本文選題：前列腺癌 + 冷凍消融��； 參考：《天津醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的前列腺癌目前在國(guó)內(nèi)外發(fā)病率都不斷升高,而且中晚期患者居多,失去外科手術(shù)治療機(jī)會(huì),冷凍消融是其重要治療手段之一。冷凍消融治療前列腺癌后腫瘤細(xì)胞在釋放腫瘤抗原刺激機(jī)體免疫反應(yīng)的同時(shí),也會(huì)釋放TGF-β1,TGF-β信號(hào)不但能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的遷移,還能招募Treg等抑制性免疫細(xì)胞,導(dǎo)致免疫耐受的形成,削弱機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)。在冷凍消融治療前列腺癌的同時(shí),如果采用TGF-β中和性抗體阻斷其信號(hào)通路,機(jī)體TGF-β1會(huì)如何變化?Treg細(xì)胞會(huì)如何變化?兩者之間是否具有相關(guān)性?針對(duì)這些問(wèn)題,本研究構(gòu)建小鼠前列腺癌模型,冷凍消融聯(lián)合TGF-β阻斷治療后檢測(cè)TGF-β1水平和Treg細(xì)胞,分析兩者的相關(guān)性,探討TGF-β1對(duì)Treg細(xì)胞的影響及相關(guān)機(jī)制。對(duì)象與方法1.分別采用劃痕試驗(yàn)和Transwell試驗(yàn)檢測(cè)經(jīng)TGF-β中和性抗體處理的前列腺癌RM-1細(xì)胞遷移和侵襲能力的變化。2.構(gòu)建前列腺癌小鼠模型,把小鼠隨機(jī)分為四組,分別設(shè)A組為對(duì)照組、B組為冷凍組、C組為抗體組、D組為聯(lián)合組。3.分別于治療前、治療后7天和14天采集標(biāo)本,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)外周血細(xì)胞因子TGF-β1和IL-2水平;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Treg、CD4+T和CD8+T細(xì)胞的比例;采用非放射性細(xì)胞毒性試驗(yàn)(LDH法)檢測(cè)脾臟中CTL細(xì)胞對(duì)前列腺癌RM-1細(xì)胞的殺傷活性;采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)小鼠腫瘤組織中Treg、CD4+T、CD8+T細(xì)胞的浸潤(rùn)情況及肺轉(zhuǎn)移情況;測(cè)量各組小鼠腫瘤直徑大小變化。4.分析Treg細(xì)胞與TGF-β1水平的相關(guān)性,探討TGF-β1對(duì)Treg細(xì)胞的影響及相關(guān)機(jī)制。結(jié)果1.劃痕試驗(yàn)和Transwell試驗(yàn)結(jié)果表明TGF-β中和性抗體降低小鼠前列腺癌RM-1細(xì)胞的遷移和侵襲能力,說(shuō)明TGF-β1參與前列腺癌腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲過(guò)程。2.A組小鼠外周血TGF-β1水平隨著腫瘤生長(zhǎng)呈升高趨勢(shì),治療后7天、14天與治療前比較顯著升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與A組比較,B組、C組和D組在治療后7天、14天TGF-β1水平顯著降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。A組小鼠外周血IL-2水平隨著腫瘤生長(zhǎng)呈降低趨勢(shì),治療后14天與治療前比較顯著降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與A組、B組、C組比較,D組在治療后7天、14天IL-2水平顯著升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3.A組外周血Treg細(xì)胞比例隨著腫瘤生長(zhǎng)呈升高趨勢(shì),治療后14天與治療前比較顯著升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與A組比較,B組和D組在治療后14天Treg細(xì)胞比例顯著降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),且外周血Treg細(xì)胞與TGF-β1水平呈正相關(guān)(P0.001,R=0.931)。A組脾臟Treg細(xì)胞比例隨著腫瘤生長(zhǎng)呈升高趨勢(shì),治療后14天與治療前比較顯著升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與A組比較,B組和D組在治療后7天和14天Treg細(xì)胞比例顯著降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),且脾臟Treg細(xì)胞與TGF-β1水平呈正相關(guān)(P0.001,R=0.889)。A組腫瘤局部浸潤(rùn)Treg細(xì)胞隨著腫瘤生長(zhǎng)呈增加趨勢(shì),治療后14天與治療前比較顯著增加,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與A對(duì)相比,B組和D組在治療后14天Treg細(xì)胞比例顯著減少,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),且腫瘤局部浸潤(rùn)Treg細(xì)胞與TGF-β1水平呈正相關(guān)(P0.001,R=0.912)。4.A組脾臟CD4+T和CD8+T細(xì)胞比例隨著腫瘤生長(zhǎng)呈下降趨勢(shì),治療后14天與治療前比較顯著降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與A組、B組及C組比較,D組在治療后7天、14天CD4+T和CD8+T細(xì)胞比例顯著增加,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),且脾臟CD4+T和CD8+T細(xì)胞與TGF-β1水平呈負(fù)相關(guān)(P0.001,R=-0.813;P0.001,R=-0.839)。