本文關(guān)鍵詞：miR-222通過(guò)下調(diào)DDIT4抑制腎癌細(xì)胞自噬

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【摘要】：背景與目的:微小RNA(microRNA,miRNA,miR)在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有重要的作用。miR-222在多種腫瘤組織中表達(dá)上調(diào),而其在腎癌(renal cell carcinoma,RCC)中的表達(dá)及其作用機(jī)制尚不清楚。本研究擬通過(guò)檢測(cè)RCC組織及相應(yīng)癌旁組織中miR-222的表達(dá)情況,探討miR-222在RCC中的作用。并在體外條件下,通過(guò)檢測(cè)miR-222的下游作用靶點(diǎn),探討miR-222的抗RCC作用機(jī)制。方法:采用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)檢測(cè)RCC組織和癌旁組織中miR-222的表達(dá);采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活力;采用蛋白[質(zhì)]印跡法(Western blot)檢測(cè)DDIT4蛋白及LC3-Ⅱ的表達(dá);采用熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-222的作用靶點(diǎn);轉(zhuǎn)染EGFF-LC3后在激光共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞自噬狀態(tài)。結(jié)果:qRTPCR檢測(cè)結(jié)果顯示,miR-222在RCC組織中表達(dá)明顯上調(diào)。在人腎透明細(xì)胞癌786-O細(xì)胞株中敲低miR-222表達(dá)后顯著抑制細(xì)胞的增殖活力,而過(guò)表達(dá)miR-222可增強(qiáng)786-O細(xì)胞的增殖活力(P0.01)。在786-O細(xì)胞中敲低miR-222后,其靶基因DDIT4蛋白的表達(dá)顯著上調(diào),過(guò)表達(dá)miR-222后,DDIT4表達(dá)明顯下調(diào)。熒光素酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,DDIT4為miR-222的直接作用靶點(diǎn)。RCC組織的DDIT4表達(dá)下調(diào)。在786-O細(xì)胞中抑制miR-222表達(dá)后,LC3-Ⅱ的表達(dá)水平顯著上調(diào),自噬體數(shù)目顯著增加。結(jié)論:miR-222在RCC中高表達(dá),并可能通過(guò)靶向抑制DDIT4的表達(dá)參與調(diào)控RCC細(xì)胞自噬。
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院泌尿外科;
【基金】：河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題計(jì)劃(20110142)
【分類號(hào)】：R737.11
【正文快照】： 微小RNA(microRNA,miRNA,miR) 歲。各組織標(biāo)本分為RCC組織和相應(yīng)癌旁組是一類胞內(nèi)小分子RNA,它們通過(guò)與mRNA 織,手術(shù)切下后迅速凍存于液氮保存?zhèn)溆谩１镜?’UTR區(qū)結(jié)合使靶基因沉默,從而抑制 研究遵循倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)并得到河北醫(yī)科大學(xué)第四miRNA調(diào)控靶基因的表達(dá)。隨著近年來(lái) 醫(yī)院

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張春梅;鄧華瑜;;miRNA-155對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞TP53INP1表達(dá)及其增殖的影響[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2013年09期

2 王雁;湯納平;邱云良;南雅萍;馬t，

本文編號(hào)：1192252