CYLD抑制自噬提高膀胱癌細(xì)胞吉西他濱化療敏感性
本文選題:膀胱腫瘤 切入點(diǎn):吉西他濱 出處:《山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年08期
【摘要】:目的探討腫瘤抑制因子CYLD提高膀胱癌細(xì)胞吉西他濱化療敏感性。方法構(gòu)建CYLD過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的人膀胱癌細(xì)胞株T24、253J,將細(xì)胞分為僅加入脂質(zhì)體的對照組,轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒的空載組和CYLD組。Transw ell實(shí)驗(yàn)檢測CYLD對膀胱癌細(xì)胞遷移/侵襲能力的影響,CCK8法檢測膀胱癌細(xì)胞對吉西他濱的化療敏感性,Western blotting、吖啶橙染色、電鏡等檢測自噬蛋白表達(dá)水平。結(jié)果與對照組和空載組相比,CYLD組通過Transw ell小室的細(xì)胞數(shù)目明顯減少(P0.05),24 h半抑制濃度(IC50)明顯降低(P0.05),自噬相關(guān)蛋白LC3、Beclin 1表達(dá)降低,p62表達(dá)增高,吖啶橙染色及電鏡觀察發(fā)現(xiàn)自噬溶酶體及自噬泡減少。結(jié)論腫瘤抑制因子CYLD可以抑制膀胱癌細(xì)胞的遷移/侵襲能力,并通過抑制自噬提高膀胱癌細(xì)胞對吉西他濱的化療敏感性。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of tumor suppressor CYLD on the chemosensitivity of bladder cancer cell line gemcitabine. Methods A human bladder cancer cell line T24253J transfected with CYLD overexpression plasmid was constructed and divided into two groups: T24253Jcells were treated with liposome only. The effect of CYLD on the migration / invasion of bladder cancer cells was detected by ell assay. The chemosensitivity of bladder cancer cells to gemcitabine was detected by CCK8 method. Western blotting and acridine orange staining were used to detect the chemosensitivity of bladder cancer cells to gemcitabine. Results compared with control group and no-load group, the expression of autophagy protein in Cyd group decreased significantly compared with control group and no-load group. Results compared with control group and no-load group, the number of cells passing through Transw ell chamber was significantly decreased by IC50), and the expression of autophagy associated protein LC3nBeclin 1 was decreased significantly, and the expression of p62 was increased. Acridine orange staining and electron microscopy showed that autophagy lysosomes and autophagy decreased. Conclusion tumor suppressor CYLD can inhibit the migration / invasion of bladder cancer cells and increase the chemosensitivity of bladder cancer cells to gemcitabine by inhibiting autophagy.
【作者單位】: 山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院泌尿外科;山東大學(xué)附屬生殖醫(yī)院醫(yī)務(wù)科;山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】:山東省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2014ZRB14081);山東省自然科學(xué)基金(2014ZRB14513) 山東省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(2015GSF118055) 山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計(jì)劃(2014WS0341)
【分類號】:R737.14
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本文編號:1654079
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