巴細胞細胞因子的表達。示 Th1 細胞免疫重建裸鼠的 CD4+T 淋巴細胞組與 Th1 細胞組比較 p<0.0示表示 Th1 細胞免疫重建裸鼠的 CD4+T 淋巴細胞組與 Th1 細胞組比較.01。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]腎纖維化的分子病理機制探討[J]. 王穎航,潘志,南紅梅,王耀獻,南征.  中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志. 2006(01)
[2]Effects of transmitters and interleukin-10 on rat hepatic fibrosis induced by CCl4[J]. Xiao-Zhong Wang Li-Juan Zhang Dan Li Yue-Hong Huang Zhi-Xin Chen BinLi Department of Gastroenterology, The Affiliated Union Hospital, Fujian Medical University, Fuzhou, 350001, Fujian Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2003(03)



本文編號：3319215