背景腎小管間質(zhì)纖維化（Tubulointerstitial fibrosis,TIF）在糖尿病腎臟病（diabetic kidney disease,DKD）進程中起了非常重要的作用。有關(guān)Klotho蛋白和多種微小RNA（microRNA,miRNA）對TIF作用的報道很多,但尚未見關(guān)于Klotho與miRNA的關(guān)系及作用機制的研究。本研究旨在探索Klotho和miR-21a-5p（miR-21）,miR-34a-5p（miR-34）在 DKD 進展中的關(guān)系及作用機制;并證實miR-34是通過SIRT1發(fā)揮促纖維化作用。方法1、動物實驗高脂飲食/鏈脲佐菌素（the high fat diet-fed and streptozotocin,HFD/STZ）誘導C57BL/6J小鼠制造糖尿病模型,正常同系小鼠作為對照。采用水流動力學方法給成模12w的DM小鼠尾靜脈分別轉(zhuǎn)染pCMV-Klotho質(zhì)粒和pCMV-Vector質(zhì)粒（n=6）。留取血、尿標本行生化指標檢測。取腎臟組織行Masson染色、免疫組化染色。2、細胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染人腎小管上皮細胞株（HK2）,于含低糖DMEM培養(yǎng)基+10%FB... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：131 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３兩組Ｋｌｏｔｈｏ，?ＦＮ?ａｎｄ?ａＳＭＡ基因的蛋白表達??

與Ｃｏｎｔｒｏｌ組相比，ＤＭ組小鼠腎皮質(zhì)中Ｋｌｏｔｈｏ蛋白的表達明顯減少，而ＦＮ??ａＳＭＡ呈彌漫性表達于腎小管上皮細胞中，與Ｃｏｎｔｒｏｌ組相比，ＤＭ組小鼠腎皮??質(zhì)中出現(xiàn)明顯增多，腎小管上皮細胞呈彌漫性棕色深染（箭頭所指）（圖１－??４）?〇??Ｍａｓｓｏｎ－Ｔｒｉｃｈｒｏｍｅ?Ｋｌｏｔｈｏ?ＦＮ?ａＳＭＡ??ｍ??■、■??圖１－４兩組小鼠腎皮質(zhì)中腎小管間質(zhì)膠原表達（Ｍａｓｓｏｎ染色，ｘ４００）和Ｋｌｏｔｈｏ、ＦＮ、??ｃｃＳＭＡ蛋白表達情況（ＩＨＣ，ｘ４００）??Ｆｉｇ．?１－４?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ?ｃｏｌｌａｇｅｎ?ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ?（Ｍａｓｓｏｎ?ｓｔａｉｎｉｎｇ，?ｘ４００）?ａｎｄ??ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｋｌｏｔｈｏ、ＦＮ、ａＳＭＡ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｋｉｄｎｅｙ?ｃｏｒｔｅｘ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｔｗｏ?ｇｒｏｕｐｓ?（ＩＨＣ，?ｘ４００）??２．５?ＨＧ刺激后ＨＫ２中Ｋｌｏｔｈｏ?ｍＲＮＡ和蛋白及ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－３４表達變化??２．５．１?ＨＧ刺激后ＨＫ２中Ｋｌｏｔｈｏ?ｍＲＮＡ和蛋白表達變化??用３０ｍＭ高糖培養(yǎng)ＨＫ２細胞后，Ｋｌｏｔｈｏ?ｍＲＮＡ表達水平在孵育２４ｈ后出??現(xiàn)降低，為?Ｏｈ?的?７３．２１％?（Ｐ＜０．０５），４８ｈ?降為?Ｏｈ?的和?４９．１４％?（Ｐ＜０．０１）；??Ｋｌｏｔｈｏ蛋白表達水平在孵育２４ｈ后出現(xiàn)降低，為Ｏｈ的７２．６２％?（Ｐ＜０．０５），４８ｈ??降為?Ｏｈ?的和?５２．５２％?（Ｐ＜０．０１）（表?１－５

圖２－７?Ｃｈｉｐ檢測各組ＮＦ－ｋＢ?ｐ６５與ｍｉＲ－３４啟動子結(jié)合的情況??Ｆｉｇ?２－７．?ＮＦ－ｋＢ?ｐ６５?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｔｏ?ｍｉＲ－３４?ｐｒｏｍｏｔｅｒ?ｉｎ?ｖａｒｉｏｕｓ?ｇｒｏｕｐｓ?ｂｙ?ＣｈＩＰ??６１??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]糖尿病腎病診治新進展[J]. 薛耀明.  中國處方藥. 2005(06)

博士論文
[1]Klotho下調(diào)Egr-1抑制糖尿病腎臟病腎小管上皮細胞轉(zhuǎn)分化的作用及機制研究[D]. 李揚.南方醫(yī)科大學 2017



本文編號：3316996