本文關(guān)鍵詞：副溶血弧菌VPA1405多克隆抗體制備及應(yīng)用　出處：《軍事醫(yī)學(xué)》2013年02期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 副溶血弧菌 生物膜 Western印跡

【摘要】：目的建立副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的Western印跡方法。方法將VPA1405基因克隆到pET-28a(+)載體,轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21中進(jìn)行不可溶性表達(dá),在變性條件下純化得到VPA1405蛋白,制備的包涵體溶液直接免疫兔得到多克隆抗體,進(jìn)而利用Western印跡檢測VPA1405蛋白在野生株(WT)和opaR基因敲除株(ΔopaR)中表達(dá)水平的差異。結(jié)果成功表達(dá)純化了6個與生物膜相關(guān)基因的蛋白;Western印跡結(jié)果顯示OpaR調(diào)控子對VPA1405基因的表達(dá)呈正調(diào)控,這與表型實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符。結(jié)論成功建立了VP的Western印跡實(shí)驗(yàn)平臺,該平臺可用于后續(xù)VP生物膜相關(guān)基因的調(diào)控研究。
[Abstract]:Objective to establish the Vibrio parahaemolyticus (Vibrio parahaemolyticus, VP) Western blot. Methods VPA1405 gene was cloned into pET-28a (+) vector into not soluble expression in Escherichia coli BL21, under denaturing conditions and purified VPA1405 protein by direct solution of the inclusion body prepared rabbit polyclonal antibody was obtained, and then using VPA1405 protein Western was analyzed in the wild strain (WT) and opaR gene knockout strain (opaR) expression level differences. Results the successful expression of the 6 genes associated with biofilm protein purification; Western blot showed that the expression of the positive regulation of VPA1405 gene OpaR promoter, which is consistent with the experimental results. Conclusion the phenotype successfully established Western blot VP platform, the platform can be used to study the regulation of subsequent VP biofilm related genes.

【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與管理學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所病原微生物生物安全國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31170127,30871370) 國家973計劃資助項(xiàng)目(2009CB522604)
【分類號】：R378
【正文快照】： 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)是一種革蘭陰性菌,廣泛存在于海水、海底沉積物以及魚、蝦、貝、蟹等海洋生物中,是一種重要的食源性致病菌[1]。人們食用被VP污染的食物后,常引起以惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、發(fā)熱等為主要癥狀的急性胃腸炎,其主要特征為水樣便,且�；�

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉軍義;;文蛤病原菌(副溶血弧菌)的分離與初步研究[J];檢驗(yàn)檢疫科學(xué);1993年04期

2 邱波,姚斐,王本利;副溶血弧菌越冬的研究[J];職業(yè)與健康;2002年12期

3 李志峰;聶軍;;副溶血弧菌端鞭毛基因系統(tǒng)的研究現(xiàn)況[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);2003年02期

4 蔡浩然;液晶態(tài)生物膜[J];科學(xué)通報;1978年04期

5 任恕;;生物膜選擇透過作用機(jī)理研究的一些新進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;1979年01期

6 楊世杰;;生物膜的功能[J];生命世界;1981年02期

7 金文泉;;第一講:生物膜的結(jié)構(gòu)及其物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的機(jī)能[J];中國醫(yī)師進(jìn)修雜志;1982年07期

8 張志鴻;劉宏志;;生物膜的動態(tài)結(jié)構(gòu)和功能——從二維到三維[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1987年01期

9 ;簡訊與信息[J];生命的化學(xué);1989年02期

10 王茵茵,黃曉哲,王月琴,席曼芳;上海地區(qū)副溶血弧菌血清分型狀況研究[J];中國公共衛(wèi)生;1992年07期

相關(guān)會議論文 前10條

1 隋森芳;;從分子到細(xì)胞——生物膜研究發(fā)展的動力[A];第七屆全國生物膜學(xué)術(shù)討論會論文摘要匯編[C];1999年

2 江文;楊繼君;陳興平;;白念珠菌生物膜的形成及其耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展[A];湖北省暨武漢微生物學(xué)會真菌專業(yè)委員會2007年學(xué)術(shù)年會大會報告集[C];2007年

