【摘要】：目的觀察轉(zhuǎn)染T-BOX轉(zhuǎn)錄因子2(tbx2)小干擾RNA(siRNA)對(duì)人非雄激素依賴性前列腺癌PC3細(xì)胞和雄激素依懶性前列腺癌LNCaP細(xì)胞增殖、遷移、侵襲及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的影響。方法將體外培養(yǎng)的人前列腺癌PC3細(xì)胞隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組,通過Si Lent Fect TM Lipid Reagent技術(shù)分別轉(zhuǎn)染tbx2 siRNA和陰性對(duì)照siRNA,繼續(xù)培養(yǎng)48 h。采用Western blotting法檢測(cè)兩組細(xì)胞中tbx2蛋白相對(duì)表達(dá)量。采用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(CCK-8)法檢測(cè)兩組細(xì)胞增殖活性(以O(shè)D_(450)表示)。采用Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)兩組細(xì)胞遷移細(xì)胞數(shù)。采用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)兩組細(xì)胞侵襲細(xì)胞數(shù)。采用Western blotting法檢測(cè)兩組細(xì)胞EMT相關(guān)標(biāo)志物E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、N-鈣黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纖維黏連蛋白(Fibronectin)及EMT相關(guān)上游轉(zhuǎn)錄因子Snail、Twist的表達(dá)。另取LNCaP細(xì)胞進(jìn)行相同實(shí)驗(yàn)。結(jié)果轉(zhuǎn)染48 h后觀察組、對(duì)照組PC3細(xì)胞中tbx2相對(duì)表達(dá)量分別為0.345±0.016、0.723±0.031,LNCaP細(xì)胞中tbx2相對(duì)表達(dá)量分別為0.315±0.006、0.692±0.010。觀察組PC3、LNCaP細(xì)胞中tbx2相對(duì)表達(dá)量均低于對(duì)照組(P均0.05)。將轉(zhuǎn)染后的兩種前列腺癌細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)24、48、72 h后,PC3細(xì)胞對(duì)照組OD_(450)值分別為0.487±0.026、0.868±0.031、1.387±0.107,觀察組分別為0.315±0.022、0.550±0.027、0.765±0.046。LNCaP細(xì)胞對(duì)照組OD_(450)值分別為0.388±0.032、0.722±0.032、1.187±0.135,觀察組分別為0.251±0.021、0.450±0.037、0.625±0.066。相同時(shí)間點(diǎn)觀察組PC3、LNCaP細(xì)胞OD_(450)低于對(duì)照組(P均0.05)。觀察組與對(duì)照組PC3細(xì)胞遷移細(xì)胞數(shù)分別為(118.67±6.11)、(292.33±5.03)個(gè);LNCaP細(xì)胞遷移細(xì)胞數(shù)分別為(85.67±4.31)、(192.33±8.07)個(gè)。觀察組PC3、LNCaP細(xì)胞遷移數(shù)目均低于對(duì)照組(P均0.05)。觀察組,對(duì)照組PC3細(xì)胞侵襲細(xì)胞數(shù)分別為(89.00±3.02)、(186.33±5.84)個(gè);LNCaP細(xì)胞侵襲細(xì)胞數(shù)分別為(81.67±3.42)、(232.33±7.42)個(gè)。觀察組PC3、LNCaP細(xì)胞遷移數(shù)目均低于對(duì)照組(P均0.05)。觀察組PC3、LNCaP細(xì)胞E-adherin表達(dá)高于對(duì)照組(P均0.05);N-cadherin、Vimentin、Fibronectin及Snail、Twist相對(duì)表達(dá)量低于對(duì)照組(P均0.05)。結(jié)論轉(zhuǎn)染tbx2 siRNA可以抑制細(xì)胞增殖,降低細(xì)胞遷移及侵襲能力,抑制細(xì)胞EMT過程。

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2 李婭;陳楠;俞海瑾;董曉蓓;黃秋花;;骨形成蛋白-7基因轉(zhuǎn)染對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞外基質(zhì)分泌的影響[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2006年08期

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