miR-873靶向生存蛋白基因?qū)θ饲傲邢侔㏄C3細胞侵襲性的影響
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【摘要】:目的探討人前列腺癌PC3細胞中miR-873和生存蛋白(Survivin)基因的表達,闡明miR-873對生存蛋白基因的靶向調(diào)控作用以及對PC3細胞侵襲性的影響。方法培養(yǎng)PC3細胞并應用免疫熒光化學技術(shù)檢測生存蛋白基因的表達;采用生物信息學方法對miR-873和生存蛋白基因的匹配關(guān)系進行預測,并應用雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)鑒定;轉(zhuǎn)染miR-873模擬物后,行實時定量PCR(qRT-PCR)檢測miR-873和生存蛋白基因的表達,Western印跡檢測生存蛋白的表達,Transwell小室檢測癌細胞體外的侵襲性。結(jié)果倒置相差顯微鏡下可見細胞均勻分布,形態(tài)規(guī)則均一;免疫熒光化學顯示,胞質(zhì)內(nèi)有生存蛋白的表達;靶基因預測軟件miRanda和Target Scan顯示,miR-873和生存蛋白基因匹配良好,雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)鑒定發(fā)現(xiàn),miR-873能夠結(jié)合生存蛋白mRNA 3'UTR并有效抑制其表達。qRT-PCR和Western印跡檢測結(jié)果均表明,miR-873的過表達能夠下調(diào)生存蛋白基因表達。Transwell實驗顯示,miR-873的過表達能夠抑制PC3細胞的侵襲。結(jié)論 miR-873通過靶向作用于生存蛋白mRNA 3'UTR負性調(diào)控人前列腺癌PC3細胞中生存蛋白的表達,并能夠抑制其侵襲。
【作者單位】: 遼寧醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院泌尿外科;
【分類號】:R737.25
【正文快照】: 前列腺癌(prostate cancer)是常見的中老年男性泌尿系惡性腫瘤,隨著我國老齡化程度的加劇以及飲食生活習慣的改變,其發(fā)病率呈逐年增高趨勢。因此,為采取相應的治療策略,了解前列腺癌的發(fā)生和進展機制極為迫切。生存蛋白(Survivin)是Am-brosini等[1]分離鑒定的凋亡抑制基因,屬
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本文編號:1138790
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