本文關(guān)鍵詞：蟾毒靈誘導(dǎo)人膀胱癌T24細(xì)胞凋亡和自噬相關(guān)基因表達(dá)的研究

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【摘要】：目的:探索蟾毒靈對體外培養(yǎng)人膀胱癌T24細(xì)胞凋亡和自噬的影響,探討蟾毒靈在干擾人膀胱癌T24細(xì)胞生長的作用機制。方法:采用人膀胱癌T24細(xì)胞株為研究對象。將不同濃度的蟾毒靈作用于膀胱癌T24細(xì)胞,采用MTT法測定蟾毒靈對人膀胱癌T24細(xì)胞增殖抑制的作用;倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry analysis,FCM)檢測蟾毒靈對膀胱癌T24細(xì)胞周期的變化;電鏡下觀察自噬小泡的發(fā)生;應(yīng)用實時熒光定量PCR法檢測自噬基因Beclin1基因mRNA表達(dá)變化。結(jié)果:MTT結(jié)果示:不同濃度華蟾素作用于T24細(xì)胞24h、48h后其IC50值分別為91.7nmol/L、20.4noml/L;蟾毒靈對膀胱癌T24細(xì)胞增殖有抑制作用。流式細(xì)胞儀檢測數(shù)據(jù)示:經(jīng)蟾毒靈處理過的膀胱癌,G0/G1期細(xì)胞計數(shù)較正常膀胱癌細(xì)胞明顯增多,S期膀胱癌細(xì)胞記數(shù)較正常膀胱細(xì)胞則明顯減少,結(jié)果說明蟾毒靈作用于膀胱癌細(xì)胞后,使部分膀胱癌細(xì)胞不能順利進(jìn)入S期,而是將膀胱癌細(xì)胞阻礙停滯在G0/G1期,最后使膀胱癌細(xì)胞的增殖受到了抑制。透視電鏡下示:膀胱癌T24細(xì)胞經(jīng)過蟾毒靈處理后,誘導(dǎo)了自噬小泡的形成。通過實時熒光定量PCR法檢測自噬基因Beclin1基因mRNA表達(dá)水平顯著升高。結(jié)論:蟾毒靈對體外培養(yǎng)的人膀胱癌T24細(xì)胞的有明顯的增殖抑制作用,影響T24細(xì)胞周期,誘導(dǎo)該細(xì)胞自噬及凋亡,可能與自噬相關(guān)基因Beclin1水平表達(dá)增強有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.14

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本文編號：1154034