3 陳Oz;;生物膜與后基因組時代[A];后基因組時代的基因功能研究——青年科學(xué)家論壇第八十次活動論文集[C];2003年

4 辛宏;顏光濤;陳泮澡;;生物膜、細(xì)胞凋亡及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究進(jìn)展[A];第七屆全國生物膜學(xué)術(shù)討論會論文摘要匯編[C];1999年

5 王麗華;林波海;周宏偉;吳維;張幼苓;;圓二色技術(shù)的發(fā)展及其在生物膜研究中的應(yīng)用[A];第七屆全國生物膜學(xué)術(shù)討論會論文摘要匯編[C];1999年

6 高靚輝;方維海;;抗菌肽穿透生物膜的微觀機(jī)制:耗散粒子動力學(xué)研究[A];中國化學(xué)會第26屆學(xué)術(shù)年會理論化學(xué)方法和應(yīng)用分會場論文集[C];2008年

7 李曉蓮;趙曉晨;黃志剛;;液晶技術(shù)及其在生物與化學(xué)過程中的應(yīng)用[A];中國化學(xué)會第二十五屆學(xué)術(shù)年會論文摘要集（上冊）[C];2006年

8 周昭彥;秦亮;胡必杰;渡邊浩;;生物膜內(nèi)嗜肺軍團(tuán)菌毒力基因表達(dá)量分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第八次全國檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中華醫(yī)學(xué)會檢驗(yàn)分會成立30周年慶典大會資料匯編[C];2009年

9 邵志峰;D.M.Czajkowsky;孫潔林;胡鈞;;應(yīng)用AFM單分子方法研究揭示細(xì)菌毒素PFO在生物膜表面成孔的新機(jī)制[A];中國化學(xué)會第27屆學(xué)術(shù)年會第04分會場摘要集[C];2010年

10 于長平;Ghannoum MA;Mukherjee PK;Chandra J;;鐮刀菌生物膜對抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)方法的建立[A];中華醫(yī)學(xué)會第16次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會摘要集[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 記者 孫琪;頂級專家聚蓉 研討防治“生物膜”[N];四川日報;2011年

2 記者 繆琴 李凌翌;薄如蟬翼生物膜 讓壞死細(xì)胞“起死回生”[N];成都日報;2006年

3 符壯才 劉嫦玉;細(xì)菌鞭毛鍍銀染色有新方法[N];健康報;2006年

4 唐偉;生物膜研究領(lǐng)域的新收獲[N];科技日報;2006年

5 周夢;破解肌體造血機(jī)理與營養(yǎng)循環(huán)保障機(jī)制[N];大眾科技報;2008年

6 長弓;植物的抗凍性[N];中國氣象報;2000年

7 劉莉 向杰;光合作用的光榮與夢想[N];科技日報;2004年

8 馮衛(wèi)東;沒有DNA 細(xì)菌也變身[N];科技日報;2008年

9 鄭千里;生命的另一種閱讀和解析[N];科技日報;2008年

10 英佳;我國研制成功新型多肽[N];人民日報海外版;2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李雙陽;生物膜的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)關(guān)系的模擬研究[D];北京化工大學(xué);2010年

2 孫鳳軍;大腸桿菌生物膜的形成及其耐藥質(zhì)粒傳遞和調(diào)控的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

3 劉倩;絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Stk在表皮葡萄球菌生物膜形成中的作用及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

4 李華林;表皮葡萄球菌細(xì)胞間粘附素基因功能及表達(dá)調(diào)控的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

5 李敏;附屬基因調(diào)節(jié)系統(tǒng)（agr）-Ⅰ型對表皮葡萄球菌生物膜形成調(diào)節(jié)關(guān)系的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

6 秦智強(qiáng);表皮葡萄球菌生物膜三維結(jié)構(gòu)、相關(guān)形成機(jī)制及組氨酸激酶YycG小分子抑制物的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2007年

7 史曉，

本文編號：1399127