【摘要】：【背景】雄激素及雄激素受體(Androgen receptor,AR)其對(duì)男性生殖功能和精子的發(fā)生至關(guān)重要。細(xì)胞膜上的AR參與了雄激素的非經(jīng)典途經(jīng)作用,但是細(xì)胞膜上是否存在AR仍存在爭(zhēng)議,膜上AR的具體作用尚未完全明確�！灸康摹刻骄啃奂に亟閷�(dǎo)的AR胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)分子機(jī)制�！痉椒ā渴褂玫鞍酌庖哂≯E(Western blot,WB)和免疫熒光技術(shù)驗(yàn)證TM4(一種小鼠睪丸支持細(xì)胞系)在睪酮刺激后胞內(nèi)AR的定位改變。采用磷酸化抗體芯片檢測(cè)參與AR膜轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白磷酸化,運(yùn)用各類蛋白激酶拮抗劑驗(yàn)證并探究各蛋白激酶之間相互作用與AR膜轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)系�！窘Y(jié)果】生理濃度的睪酮(10 n M)可以引起TM4細(xì)胞質(zhì)中AR的快速向細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)。我們進(jìn)一步研究AR快速轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制,采用磷酸化抗體芯片,發(fā)現(xiàn)睪酮刺激引起MEK1/2(Ser217/221),Akt(Ser473)和Erk1/2(Thr202/Tyr204)等位點(diǎn)的快速磷酸化。抑制MEK和Akt信號(hào)通路可以阻止睪酮刺激下AR在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn);AR拮抗劑氟他胺拮抗孵育細(xì)胞,抑制睪酮對(duì)位點(diǎn)的磷酸化作用。睪酮可以誘導(dǎo)Src激酶(Src tyrosine kinase,Src)磷酸化,Src抑制劑PP2抑制胞質(zhì)中AR向細(xì)胞核以及細(xì)胞質(zhì)中的轉(zhuǎn)運(yùn)。【結(jié)論】睪酮和細(xì)胞膜上的AR結(jié)合活化,激活細(xì)胞內(nèi)MEK和Akt信號(hào)通路,最終細(xì)胞質(zhì)中AR復(fù)合體中Src激酶磷酸化,促進(jìn)胞質(zhì)內(nèi)AR向細(xì)胞膜及細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)。
[Abstract]:Background androgen and androgen receptor (Androgen receptor,AR) are important for male reproductive function and spermatogenesis. The AR on the cell membrane is involved in the non-classical pathway of androgen, but the existence of AR on the cell membrane is still controversial. The specific role of AR on membrane has not been completely clarified. [objective] to explore the molecular mechanism of androgen-mediated intracellular transport of AR. [methods] Western imprinting (Western blot, was used WB) and immunofluorescence techniques were used to verify the localization of TM4 (a mouse testicular support cell line) after testosterone stimulation. The phosphorylation of proteins involved in AR membrane transport was detected by phosphorylation antibody chip. Various protein kinase antagonists were used to verify and explore the relationship between the interaction of protein kinases and AR membrane transport. [results] physiological concentration of testosterone (10 n M) could induce the rapid transport of AR from TM4 cytoplasm to cell membrane. We further studied the mechanism of rapid transport of AR. Using phosphorylation antibody chip, we found that testosterone stimulation induced rapid phosphorylation of MEK1/2 (Ser217/221), Akt (Ser473) and Erk1/2 (Thr202/Tyr204). Inhibition of MEK and Akt signaling pathways could prevent intracellular transport of AR stimulated by testosterone, while flutamine, a AR antagonist, antagonized incubated cells and inhibited the phosphorylation of testosterone at sites. Testosterone can induce phosphorylation of Src kinase (Src tyrosine kinase,Src, and Src inhibitor PP2 can inhibit the transport of AR from cytoplasm to nucleus and cytoplasm. [conclusion] testosterone binds to AR on cell membrane and activates intracellular MEK and Akt signaling pathways. Finally, the phosphorylation of Src kinase in the cytoplasm of AR complex promotes the transport of AR into the cell membrane and nucleus.
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R698.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 查旭山,顧偉程;正常男女須部雌雄激素受體的研究[J];中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志;2000年01期

2 王海青;楊崇禮;;雄激素的療愈原理[J];天津醫(yī)藥;1986年05期

3 崔毓桂;雄激素受體研究方法及其進(jìn)展[J];實(shí)用男科雜志;1996年03期

4 劉穎,陸一帆;運(yùn)動(dòng)對(duì)制動(dòng)大鼠骨骼肌中雄激素受體的影響[J];中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

5 張子彥;雄激素受體的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè));2002年02期

6 江軍,金錫御,靳風(fēng)爍,王洛夫;雄激素對(duì)大鼠前列腺不同分葉雄激素受體及其mRNA表達(dá)的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年13期

7 陳蕾蕾,姚兵;睪丸外組織雄激素受體的分布及檢測(cè)[J];中華男科學(xué);2003年01期

8 梁軍;雄激素對(duì)淋巴細(xì)胞的調(diào)節(jié)[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2004年03期

9 王洛夫,江軍;雄激素受體在雄激素非依賴性前列腺癌中的作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年24期

10 楊潔,張秋養(yǎng),葛玲,邱曙東;青春期大鼠實(shí)驗(yàn)性精索靜脈曲張對(duì)附睪雄激素受體的影響[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2005年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 謝駿逸;陳力;;雄激素及其相關(guān)因素對(duì)痤瘡影響的研究進(jìn)展[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

2 游冬青;肖錦松;趙芳;;人雄激素受體激素結(jié)合區(qū)的克隆表達(dá)與活性研究[A];第三屆全國(guó)現(xiàn)代生物物理技術(shù)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2000年

