發(fā)布時間：2018-06-27 08:21

  本文選題：多囊腎病 + 二甲雙胍��； 參考：《中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文

【摘要】：目的:常染色體顯性多囊腎病(ADPKD)是最常見遺傳性腎病,目前尚無有效的預(yù)防及治療藥物。已發(fā)現(xiàn)多囊腎細胞與腫瘤細胞類似,主要依賴糖酵解產(chǎn)生ATP。2-Deoxy-D-glucose(2DG)是糖酵解阻斷劑,二甲雙胍是AMPK激活劑,目前兩者已用于腫瘤治療。小型豬與嚙齒類動物相比,在代謝、生理等方面與人更加相似,是研究ADPKD機制的一種理想大動物模型。本研究首次從能量代謝的角度入手,聯(lián)合使用抗代謝藥物二甲雙胍和2-脫氧葡萄糖長期治療緩慢進展性ADPKD小型豬模型,觀察了兩種藥物單獨或者聯(lián)合對ADPKD小型豬的治療效果以及對腎臟組織能量代謝、細胞增殖的影響。方法:(1)隨機挑選5-6月齡的通過鋅指核酶(ZFN)技術(shù)敲除PKD1基因的中國實驗用小型豬作為多囊腎模型組(PKD),選取相同月齡相同品系的野生型小型豬作為正常對照組(CON)。喂養(yǎng)20個月,按規(guī)定日期麻醉后取血、尿標(biāo)本,然后處死動物,制備腎臟組織標(biāo)本。觀察血生化、尿蛋白、腎臟病理改變、細胞周期相關(guān)蛋白、增殖、代謝的變化情況。(2)將PKD1基因敲除的小型豬,隨機分為對照組,二甲雙胍干預(yù)組,2DG干預(yù)組,二甲雙胍和2DG聯(lián)合干預(yù)組。第一批小型豬飼養(yǎng)10個月后,按規(guī)定日期麻醉后取血、尿標(biāo)本,然后處死動物,制備腎臟組織標(biāo)本。為了觀察長期療效,第二批小型豬飼養(yǎng)至20個月時,麻醉后通過局部手術(shù)的方式取部分腎組織,小型豬蘇醒后繼續(xù)飼養(yǎng)。觀察指標(biāo)同上。結(jié)果:(1)、結(jié)果發(fā)現(xiàn)在ADPKD小型豬腎臟中糖酵解水平明顯升高。mTOR信號通路和ERK信號通路明顯激活。(2)、治療10個月后處死部分動物,腎臟外觀和剖面圖以及CT所測囊腫指數(shù)結(jié)果均顯示:各藥物干預(yù)組與對照組相比有明顯差異;其中聯(lián)合用藥組差異最顯著;但各組血、尿生化結(jié)果水平無明顯改變。治療20個月后,生化結(jié)果顯示,各用藥組與對照組相比血清肌酐及尿蛋白/尿肌酐比值明顯降低。為了長期觀察治療效果,采用手術(shù)的方式取腎臟組織,結(jié)果顯示:與對照組相比,藥物干預(yù)組小型豬腎臟組織中增殖信號通路mTOR以及ERK的關(guān)鍵分子表達水平有不同程度的下降,其中以聯(lián)合用藥組下降效果最明顯。結(jié)論:本研究顯示ADPKD小型豬腎臟中糖酵解水平明顯和增殖明顯增高。用二甲雙胍和2DG藥物聯(lián)合干預(yù)可明顯改善ADPKD小型豬腎功能以及延緩腎臟囊泡的進展。這為2DG和二甲雙胍治療ADPKD提供了強有力的實驗依據(jù)。
[Abstract]:Objective: autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) is the most common hereditary nephropathy. It has been found that polycystic kidney cells are similar to tumor cells and mainly rely on glycolysis to produce ATP.2-Deoxy-D-glucose (2DG) as glycolytic blockers and metformin as AMPK activators. Compared with rodents, miniature pigs are more similar to humans in metabolism, physiology and so on. It is an ideal animal model to study ADPKD mechanism. In this study, energy metabolism was used for the first time to treat slowly progressive ADPKD miniature pig model with the combination of metformin and 2-deoxyglucose for a long time. The effects of two drugs alone or in combination on ADPKD mini-pigs and on renal energy metabolism and cell proliferation were observed. Methods: (1) Chinese miniature pigs (PKD) with zinc finger ribozyme (ZFN) knockout of PKD1 gene were randomly selected as polycystic kidney model group (PKD) and wild miniature pigs of the same age and the same age as normal control group (Con). After 20 months of feeding, blood and urine samples were collected after anesthesia, then animals were killed and kidney tissue specimens were prepared. The changes of blood biochemistry, urine protein, renal pathological changes, cell cycle related protein, proliferation and metabolism were observed. (2) miniature pigs with PKD1 gene knockout were randomly divided into control group and metformin intervention group. Metformin and 2DG combined intervention group. The first miniature pigs were fed for 10 months. Blood and urine samples were collected after anesthesia according to the prescribed date. Then animals were killed and kidney tissue specimens were prepared. In order to observe the long-term curative effect, the second batch of miniature pigs were fed for 20 months. After anesthesia, partial renal tissues were taken out by local operation, and the small pigs were reared after waking up. Observation indicators ibid. Results: (1) the level of glycolysis in the kidney of ADPKD miniature pigs was significantly increased. The signal pathway of mTOR and ERK were activated obviously. (2) after 10 months of treatment, some animals were killed. The renal appearance and profile as well as the cysts index measured by CT showed that there were significant differences between each drug intervention group and the control group, and the most significant difference was found in the combined treatment group, but there was no significant change in the blood and urine biochemical results in each group. After 20 months of treatment, the biochemical results showed that the serum creatinine and urinary creatinine / urinary creatinine ratio were significantly lower in each treatment group than those in the control group. In order to observe the therapeutic effect for a long time, the renal tissue was removed by operation. The results showed that the expression levels of mTOR and ERK key molecules in the renal tissue of the drug intervention group were lower than those in the control group. Among them, the decrease effect of combined drug group was the most obvious. Conclusion: this study showed that the glycolysis level and proliferation of ADPKD miniature pig kidney were significantly increased. Combined intervention of metformin and 2DG could significantly improve renal function and delay the progression of renal vesicles in ADPKD miniature pigs. This provides a powerful experimental basis for the treatment of ADPKD with 2 DG and metformin.
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R692

