尿酸誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞C反應(yīng)蛋白表達(dá)的氧化應(yīng)激機(jī)制研究
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【摘要】:目的研究尿酸對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)C反應(yīng)蛋白(CRP)基因和蛋白表達(dá)的影響,并初步探討其氧化應(yīng)激機(jī)制。方法將不同濃度的尿酸(0、4、8、12、16mg/dL)分別與HUVECs共同孵育12h,以及將12mg/dL尿酸與HUVECs分別作用不同時(shí)間(0、6、12、24、48h)后,采用Real-time PCR檢測(cè)HUVECs CRP mRNA表達(dá);Western blot檢測(cè)HUVECs CRP蛋白表達(dá);以2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯(DCF-DA)為熒光探針,用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HUVECs活性氧(ROS)水平,并觀察抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸(NAC,10mmol/L)對(duì)HUVECs ROS水平、CRP mRNA和蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果 8~16mg/dL尿酸誘導(dǎo)HUVECs CRP mRNA和蛋白表達(dá)上調(diào);12mg/dL尿酸與HUVECs作用6h,HUVECs CRP mRNA和蛋白表達(dá)明顯增加(P0.05),隨著時(shí)間延長(zhǎng),CRP mRNA和蛋白表達(dá)量逐漸增加,至12h達(dá)最高峰(P0.01)。NAC可顯著抑制尿酸對(duì)HUVECs ROS水平、CRP mRNA和蛋白表達(dá)的影響,使CRP mRNA和蛋白表達(dá)接近于正常水平。結(jié)論尿酸誘導(dǎo)HUVECs CRP表達(dá),其機(jī)制可能與尿酸增加HUVECs ROS水平有關(guān),提示尿酸介導(dǎo)的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)可能與內(nèi)皮細(xì)胞的損傷有關(guān)。
【作者單位】: 川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫研究所;射洪縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【分類號(hào)】:R363
【正文快照】: 系統(tǒng)性炎癥是心血管疾病的重要決定性因素。C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)不僅是系統(tǒng)性炎癥的敏感生化標(biāo)志物,且通過(guò)使內(nèi)皮功能失調(diào)和平滑肌細(xì)胞增殖等多種途徑和機(jī)制導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的發(fā)生和發(fā)展,被認(rèn)為是心血管事件最強(qiáng)有力的預(yù)測(cè)因子之一[1]。盡管肝細(xì)胞是合成
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