背景腎小管間質(zhì)纖維化（Tubulointerstitial fibrosis,TIF）在糖尿病腎臟病（diabetic kidney disease,DKD）進(jìn)程中起了非常重要的作用。有關(guān)Klotho蛋白和多種微小RNA（microRNA,miRNA）對(duì)TIF作用的報(bào)道很多,但尚未見(jiàn)關(guān)于Klotho與miRNA的關(guān)系及作用機(jī)制的研究。本研究旨在探索Klotho和miR-21a-5p（miR-21）,miR-34a-5p（miR-34）在 DKD 進(jìn)展中的關(guān)系及作用機(jī)制;并證實(shí)miR-34是通過(guò)SIRT1發(fā)揮促纖維化作用。方法1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)高脂飲食/鏈脲佐菌素（the high fat diet-fed and streptozotocin,HFD/STZ）誘導(dǎo)C57BL/6J小鼠制造糖尿病模型,正常同系小鼠作為對(duì)照。采用水流動(dòng)力學(xué)方法給成模12w的DM小鼠尾靜脈分別轉(zhuǎn)染pCMV-Klotho質(zhì)粒和pCMV-Vector質(zhì)粒（n=6）。留取血、尿標(biāo)本行生化指標(biāo)檢測(cè)。取腎臟組織行Masson染色、免疫組化染色。2、細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染人腎小管上皮細(xì)胞株（HK2）,于含低糖DMEM培養(yǎng)基+10%FB... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：131 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３兩組Ｋｌｏｔｈｏ，?ＦＮ?ａｎｄ?ａＳＭＡ基因的蛋白表達(dá)??

與Ｃｏｎｔｒｏｌ組相比，ＤＭ組小鼠腎皮質(zhì)中Ｋｌｏｔｈｏ蛋白的表達(dá)明顯減少，而ＦＮ??ａＳＭＡ呈彌漫性表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞中，與Ｃｏｎｔｒｏｌ組相比，ＤＭ組小鼠腎皮??質(zhì)中出現(xiàn)明顯增多，腎小管上皮細(xì)胞呈彌漫性棕色深染（箭頭所指）（圖１－??４）?〇??Ｍａｓｓｏｎ－Ｔｒｉｃｈｒｏｍｅ?Ｋｌｏｔｈｏ?ＦＮ?ａＳＭＡ??ｍ??■、■??圖１－４兩組小鼠腎皮質(zhì)中腎小管間質(zhì)膠原表達(dá)（Ｍａｓｓｏｎ染色，ｘ４００）和Ｋｌｏｔｈｏ、ＦＮ、??ｃｃＳＭＡ蛋白表達(dá)情況（ＩＨＣ，ｘ４００）??Ｆｉｇ．?１－４?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ?ｃｏｌｌａｇｅｎ?ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ?（Ｍａｓｓｏｎ?ｓｔａｉｎｉｎｇ，?ｘ４００）?ａｎｄ??ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｋｌｏｔｈｏ、ＦＮ、ａＳＭＡ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｋｉｄｎｅｙ?ｃｏｒｔｅｘ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｔｗｏ?ｇｒｏｕｐｓ?（ＩＨＣ，?ｘ４００）??２．５?ＨＧ刺激后ＨＫ２中Ｋｌｏｔｈｏ?ｍＲＮＡ和蛋白及ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－３４表達(dá)變化??２．５．１?ＨＧ刺激后ＨＫ２中Ｋｌｏｔｈｏ?ｍＲＮＡ和蛋白表達(dá)變化??用３０ｍＭ高糖培養(yǎng)ＨＫ２細(xì)胞后，Ｋｌｏｔｈｏ?ｍＲＮＡ表達(dá)水平在孵育２４ｈ后出??現(xiàn)降低，為?Ｏｈ?的?７３．２１％?（Ｐ＜０．０５），４８ｈ?降為?Ｏｈ?的和?４９．１４％?（Ｐ＜０．０１）；??Ｋｌｏｔｈｏ蛋白表達(dá)水平在孵育２４ｈ后出現(xiàn)降低，為Ｏｈ的７２．６２％?（Ｐ＜０．０５），４８ｈ??降為?Ｏｈ?的和?５２．５２％?（Ｐ＜０．０１）（表?１－５

圖２－７?Ｃｈｉｐ檢測(cè)各組ＮＦ－ｋＢ?ｐ６５與ｍｉＲ－３４啟動(dòng)子結(jié)合的情況??Ｆｉｇ?２－７．?ＮＦ－ｋＢ?ｐ６５?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｔｏ?ｍｉＲ－３４?ｐｒｏｍｏｔｅｒ?ｉｎ?ｖａｒｉｏｕｓ?ｇｒｏｕｐｓ?ｂｙ?ＣｈＩＰ??６１??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]糖尿病腎病診治新進(jìn)展[J]. 薛耀明.  中國(guó)處方藥. 2005(06)

博士論文
[1]Klotho下調(diào)Egr-1抑制糖尿病腎臟病腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的作用及機(jī)制研究[D]. 李揚(yáng).南方醫(yī)科大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3316996