本文關(guān)鍵詞：肥大細(xì)胞及大麻素CB2受體與大鼠間質(zhì)性膀胱炎的相關(guān)性研究

  更多相關(guān)文章： 間質(zhì)性膀胱炎 MC 大麻素CB2受體 JWHO15

【摘要】：目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立間質(zhì)性膀胱炎(IC)動(dòng)物模型,檢測(cè)肥大細(xì)胞(MC)及大麻素CB2受體在IC模型中的表達(dá)情況,以及大麻素CB2受體激動(dòng)劑JWH015處理后的IC模型上的表達(dá)情況,探討MC與CB2受體在IC的關(guān)系,進(jìn)而為IC的治療尋求新靶點(diǎn)。分組及方法：1. 分組：選用SPF級(jí)雌性SD大鼠30只,隨機(jī)分成3組A空白組：10只,B IC組：10只,C IC干預(yù)組。2.方法：(1)空白組經(jīng)尿道膀胱灌注0.9%的生理鹽水1 ml,保留45]min,排盡藥物后用磷酸緩沖液(PBS)沖洗3次,不做特殊處理,連續(xù)1周。(2)IC組經(jīng)尿道膀胱灌注10mg/ml的硫酸魚(yú)精蛋白1 ml,保留45 min,排盡藥物后用磷酸緩沖液(PBS)沖洗3次；灌注750ug/ml的脂多糖1 ml,保留30 min,排盡藥物后用PBS沖洗3次,拔出導(dǎo)管,不做特殊處理,連續(xù)1周。(3)IC干預(yù)組經(jīng)尿道膀胱灌注10 mg/ml的硫酸魚(yú)精蛋白1 ml,保留45 min,排盡藥物后用磷酸緩沖液(PBS)沖洗3次；灌注750ug/ml的脂多糖1 ml,保留30 min,排盡藥物后用PBS沖洗3次,拔出導(dǎo)管,4h后腹腔注射05mg/m (?)大麻素受體激動(dòng)劑CB2激動(dòng)劑]fWHO15(5mgJWHO15溶于10m120%的二甲亞砜中)2ml,每天一次連續(xù)1周。一周后立即處死三組大鼠取膀胱組織,并進(jìn)行一下操作：(1)通過(guò)HE染色觀察研究對(duì)象IC動(dòng)物模型病理學(xué)特征；(2)甲苯胺藍(lán)染色檢測(cè)大鼠膀胱MC的數(shù)量；(3)免疫組化雙染色計(jì)算大麻素CB2陽(yáng)性細(xì)胞及相對(duì)表達(dá)量；(4) Western-bolt檢測(cè)三組大鼠膀胱粘膜大麻素CB2受體的表達(dá)。結(jié)果：1、空白組膀胱見(jiàn)粘膜及粘膜下層完好無(wú)損,見(jiàn)少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。IC組及IC干預(yù)組可見(jiàn)膀胱粘膜損傷明顯,粘膜層出現(xiàn)連續(xù)性破壞,粘膜下層脫落,膀胱壁組織可見(jiàn)廣泛的出血與充血現(xiàn)象。2、MC經(jīng)甲苯胺藍(lán)染色呈紫紅色,空白組大鼠膀胱可見(jiàn)少量MC;IC組膀胱粘膜及粘膜下層可見(jiàn)大量MC表達(dá)(P0.01,vs空白組),加入大麻素受體激動(dòng)劑后,IC干預(yù)組大鼠膀胱粘膜上MC表達(dá)有所減少,但仍高于空白組(P0.05_vs空白組；P0.05.vs膀胱炎組)。三組大鼠膀胱肌層上MC較少,且無(wú)明顯差異(P0.05)。3、免疫組化染色可見(jiàn)三組大鼠膀胱粘膜組織均有大麻素CB2受體表達(dá)；IC組膀胱粘膜表達(dá)明顯低于空白組(P0.01,vs空白組),加入大麻素受體激動(dòng)劑后,IC干預(yù)組大鼠膀胱粘膜上大麻素CB2受體達(dá)有所升高,但仍低于空白組,高于IC組(P0.0S.vs空白組；P0.05.vs IC組)。4、Western-bolt結(jié)果中,三組大鼠膀胱粘膜組織均有大麻素CB2受體表達(dá)；間質(zhì)性膀胱炎組膀胱粘膜表達(dá)明顯低于空白組(P0.05,vs空白組),加入大麻素受體激動(dòng)劑JWH015后,干預(yù)組大鼠膀胱粘膜上大麻素CB2受體表達(dá)有所升高,高于間質(zhì)性膀胱組,但仍低于空白組(P0.05.vs空白組；P0.05.vs-膀胱炎組)。三組大鼠肌層大麻素CB2受體表達(dá)較少,且無(wú)明顯差異(P0.05)。結(jié)論：1.本實(shí)驗(yàn)通過(guò)經(jīng)尿道膀胱灌注硫酸魚(yú)精蛋白和脂多糖可以成功構(gòu)建大鼠間質(zhì)性膀胱炎(IC)動(dòng)物模型,符合人類IC病理特征。2.IC組膀胱組織的MC增加明顯,且脫顆粒MC明顯增加,膀胱肌層可見(jiàn)少量纖維化,由此推測(cè)MC與IC的發(fā)生及發(fā)展炎密切相關(guān)。3.IC干預(yù)組膀胱組織可見(jiàn)大量MC,但脫顆粒狀較少,CB2受體表達(dá)升高。表明大麻素CB2受體激動(dòng)劑可抑制MC的表達(dá),減緩和阻止IC的進(jìn)展,可能成為治療IC的新靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R694.3

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