3 邱云霞;曲燕;李相如;于建榮;;雄激素受體抵抗1例[A];第5次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合男科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編暨男科提高班講義[C];2007年

4 田軍;陶天遵;王凱夫;高峰;單雨;李磊;;雄性大鼠成骨細(xì)胞內(nèi)雄激素受體表達(dá)的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第三次全國(guó)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨骨質(zhì)疏松診斷技術(shù)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2004年

5 李霖;李紅;尹雪瑤;潘倩倩;吳芳;;雄激素受體在波動(dòng)性高糖致人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

6 溫俊平;陳剛;薛瑩;;雄激素不敏感綜合征的臨診應(yīng)對(duì)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

7 劉娜;賈影;戚基萍;;雄激素受體在乳腺癌中的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)日程及論文匯編[C];2010年

8 郭東星;張華屏;劉立民;艾曉杰;喬中東;;核因子--κB在雄激素處理的巨噬細(xì)胞中的表達(dá)[A];動(dòng)物學(xué)專輯——上海市動(dòng)物學(xué)會(huì)2002年年會(huì)論文集[C];2002年

9 張曼娜;孫首悅;張惠杰;顧衛(wèi)瓊;洪潔;劉建民;王衛(wèi)慶;寧光;李小英;;4例雄激素受體不敏感型綜合征患者的分子遺傳學(xué)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第二屆糖尿病及性腺疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

10 桂耀庭;;雄激素受體在精子發(fā)生的作用及其分子機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)生殖醫(yī)學(xué)分會(huì)人類精子庫(kù)管理學(xué)組第三屆年會(huì)全國(guó)男性生殖醫(yī)學(xué)和精子庫(kù)管理新進(jìn)展第四次研討會(huì)論文匯編[C];2012年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前4條

1 張超群 李幼玲 范曉莉;山西醫(yī)大第一醫(yī)院研究發(fā)現(xiàn)：雄激素受體與再障貧血有關(guān)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

2 白毅;新型雄激素受體調(diào)節(jié)劑有望治療前列腺癌[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

3 陳茂j　余寧寧;ASC-J9為肌肉萎縮癥治療帶來(lái)曙光[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

4 美國(guó)紐約羅切斯特大學(xué)教授 張傳祥;雄激素 膀胱癌研究新目標(biāo)[N];健康報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 莫文娟;前列腺癌雄激素轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

2 趙靜雯;雄激素受體調(diào)控的eRNA在去勢(shì)抵抗型前列腺癌enzalutamide抵抗中的作用研究[D];吉林大學(xué);2016年

3 盧益甄;前列腺癌遺傳多態(tài)性風(fēng)險(xiǎn)位點(diǎn)功能及機(jī)制分析[D];浙江大學(xué);2016年

4 潘家驊;雄激素/AR-Twist2軸的調(diào)控及其促進(jìn)前列腺癌惡性侵襲的機(jī)制研究[D];上海交通大學(xué);2015年

5 蔣璐頻;雄激素/雄激素受體軸調(diào)控Nanog基因?qū)δ[瘤細(xì)胞干性影響及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2016年

6 浦洋;免疫治療聯(lián)合去勢(shì)療法治療前列腺癌的效果和機(jī)制研究[D];華南理工大學(xué);2016年

7 田申;母親高雄激素對(duì)子代糖代謝的影響及其表觀遺傳機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2015年

8 馬金萍;雄激素受體與缺血性心腦血管病關(guān)系的臨床和基礎(chǔ)初步研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

9 田晶;雄激素受體在前列腺癌干細(xì)胞中的作用及表觀遺傳學(xué)調(diào)節(jié)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

10 王振中;雄激素受體介導(dǎo)的青蒿酯對(duì)前列腺癌生長(zhǎng)的抑制效應(yīng)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2017年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張聰哲;LSD1介導(dǎo)的組蛋白H3K4去甲基化對(duì)雄激素受體調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

2 楊木易;雌激素通過(guò)誘導(dǎo)雄激素抑制性基因SOX4的表達(dá)促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的惡性進(jìn)展[D];山東大學(xué);2015年

3 王琰;二甲雙胍通過(guò)雄激素受體途徑抑制雄激素依賴性和非依賴性前列腺癌[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 戴明莉;金錢(qián)魚(yú)雄激素受體的克隆及其表達(dá)模式的研究[D];廣東海洋大學(xué);2015年

5 徐鵬;醋酸阿比特龍治療轉(zhuǎn)移去勢(shì)抵抗性前列腺癌早期療效和安全性評(píng)價(jià)[D];吉林大學(xué);2016年

6 郭廣柱;3- (4-氟苯基)-1H-吡唑類雄激素受體拮抗劑的合成及其活性評(píng)價(jià)[D];山東大學(xué);2016年

7 陳立黎;雌、雄激素對(duì)羅非魚(yú)性別分化和性腺基因表達(dá)的影響[D];西南大學(xué);2016年

8 吳萬(wàn)明;雄激素受體在乳腺癌中的表達(dá)及意義[D];暨南大學(xué);2016年

9 馬一鳴;雄激素受體在周期性機(jī)械牽拉調(diào)控骨骼肌C2C12細(xì)胞增殖中的作用及機(jī)制[D];上海體育學(xué)院;2016年

10 李光磊;前列腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中雄激素受體促進(jìn)前列腺癌生長(zhǎng)及侵襲轉(zhuǎn)移能力的研究[D];濱州醫(yī)學(xué)院;2015年

，

本文編號(hào)：2493753