【摘要】：治療慢性腎功能衰竭終末期的有效方法是同種異體腎移植術。隨著免疫抑制藥物的不斷更新和發(fā)展,腎移植術后出現(xiàn)急性排斥反應的概率逐漸減少,移植腎的存活率得到了大大提高。但一直以來,由于腎移植后沒有準確的監(jiān)測免疫功能的指標；如何客觀并準確地評估移植后患者的免疫狀態(tài),在免疫抑制不足和免疫抑制過度之間取得平衡,從而指導免疫抑制藥物的個體化合理應用已經(jīng)成為移植醫(yī)生需要研究及迫切解決的一個重要問題。臨床目前常通過有創(chuàng)手段和非侵入手段監(jiān)測腎移植術后免疫狀態(tài),包括受體的全身情況、血肌酐、彩色多普勒超聲、免疫抑制劑的血藥濃度監(jiān)測、移植物穿刺組織病理學檢查等。但是血肌酐敏感度和特異性較差,對臨床上的預防及治療等意義不大;彩色多普勒超聲受到超聲診斷醫(yī)生主觀影響較大；目前臨床上評估免疫狀態(tài)的常用手段是監(jiān)測免疫抑制劑的血藥濃度,但是由于不同受者的體內(nèi)藥物代謝存在著個體差異,且機體內(nèi)多種因素都可以影響免疫抑制藥物的血藥濃度,許多術后患者仍不可避免排斥反應的發(fā)生；而移植物穿刺組織病理學檢查是一種有創(chuàng)性檢查,對患者具有一定的風險性,不易反復監(jiān)測。 鑒于上述情況,本次研究擬通過檢測移植腎受者外周血T淋巴細胞亞群的變化來評估受者的免疫狀態(tài)。比較健康者、尿毒癥期患者和術后腎功能穩(wěn)定受者外周血T細胞的差異,了解移植術前與術后免疫狀態(tài)之間的變化,同時比較腎功能穩(wěn)定受者、急性排斥和感染時外周血T細胞的差異,意在證明T細胞在腎移植術后監(jiān)測其免疫狀態(tài)變化的意義；最后通過前瞻性分析和比較從圍手術期到術后6月采用T細胞監(jiān)測組患者與未采用T細胞監(jiān)測的患者之間急性排斥、感染的發(fā)生率,以驗證動態(tài)監(jiān)測T細胞有助于了解移植術后的免疫狀態(tài),為指導臨床個體化用藥提供依據(jù)。 第一章比較T細胞在健康者、尿毒癥期患者和術后腎功能穩(wěn)定者之間的不同 目的 本部分通過流式細胞術檢測尿毒癥期患者和腎功能穩(wěn)定受者外周血T細胞的比例,并結合受者的狀況,與健康人群進行比較,觀察腎移植術前與術后T細胞的變化規(guī)律。 方法 以慢性腎功能不全尿毒癥期患者、術后腎功能穩(wěn)定患者各25例作為研究對象,并隨機選取健康正常者25例為對照組,通過流式細胞儀技術檢測患者的T淋巴細胞亞群,比較三組中T淋巴細胞亞群的不同。采用SPSS13.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行分析。研究中所得數(shù)據(jù)均經(jīng)過正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗,以均數(shù)±標準差(mean±SD)表示。計量資料兩組間均數(shù)比較采用t檢驗或秩和檢驗；多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析,P0.05為差異有顯著性意義。 結果 ①CD3+T淋巴細胞的百分比在健康組、尿毒癥組與術后穩(wěn)定組三組間的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。CD3+CD4+T淋巴細胞的百分比在健康組和尿毒癥期組間無明顯差異(P0.05),而二組分別與術后腎功能穩(wěn)定組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。CD3+CD8+T淋巴細胞的百分比在健康組、尿毒癥組與術后穩(wěn)定組三組間的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。同樣, CD3+CD4+/CD3+CD8+在健康組、尿毒癥期組和術后穩(wěn)定組三組之間無明顯差異(P0.05)。 ②在健康組中CD3+CD4+T淋巴細胞計數(shù)與尿毒癥組的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),而分別與術后穩(wěn)定組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。CD3+CD8+T淋巴細胞計數(shù)在健康組、尿毒癥組與術后穩(wěn)定組三組間的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論 首先,免疫抑制藥物對移植受者外周血CD3+CD4+T細胞有影響；其次,血清肌酐水平、腹膜透析、血液透析及輸血等內(nèi)科相關治療對T淋巴細胞的變化影響較小。 第二章比較T細胞在腎移植術后不同免疫狀態(tài)之間的變化 目的 本部分通過流式細胞術檢測腎功能穩(wěn)定受者、急性排斥反應受者及感染時患者外周血T細胞的比例,并結合受者的具體狀況,比較三組患者外周血T細胞亞群的差異,觀察腎移植術后不同免疫狀態(tài)下T細胞亞群的變化規(guī)律。 方法 納入69例因慢性腎功能衰竭(尿毒癥期)接受同種異體尸體供腎和親屬活體供腎腎移植手術的術后患者,所選患者均術后兩周內(nèi)血肌酐下降至正常水平,術中未發(fā)生超急性排斥,檢測期間患者未出現(xiàn)其他影響患者免疫狀態(tài)的疾病(如發(fā)生腫瘤或腎小球腎炎復發(fā))。根據(jù)患者入院時不同的病情分為3組,即術后腎功能穩(wěn)定組(n=25),急性排斥組(n=23)和肺部感染組(n=21),供受者ABO血型相同,淋巴細胞毒性試驗10%,受者群體反應性抗體15%,人類白細胞抗原錯配數(shù)均少于4個。通過流式細胞儀技術檢測三組患者的T淋巴細胞亞群,比較三組中T淋巴細胞亞群的差異。采用SPSS13.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行分析。研究中所得數(shù)據(jù)均經(jīng)過正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗,以均數(shù)±標準差(mean±SD)表示。計量資料兩組間均數(shù)比較采用t檢驗或秩和檢驗；多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析,P0.05為差異有顯著性意義。 結果 ①納入試驗患者一般性資料分析：3組患者在性別、年齡及主要免疫抑制劑構成上均無顯著性意義(P0.05),具有可比性。 ②CD3+T淋巴細胞的百分比在穩(wěn)定組、急性排斥組與感染組三組間的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。