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張永江,陳洪巖,夏長友;簡易SPF小型豬屏障設(shè)施[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2003年06期

2 劉怡;房殿吉;王松靈;;小型豬在口腔醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年07期

3 陳華;;小型豬在醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的應(yīng)用進展[J];中國實驗動物學(xué)報;2008年05期

4 王桂花;尹曉敏;孫霞;趙德明;;國內(nèi)外小型豬資源概況[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2009年02期

5 ;首屆國際小型豬學(xué)術(shù)論壇在廣州舉行[J];中國實驗動物學(xué)報;2010年01期

6 ;2010廣州-東莞首屆國際小型豬學(xué)術(shù)論壇順利舉行[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2010年02期

7 岳敏;范沛;吳麗紅;顧為望;;廣州地區(qū)三種小型豬血液生理生化指標(biāo)的比較[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2011年08期

8 Berton F Hill;封培勤;;小型豬[J];上海實驗動物科學(xué);1988年03期

9 王愛德;覃樹華;郭亞芬;藍干球;;廣西小型豬的選育(初報)[J];上海實驗動物科學(xué);1989年04期

10 秦樹存;孫仁俊;;小型豬實驗性動脈粥樣硬化研究的回顧與展望[J];上海實驗動物科學(xué);1990年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 范沛;岳敏;吳麗紅;顧為望;;廣州地區(qū)三種小型豬血液生理生化指標(biāo)的比較[A];第九屆中國實驗動物科學(xué)年會（2010新疆）論文集[C];2010年

2 馬玉媛;呂茂民;吳建敏;丁芳;徐述;陽玉彪;郭艷茹;田克恭;章金剛;;我國小型豬內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒的相關(guān)研究[A];中國實驗動物學(xué)會第七屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2006年

3 韓雅玲;趙慧強;王守力;王斌;荊全民;;中國小型豬慢性完全閉塞病變模型的建立[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會第十次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2008年

4 李洪濤;劉蓉;吳清洪;張新鳳;趙瑾;錢元新;廖東江;顧為望;;野百合堿誘導(dǎo)小型豬慢性肺動脈高壓動物模型的建立[A];第十屆中國實驗動物科學(xué)年會論文集[C];2012年

5 張冬梅;朱春花;邱波;閆俊;;小型豬取血方法[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學(xué)年會暨藥物非臨床安全性評價研究論壇論文摘要[C];2013年

