【摘要】：男性不育的定義是,育齡夫婦同居一年,未采取任何避孕措施,因男方原因造成女方不孕稱為男性不育。男性不育發(fā)病率呈增高趨勢,已占整個不育夫婦比例的40%-50%。大量的臨床和研究表明,雌雄激素比例失衡是男性不育的重要病因之一,相當(dāng)數(shù)量的不育男性表現(xiàn)出體內(nèi)雄激素水平下降,雌激素水平上升,雌雄激素比例失調(diào)。雖然對于男性不育的研究取得一定成績,但缺乏與激素相關(guān)引發(fā)男性不育且能穩(wěn)定反映病理過程的實驗動物模型,因此對于其機理的研究沒有突破性進(jìn)展。本文以C57BL/6J為背景的芳香化酶超表達(dá)轉(zhuǎn)基因雄鼠AROM+/6J為模型,研究芳香化酶超表達(dá)引起雌雄激素比例失衡進(jìn)而導(dǎo)致雄性不育的分子機制。 本研究發(fā)現(xiàn),AROM+/6J雄鼠血清中雌雄激素(雌二醇／睪酮)水平失調(diào),睪丸萎縮,雄性不育；通過細(xì)胞核增殖抗原(proliferation of cell nuclear antigen, PCNA)的免疫組織化學(xué)分析和整個睪丸Leydig細(xì)胞(LCs)計數(shù)證實雄鼠2月到5月齡睪丸LCs大量增殖,10月齡時睪丸間質(zhì)中巨噬細(xì)胞大量激活而LCs數(shù)目急劇下降,出現(xiàn)睪丸巨噬細(xì)胞吞噬睪丸LCs的現(xiàn)象。由于LCs的作用是分泌睪酮,維持生精,因此巨噬細(xì)胞吞噬LCs是引起雄性不育的重要原因。AROM+/6J鼠和雌激素受體敲除鼠(ERαKO)雜交敲除雄鼠雌激素受體ERa,細(xì)胞計數(shù)發(fā)現(xiàn)AROM+/6J雄鼠睪丸LCs數(shù)目恢復(fù)到和野生型(WT)相同水平,同時發(fā)現(xiàn)睪丸巨噬細(xì)胞激活相關(guān)基因高表達(dá)；同時對AROM+/6J雄鼠施用芳香化酶抑制劑(Letrozole)和雌激素受體ERa抑制劑(Tamoxifen),睪丸表型與WT一致。以上結(jié)果表明雌激素通過其受體ERa引起LCs增殖同時激活巨噬細(xì)胞,引起巨噬細(xì)胞吞噬LCs引發(fā)不育。 進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),雌激素通過其受體ERa引起LCs胞內(nèi)Ca2+濃度上升,進(jìn)而激活了細(xì)胞膜翻轉(zhuǎn)酶(PLSCRs),引起處于增殖狀態(tài)而并不凋亡的LCs釋放“吃我”信號磷脂酰絲氨酸(PS),同時超表達(dá)生長停滯特異性基因6(GAS6)；雌激素通過其受體ERa引起巨噬細(xì)胞表面超表達(dá)TAM受體酪氨酸激酶亞家族(包括TYR03、 MER和AXL)中的AXL超表達(dá),GAS6能夠結(jié)合LCs表面的PS,巨噬細(xì)胞通過AXL-GAS6-PS的非凋亡依賴方式吞噬了正在增殖的LCs。同時,體外分離睪丸LCs和巨噬細(xì)胞共孵育,活細(xì)胞成像系統(tǒng)下也實時觀測到了這種雌激素依賴的吞噬現(xiàn)象。另外,免疫熒光檢測非梗阻性無精子癥男性(NOA)睪丸穿刺切片分子標(biāo)記物(CYP19、GAS6和TNFa),發(fā)現(xiàn)非梗阻性不育男性和不育雄鼠模型分子表達(dá)變化一致。此外,不育男性和正常男性血清學(xué)分析表明,不育男性體內(nèi)雌激素水平上升,雄激素水平下降,雌雄激素比例失調(diào),同時GAS6水平顯著上升,這也印證了小鼠實驗的結(jié)論,說明雄性小鼠不育模型和男性不育具有相關(guān)性。 綜上所述,雌激素通過受體ERa信號引起睪丸LCs增殖,同時通過ERα激活了睪丸巨噬細(xì)胞,引起兩種細(xì)胞基因變化最終導(dǎo)致巨噬細(xì)胞吞噬LCs引發(fā)不育。另外,我們提出將GAS6基因作為臨床治療男性不育的潛在研究靶標(biāo)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R698.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 周向東,蔡文琴;芳香化酶mRNA在肺癌組織中表達(dá)的初步研究[J];中國肺癌雜志;2000年04期

2 高學(xué)勇;王瑋;韓咪莎;林珊;何為民;;環(huán)磷酰胺對大鼠睪丸和附睪的影響[J];解剖學(xué)研究;2009年01期

3 張柳平;邵根寶;潘耀謙;;成年小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞的分離、鑒定及功能檢測[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年09期

4 周安方;男性不育癥的治療經(jīng)驗[J];湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2005年02期

5 葛爭艷;金龍;河福金;董小霞;李宏坤;劉建勛;;腺嘌呤致大鼠少精子癥模型的實驗研究[J];中國計劃生育學(xué)雜志;2009年11期

6 李智會;胡曉芹;符小春;徐冶;劉師兵;于洋;;化療藥物建立小鼠無精子癥模型的實驗研究[J];吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報;2009年03期

7 秦素;涂定英;童志敏;李良君;張銳;張河;郭燕妮;藺顯瓊;朱正芬;何志岐;;伴慢性前列腺炎不育患者的精液分析[J];中華男科學(xué)雜志;2005年11期

8 張翼飛;梁朝朝;;精液延遲液化與慢性前列腺炎的研究進(jìn)展[J];中華男科學(xué)雜志;2007年01期

9 張華;曹海軍;蔡松良;葛超榮;;蠟樣芽胞桿菌感染與精液參數(shù)的相關(guān)性[J];中華男科學(xué)雜志;2007年01期

10 曹繼剛;周安方;舒勁松;黃瓊霞;趙喬;;細(xì)菌性前列腺炎性不育大鼠模型建立初探[J];中華男科學(xué)雜志;2008年04期

，

本文編號：2381916