本文關(guān)鍵詞：重組人促紅細(xì)胞生成素治療腎間質(zhì)纖維化的作用機(jī)制研究　出處：《中國(guó)全科醫(yī)學(xué)》2016年06期 　論文類(lèi)型：期刊論文

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【摘要】：目的探討重組人促紅細(xì)胞生成素(r Hu EPO)治療腎間質(zhì)纖維化(RIF)的作用機(jī)制。方法 2014年7月—2015年6月,將人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2細(xì)胞)隨機(jī)分為7組:空白對(duì)照組(E1組):未加任何刺激物;r Hu EPO對(duì)照組(E2組):r Hu EPO終濃度為20 U/ml;人純化清蛋白誘導(dǎo)組(E3組):人純化清蛋白終濃度為5 mg/ml;E4組:加人純化清蛋白(5 mg/ml)和r Hu EPO(5 U/ml);E5組:加人純化清蛋白(5 mg/ml)和r Hu EPO(10 U/ml);E6組:加人純化清蛋白(5 mg/ml)和r Hu EPO(20 U/ml);Rho相關(guān)卷曲螺旋形成的蛋白激酶(ROCK)抑制劑Y27632組(E7組):加ROCK抑制劑Y27632(10μmol/L),30 min后加人純化清蛋白(5 mg/ml)。采用細(xì)胞增殖試驗(yàn)檢測(cè)刺激16、24、48、72 h時(shí)各組細(xì)胞增殖數(shù),反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)Rho A、ROCK mRNA表達(dá)水平,細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、E-鈣黏蛋白(E-cadherin)表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)纖維連接蛋白(FN)表達(dá)水平。結(jié)果 16 h時(shí),各組細(xì)胞增殖數(shù)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。24、48、72 h時(shí),各組細(xì)胞增殖數(shù)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中E3~E6組高于E1組、E2組,E4~E6組高于E3組,E7組低于E3組,E5組、E6組高于E4組,E6組高于E5組(P0.05)。各組Rho A mRNA表達(dá)水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中E3~E6組高于E1組、E2組,E4~E6組低于E3組,E5組、E6組低于E4組,E6組低于E5組(P0.05)。各組ROCK mRNA表達(dá)水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中E3~E6組高于E1組、E2組,E4~E7組低于E3組,E5組、E6組低于E4組,E6組低于E5組(P0.05)。各組α-SMA表達(dá)水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中E3~E5組高于E1組、E2組,E4~E7組低于E3組,E5組、E6組低于E4組,E6組低于E5組(P0.05)。各組E-cadherin表達(dá)水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中E3~E6組低于E1組、E2組,E4~E7組高于E3組,E5組、E6組高于E4組,E6組高于E5組(P0.05)。各組FN表達(dá)水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中E3~E5組高于E1組、E2組,E4~E7組低于E3組,E5組、E6組低于E4組,E6組低于E5組(P0.05)。E3組、E4組、E5組、E6組Rho A mRNA與ROCK mRNA均呈正相關(guān)(P0.05)。結(jié)論人純化清蛋白能誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞發(fā)生上皮細(xì)胞-間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(EMT),進(jìn)而發(fā)生RIF,而r Hu EPO通過(guò)阻斷EMT的Rho A/ROCK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路從而抑制RIF發(fā)生,且在一定范圍內(nèi)r Hu EPO水平越高,其抑制作用越強(qiáng)。
[Abstract]:鐩殑鎺㈣閲嶇粍浜轟績(jī)綰㈢粏鑳?yōu)鐢熸垚绱?r Hu EPO)娌葷枟鑲鵑棿璐ㄧ氦緇村寲(RIF)鐨勪綔鐢ㄦ満鍒，

本文編號(hào)：1404809