發(fā)布時間：2017-11-13 19:20

  本文關鍵詞：HMGB1對膀胱癌細胞增殖與凋亡的影響

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【摘要】：目的：通過檢測膀胱癌細胞系(BIU-87、 5637、T24、EJ)及人正常膀胱上皮細胞(SV-HUC-1)中HMGB1的表達情況,探討HMGB1對膀胱癌細胞增殖及凋亡的影響及可能的機制。方法：第一部分：內源檢測1.利用膀胱癌組織芯片技術,檢測人正常膀胱上皮細胞和膀胱癌細胞系(BIU-87、5637、T24、EJ)中HMGB1的表達情況；2.分別使用膀胱癌細胞系(BIU-87、5637、T24、EJ)及人正常膀胱上皮細胞(SV-HUC-1),利用實時熒光定量核酸擴增檢測系統(tǒng)(QPCR)檢測HMGB1在膀胱癌細胞系(BIU-87、5637、T24、EJ)及人正常膀胱上皮細胞(SV-HUC-1)中的mRNA表達水平；第二部分：功能建模1.過表達HMGB1,過表達重組質粒轉染膀胱癌細胞系BIU-87、T24。2.設計并構建HMGB1靶向敲除質粒對,共轉染膀胱癌細胞系BIU-87、T24,分別篩選出穩(wěn)定的細胞株。3.Western Blot檢測細胞模型中HMGB1蛋白的表達水平變化。分組：Con,過表達NC,HMGB1過表達,pTalen NC,pTalen-HMGB1第三部分：功能實驗1.MTT檢測細胞增殖測定。分組：Con組,亂序siRNA組,HMGB1 siRNA組,NC組,pTalen NC組,pTalen-HMGB1組。2. Transwell檢測細胞轉移和侵襲。分組：Con,過表達NC,HMGB1過表達,pTalen NC, pTalen-HMGB1。3.流式細胞術檢測細胞凋亡。分組：Con,過表達NC,HMGB1過表達,pTalen NC,pTalen-HMGB1。結果：本研究發(fā)現(xiàn),相對于正常人膀胱上皮細胞,膀胱癌細胞系(BIU-87、T24、5637、EJ)中的HMGB1蛋白表達水平顯著上調；轉染HMGB1 siRNA后的膀胱癌細胞T24、BIU-87生長受到抑制；轉染pTalen-HMGB1質粒后膀胱癌細胞T24、BIU-87生長同樣受到抑制；轉染HMGB1 siRNA后,兩株膀胱癌細胞BIU-87、T24侵襲能力減弱；轉染pTalen-HMGB1后,兩株膀胱癌細胞BIU-87、T24侵襲能力也減弱；轉染HMGB1 siRNA細胞凋亡率升高；轉染pTalen-HMGB1細胞凋亡率升高,且高于HMGB1 siRNA組(p0.05)。結論：1.HMGB1在膀胱癌細胞中的表達水平高于人正常的膀胱上皮細胞;2.HMGB1敲除／沉默后可抑制膀胱癌細胞增殖和侵襲;3.HMGB1敲除／沉默后可誘導膀胱癌細胞的凋亡；4.HMGB1敲除／沉默后可能通過Bax/Bcl-2途徑誘導膀胱癌細胞凋亡；
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.14

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本文編號：1182049