【摘要】：目的探討膽堿能通路對急性缺糖缺氧性腎小管細(xì)胞損傷的影響。方法分離培養(yǎng)大鼠腎內(nèi)巨噬細(xì)胞,構(gòu)建巨噬細(xì)胞與腎小管上皮細(xì)胞共培養(yǎng)體系及缺糖缺氧(OGD)細(xì)胞模型,據(jù)處理不同將細(xì)胞分為OGD組、乙酰膽堿(ACh 100μmol/L)+OGD組和ACh+加蘭他敏(Gal 10μmol/L)+OGD組。采用ELISA法檢測各組上清液腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)和IL-10的表達(dá);MTT法檢測腎小管細(xì)胞活力;RT-qPCR及Western blotting檢測膽堿酯酶(AChE)m RNA和蛋白表達(dá);比色法檢測AChE活性。結(jié)果 ACh+OGD組TNF-α和IL-1β水平均低于OGD組,加入Gal之后,TNF-α和IL-1β水平進(jìn)一步下降;ACh+OGD組腎小管活力高于OGD組,加入Gal之后,腎小管活力進(jìn)一步增強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。3組之間巨噬細(xì)胞ACh E m RNA和蛋白表達(dá)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與OGD組比較,ACh+OGD組與ACh+Gal+OGD組腎小管細(xì)胞活力減弱,但ACh+OGD組與ACh+Gal+OGD組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.368)。結(jié)論 ACh和Gal可抑制腎臟巨噬細(xì)胞分泌炎性介質(zhì)并抑制膽堿酯酶活性,減輕急性缺氧性腎小管細(xì)胞損傷。調(diào)控巨噬細(xì)胞的膽堿能通路可能是未來急性缺氧性腎損傷的治療方向。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of cholinergic pathway on acute hypoglycemic renal tubular cell injury. Methods the rat renal macrophages were isolated and cultured. The co-culture system of macrophages and renal tubular epithelial cells and the model of hypoglycemic (OGD) cells were established. The cells were divided into OGD group according to different treatments. Acetylcholine (ACh 100 渭 mol/L) OGD group and ACh galanthamine (Gal 10 渭 mol/L) OGD group. The expression of tumor necrosis factor 偽 (TNF- 偽), interleukin-1 尾 (IL-1 尾) and IL-10 in supernatant of each group was detected by ELISA assay, and the viability of renal tubular cells was detected by MTT assay. The expression of cholinesterase (AChE) m RNA and protein was detected by RT-qPCR and Western blotting, and the activity of AChE was detected by colorimetry. Results the levels of TNF- 偽 and IL-1 尾 in ACh OGD group were lower than those in OGD group. After adding Gal, TNF- 偽 and IL-1 尾 levels decreased further. The tubular activity in ACh OGD group was higher than that in OGD group, and the tubule activity was further enhanced after adding Gal. The difference was statistically significant (P0.05 or P0.01). There was no significant difference in the expression of ACh E m RNA and protein between the 3 groups (P0.05). Compared with OGD group, renal tubular cell activity in, ACh OGD group and ACh Gal OGD group was decreased, but there was no significant difference between ACh OGD group and ACh Gal OGD group (P < 0. 368). Conclusion ACh and Gal can inhibit the secretion of inflammatory mediators and the activity of cholinesterase in renal macrophages and alleviate acute hypoxic renal tubular cell injury. Regulating the cholinergic pathway of macrophages may be the therapeutic direction of acute hypoxic renal injury in the future.
【作者單位】： 深圳市第二人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科;深圳市第二人民醫(yī)院介入治療科;深圳市第二人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81101410) 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)研究基金(A2016353) 廣東省深圳市科技創(chuàng)新委項(xiàng)目(JCYJ20130401112313541;JCY20150330102401099;JCYJ20160425103130218) 深圳市第二人民醫(yī)院臨床-基礎(chǔ)一對一橋梁項(xiàng)目基金(2015-16)~~
【分類號】：R692

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本文編號：2355497