CD3+CD4+T淋巴細胞的百分比在術后急性排斥反應組中最高,與移植術后腎功能穩(wěn)定組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)；而在感染組的CD3+CD4+T淋巴細胞的百分比為三組中最低,與移植術后腎功能穩(wěn)定組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05). CD3+CD8+T淋巴細胞的百分比在急性排斥反應組中為最低,與移植術后腎功能穩(wěn)定組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；而在感染組中,CD3+CD8+T淋巴細胞的百分比為三組中最高,與移植術后腎功能穩(wěn)定組比較,同樣差異也有統(tǒng)計學意義(P0.05)。CD3+CD4+/CD3+CD8+的比值在急性排斥反應組中最高,感染組中最低,兩組與移植術后腎功能穩(wěn)定組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05, P0.05)。CD3+CD4+T淋巴細胞計數(shù)在術后急性排斥反應組中最高,與移植后腎功能穩(wěn)定組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；而在感染組的CD3+CD4+T淋巴細胞計數(shù)為三組中最低,與移植術后腎功能穩(wěn)定組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。CD3+CD8+T淋巴細胞計數(shù)在急性排斥反應組分別于移植后腎功能穩(wěn)定組、感染組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05,P0.05)。 ③CD3=T淋巴細胞的百分比在感染治療前后的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。肺部感染在調(diào)整免疫抑制方案、抗感染等對癥及支持治療后癥狀改善時,CD4+的百分比由19.87±7.95升高至38.42±7.69,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05); CD8+的百分比由46.76±8.58降低至35.28±7.15,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；CD3+CD4+/CD3+CD8+的比值由0.36±0.74升高至1.25±0.68,差異也有統(tǒng)計學意義(P0.05)。CD3+CD4+T淋巴細胞計數(shù)由208±151(個/ul)升高至462±179(個/ul),差異有統(tǒng)計學意義9P0.05)；CD3+CD8+T淋巴細胞計數(shù)由316±182(個/ul)升高至393±187(個/ul),差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 ④CD3+T淋巴細胞的百分比在抗排斥治療前后之間比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。而急性排斥在激素沖擊等一系列治療后癥狀改善時,CD3+CD4+的百分比由49.14±7.81降低至38.26±9.25,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；CD3+CD8+的百分比由21.37±8.26升高至39.83±7.85,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；CD3+CD4+/CD3+CD8+的比值由2.53±0.68降低至1.45±0.84,差異也有統(tǒng)計學意義(P0.05).CD3+CD4+T淋巴細胞計數(shù)由697±189(個/ul)降低至546±205(個/ul),差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；CD3+CD8+T淋巴細胞計數(shù)由363.7±199.6(個/ul)升高至415.4±216.4(個/ul),差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論 ①CD3+CD4+T淋巴細胞與移植物排斥反應和感染的發(fā)生密切相關。 ②動態(tài)觀察T淋巴細胞亞群的變化,特別是CD3+CD4+T淋巴細胞計數(shù)的變化規(guī)律有助于指導臨床上的免疫抑制劑用藥。 第三章采用T細胞監(jiān)測的腎移植受者與未采用T細胞監(jiān)測的受者之間術后并發(fā)癥的比較 目的 本部分通過監(jiān)測T細胞亞群絕對計數(shù)的變化,評估受者術后免疫狀態(tài)情況,并依此適當調(diào)整免疫抑制劑用藥及相關對癥治療,驗證T細胞亞群有助于指導腎移植術后的用藥方案。 方法 納入因慢性腎功能衰竭終末期行同種異體腎移植術52例患者,根據(jù)患者圍手術期至術后6月內(nèi)有無采用T淋巴細胞監(jiān)測免疫狀態(tài)情況,可分為T細胞監(jiān)測組(術前1d及術后3月內(nèi)每周測定T淋巴細胞亞群,并根據(jù)亞群變化調(diào)整免疫劑用藥方案)；未采用T細胞監(jiān)測的為對照組。詳細記錄入選受者術后3月內(nèi)的信息,包括：性別、年齡、體重、供體類別、配型、免疫誘導治療、基礎免疫抑制方案、血清肌酐(Scr)、移植腎功能延遲恢復(DGF)、急性排斥反應(AR)、感染、人/腎存活等臨床資料；在術前、術后3月內(nèi)每周行CD3+CD4+T細胞計數(shù)檢測,根據(jù)CD3+CD4+T細胞計數(shù)水平調(diào)整免疫誘導和基礎免疫抑制劑方案,根據(jù)既往的參考文獻和我們的經(jīng)驗將CD3+CD4+T細胞計數(shù)目標值控在300-500個/μL或術前水平的60%-80%。觀察每組患者急性排斥反應和感染的概率,對兩組患者急性排斥反應和感染的發(fā)生率進行比較。統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學分析,計量資料采用均數(shù)士標準差表示,率間比較采用X2檢驗,均數(shù)比較采用獨立樣本t檢驗,等級資料比較采用秩和檢驗,小樣本采用Fisher確切概率法,統(tǒng)計學的顯著性水準定為0.05。 結果 ①納入試驗患者在性別、年齡、體重、HLA配型、供體類型、基礎免疫抑制方案、抗體誘導治療和DGF發(fā)生率方面的差異無統(tǒng)計學意義。 ②監(jiān)測組和對照組術后1月平均肌酐水平分別為140.8±22.0μmol/L和153.5.4±25.5μmol/L,術后6月為145.6±37.6μmol/L和149.2±59.1μmol/L,術后1月和6月兩個時間點兩組之間無統(tǒng)計學差異。 ③監(jiān)測組急性排斥反應事件發(fā)生率低于對照組,而感染事件發(fā)生率,兩組間無統(tǒng)計學差異。 結論 動態(tài)監(jiān)測T細胞的絕對計數(shù)有助于了解移植術后的免疫狀態(tài),對臨床用藥有指導意義。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R699.2