A組腫瘤局部浸潤(rùn)C(jī)D4+T和CD8+T細(xì)胞隨腫瘤生長(zhǎng)呈減少趨勢(shì),治療后14天與治療前比較顯著減少,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);與A組、B組、C組比較,D組在治療后14天CD4+T和CD8+T細(xì)胞比例顯著增加,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),且腫瘤局部浸潤(rùn)C(jī)D4+T和CD8+T細(xì)胞與TGF-β1水平呈負(fù)相關(guān)(P0.001,R=-0.852;P0.001,R=-0.914)5.A組脾臟CTL細(xì)胞對(duì)RM-1細(xì)胞的殺傷活性隨著腫瘤生長(zhǎng)而呈下降趨勢(shì),治療后14天與治療前比較顯著降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.001);與A組、B組及C組比較,D組在治療后7天、14天CTL細(xì)胞殺傷活性顯著增加(P0.001),且脾臟CTL細(xì)胞的殺傷活性與TGF-β1水平呈負(fù)相關(guān)(效靶比為10:1時(shí)P0.001,R=-0.866;效靶比為20:1時(shí)P0.001,R=-0.875)。6.A組小鼠肺轉(zhuǎn)移率隨疾病進(jìn)展呈逐漸升高趨勢(shì),與A組、B組和C組比較,D組在治療后14天顯著降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);A組小鼠腫瘤直徑隨著疾病進(jìn)展逐漸增大,與A組比較,B組、C組和D組治療后7天、14天顯著減小,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論TGF-β1參與小鼠前列腺癌RM-1細(xì)胞的遷移和侵襲過(guò)程,TGF-β中和性抗體降低RM-1細(xì)胞的遷移和侵襲能力;隨著疾病的進(jìn)展,前列腺癌小鼠外周血TGF-β1水平升高,IL-2水平降低,Treg細(xì)胞增加,CD4+T和CD8+T細(xì)胞減少,脾臟CTL細(xì)胞殺傷活性降低,其中,Treg細(xì)胞與TGF-β1呈顯著正相關(guān),CD4+T和CD8+T細(xì)胞與TGF-β1呈顯著負(fù)相關(guān),脾臟CTL細(xì)胞殺傷活性與TGF-β1呈顯著負(fù)相關(guān);冷凍消融聯(lián)合TGF-β阻斷治療后,小鼠外周血TGF-β1水平降低,IL-2水平升高,Treg細(xì)胞減少,CD4+T和CD8+T細(xì)胞增加,脾臟CTL細(xì)胞殺傷活性增加,肺轉(zhuǎn)移減少,腫瘤生長(zhǎng)減緩。
[Abstract]:Objective To study the effects of TGF - 尾1 on the proliferation and invasion of prostate cancer RM - 1 cells . Compared with group A , the proportion of Treg cells increased significantly in group B and D after treatment ( P0.05 ) . Compared with group A , the proportion of Treg cells increased significantly in group B and D after treatment ( P0.05 ) , and the peripheral blood Treg cells were positively correlated with TGF - 尾1 levels ( P0.001 , R = 0.931 ) . Compared with group A , the proportion of Treg cells increased significantly in group B and D after treatment for 7 days and 14 days after treatment ( P0.05 ) . Compared with group A , group B and group C , the proportion of CD4 + T and CD8 + T cells increased significantly in group B and D after treatment ( P0.05 ) . Compared with group A , group B and group C , the ratio of CD4 + T and CD8 + T cells increased significantly in group D after treatment ( P0.05 ) . Compared with group A , group B and group C , there was a negative correlation between the activity of CD4 + T and CD8 + T cells ( P < 0.01 , R = - 0.866 , P < 0.01 , R = - 0.9814 ) . The cytotoxic activity of CD4 + T cells and CD8 + T cells was negatively correlated with TGF - 尾1 . The anti - tumor activity of splenic CTL cells was negatively correlated with TGF - 尾1 . After cryoablation combined with TGF - 尾 , the levels of TGF - 尾1 decreased , IL - 2 levels increased , Treg cells decreased , CD4 + T and CD8 + T cells increased , spleen CTL cell killing activity increased , lung metastasis decreased , and tumor growth slowed down .
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R737.25

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;TGF β_1 expression and angiogenesis in colorectal cancer tissue[J];World Journal of Gastroenterology;2002年03期

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本文編號(hào)：2065323