6 原野;馬華智;吳純啟;;小型豬作為生殖毒性實驗?zāi)Ｐ偷奶攸c與優(yōu)勢分析[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學(xué)年會暨藥物非臨床安全性評價研究論壇論文摘要[C];2013年

7 張冬梅;朱春花;邱波;閆俊;;小型豬取血方法[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

8 原野;馬華智;吳純啟;;小型豬作為生殖毒性實驗?zāi)Ｐ偷奶攸c與優(yōu)勢分析[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

9 詹純列;徐本法;李建軍;李權(quán)超;;SPF小型豬階段生長指標(biāo)的測定[A];中國實驗動物學(xué)會第五屆學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2000年

10 謝忠忱;黃廣勇;陳華;黃麗潔;茍鵬;賈琳;劉亞千;郭雄明;辛寧波;;小型豬高脂血癥對內(nèi)皮功能的影響[A];中國實驗動物學(xué)會第七屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2006年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 劉海峰;我國成功克隆出世界著名醫(yī)用小型豬[N];新華每日電訊;2007年

2 北京琉璃科興試驗動物養(yǎng)殖中心 孫國濤;小型豬的飼養(yǎng)和市場前景[N];中國特產(chǎn)報;2008年

3 記者 王丹 通訊員 朱丹萍;我學(xué)者建立免疫缺陷小型豬模型[N];健康報;2014年

4 駐站記者 李云飛 通訊員 呂小飛;小型豬禽飼養(yǎng)帶來大效益[N];赤峰日報;2007年

5 記者 白毅;基因敲除免疫缺陷小型豬模型建立[N];中國醫(yī)藥報;2014年

6 本報記者 張奇鋒 通訊員 張淼;豬器官或?qū)⑻娲梭w損壞器官[N];廣東科技報;2011年

7 記者 李立平;首批體細胞克隆醫(yī)用小型豬培育成功[N];大眾科技報;2007年

8 記者 李志峰　實習(xí)生 姜陽;小香豬每月生活費上千元[N];重慶日報;2010年

9 瞿劍;我國科學(xué)家首次育成小型豬近交系[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2013年

10 記者 胡其峰;“小型豬近交系”首次成功育成[N];光明日報;2013年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張華;腹腔鏡技術(shù)建立小型豬肝損傷模型及肝臟環(huán)境變化的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 李偉;高滲鹽溶液干預(yù)對心肺復(fù)蘇后小型豬的保護作用及機制的實驗研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

3 陶博;小型豬心肌梗死后血管新生的在體多模態(tài)融合成像及干預(yù)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

4 吳健敏;中國特有小型豬內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒的檢測與全基因克隆[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2004年

5 崔立;實驗用小型豬種群凈化技術(shù)及其不同模型的建立和應(yīng)用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

6 盧德章;小型豬特異性麻醉頡頏劑的研制及其催醒機理的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 陳云;小型豬實驗動物化和糖尿病模型及中藥“脾胃康”作用研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2005年

8 彭享勝;心肌梗死小型豬圍術(shù)期模型的構(gòu)建及內(nèi)源性血紅素氧合酶-1心臟保護作用的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2005年

9 楊家大;應(yīng)用實時熒光定量方法研究實驗用小型豬細胞色素P450的表達[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

10 崔敬;小型豬腎損傷疾病模型的構(gòu)建及干預(yù)研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 連曉英;聯(lián)合使用二甲雙胍與2-脫氧葡萄糖抑制小型豬多囊腎病進展的研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2017年

2 王月;腹腔鏡技術(shù)安裝小型豬多血管插管的實驗研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 劉濤;肝臟缺血與損傷對小型豬生理功能和組織再生的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 王志博;小型豬腹腔鏡與開放性腎部分切除術(shù)的對比研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

5 鄭英宇;健脾祛痰化瘀法干預(yù)冠狀動脈粥樣硬化小型豬腦Aβ的實驗研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2016年

6 郭榮鑫;糖原磷酸化酶同工酶BB在小型豬心肌缺血模型變化趨勢分析[D];河南大學(xué);2016年

7 高銘杰;多模態(tài)小型豬心臟圖像的分割與配準(zhǔn)[D];西安電子科技大學(xué);2015年

8 易青;3-MCPD棕櫚酸雙酯在小型豬體內(nèi)的藥代動力學(xué)及組織分布規(guī)律研究[D];武漢輕工大學(xué);2016年

9 鄭遠彪;實驗用小型豬非體外循環(huán)冠狀動脈旁路移植模型的建立[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2017年

10 張孌松;小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血流動力學(xué)的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

，

本文編號：2073289