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 宋芳,王建軍,李俊平;T細胞在胸腺內(nèi)的分化發(fā)育[J];包頭醫(yī)學院學報;2001年01期

2 汪道鑫;虞春華;葉穎俊;汪煒;;T淋巴細胞的研究進展[J];第四軍醫(yī)大學學報;2009年24期

3 吳琳;王瑾;王慶華;唐敏英;尚樂樂;譚建明;;ImmuKnow~(TM)-Cylex檢測技術在腎移植術后重癥肺炎中的應用研究[J];福建醫(yī)科大學學報;2011年04期

4 陳煦艷,季偉;CTLA-4及其衍生物和支氣管哮喘[J];國外醫(yī)學.呼吸系統(tǒng)分冊;2005年09期

5 朱珉,陳棟;T細胞亞群和免疫耐受[J];國外醫(yī)學(免疫學分冊);2004年01期

6 楊雪;焦艷梅;吳昊;;CD4~+T淋巴細胞亞群研究進展[J];北京醫(yī)學;2011年12期

7 熊建華,習小慶,吳勇,孫錫林,葛根;腎移植受者外周血T淋巴細胞亞群變化與機體免疫狀態(tài)之間的關系[J];江西醫(yī)學院學報;2001年03期

8 黃鑒;馬超龍;;T細胞亞群的檢測在腎移植中的應用[J];昆明醫(yī)學院學報;2008年S1期

9 錢葉勇，李炎唐，，敖建華，李巖;流式細胞儀監(jiān)測腎移植后淋巴細胞亞群的臨床意義[J];臨床泌尿外科雜志;1996年04期

10 羅文峰;時軍;黃躍勝;孟棟良;李新長;徐志丹;吳勤榮;龍成美;丁利民;胡國柱;;調(diào)節(jié)性T細胞與腎移植急性排斥反應的關系[J];江西醫(yī)藥;2014年01期

本文編號：2301581