蟾毒靈誘導人膀胱癌T24細胞凋亡和自噬相關基因表達的研究
本文關鍵詞:蟾毒靈誘導人膀胱癌T24細胞凋亡和自噬相關基因表達的研究
【摘要】:目的:探索蟾毒靈對體外培養(yǎng)人膀胱癌T24細胞凋亡和自噬的影響,探討蟾毒靈在干擾人膀胱癌T24細胞生長的作用機制。方法:采用人膀胱癌T24細胞株為研究對象。將不同濃度的蟾毒靈作用于膀胱癌T24細胞,采用MTT法測定蟾毒靈對人膀胱癌T24細胞增殖抑制的作用;倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學變化;流式細胞術(flow cytometry analysis,FCM)檢測蟾毒靈對膀胱癌T24細胞周期的變化;電鏡下觀察自噬小泡的發(fā)生;應用實時熒光定量PCR法檢測自噬基因Beclin1基因mRNA表達變化。結果:MTT結果示:不同濃度華蟾素作用于T24細胞24h、48h后其IC50值分別為91.7nmol/L、20.4noml/L;蟾毒靈對膀胱癌T24細胞增殖有抑制作用。流式細胞儀檢測數(shù)據(jù)示:經(jīng)蟾毒靈處理過的膀胱癌,G0/G1期細胞計數(shù)較正常膀胱癌細胞明顯增多,S期膀胱癌細胞記數(shù)較正常膀胱細胞則明顯減少,結果說明蟾毒靈作用于膀胱癌細胞后,使部分膀胱癌細胞不能順利進入S期,而是將膀胱癌細胞阻礙停滯在G0/G1期,最后使膀胱癌細胞的增殖受到了抑制。透視電鏡下示:膀胱癌T24細胞經(jīng)過蟾毒靈處理后,誘導了自噬小泡的形成。通過實時熒光定量PCR法檢測自噬基因Beclin1基因mRNA表達水平顯著升高。結論:蟾毒靈對體外培養(yǎng)的人膀胱癌T24細胞的有明顯的增殖抑制作用,影響T24細胞周期,誘導該細胞自噬及凋亡,可能與自噬相關基因Beclin1水平表達增強有關。
【學位授予單位】:皖南醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R737.14
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本文編號:1154034
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