發(fā)布時(shí)間：2017-10-05 08:10

  本文關(guān)鍵詞：HPV及高危亞型與卵巢上皮癌發(fā)病的相關(guān)性研究

  更多相關(guān)文章： 甲醛固定石蠟包埋組織 DNA PCR 高危亞型 HPV感染

【摘要】：目的:探討HPV感染以及其高危亞型HPV16和HPV35與卵巢上皮癌發(fā)病情況之間的關(guān)聯(lián)性,尋找卵巢上皮癌發(fā)病的相關(guān)因素,為卵巢上皮癌的預(yù)防提供客觀(guān)依據(jù)。方法:運(yùn)用PCR技術(shù)擴(kuò)增從甲醛固定石蠟包埋組織中提取的DNA:(1)提取石蠟包埋的卵巢組織DNA:625例石蠟組織標(biāo)本分為正常卵巢組、良性腫瘤組和癌變卵巢三組:經(jīng)二甲苯脫蠟,使用DNA提取試劑提取出組織DNA。(2)運(yùn)用PCR技術(shù)檢測(cè)HPV的感染率:①將提取的DNA作為模板,用擴(kuò)增目的片段(450bp)的引物PGMY09/11進(jìn)行初步擴(kuò)增;②選取第一步中PGMY擴(kuò)增結(jié)果為陰性的產(chǎn)物作為模板,用擴(kuò)增的目片段較短(150bp)的引物GP5+/6+進(jìn)行第二次擴(kuò)增。(3)亞型選擇:將PGMY和GP5+/6+擴(kuò)增結(jié)果為陽(yáng)性的標(biāo)本,再應(yīng)用PCR技術(shù)從中篩選出高危型HPV16和HPV35,觀(guān)察高危亞型16和35各占比值。結(jié)果:(1)從石蠟包埋組織中提取出DNA。(2)成功建立了HPV的巢式PCR和降落PCR擴(kuò)增體系。(3)在癌變卵巢組織中HPV的陽(yáng)性檢出率顯著高于正常對(duì)照組和良性腫瘤組,同時(shí)良性腫瘤組的陽(yáng)性檢出率也高于正常對(duì)照組,44.32%的標(biāo)本(95%CI=40.48-48.22%)使用PGMY09/11和GP5+/6+兩對(duì)引物的巢式PCR擴(kuò)增結(jié)果呈陽(yáng)性,癌變組中63.35%(95%CI=58.95-68.65%)的樣本PCR擴(kuò)增結(jié)果呈陽(yáng)性,正常組織和卵巢良性腫瘤組織中擴(kuò)增結(jié)果陽(yáng)性分別占有17.64%(95%CI=12.43-22.87%)和37.37%(95%CI=29.38-45.42%),各組的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)意義(P0.005P0.005)。(4)對(duì)HPV陽(yáng)性組織中的HPV16和HPV35兩種高危亞型進(jìn)行檢測(cè),癌變組HPV16占較大比值,共有53.97%(95%CI=45.78-61.8%)為HPV16,與正常對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.005)。HPV陽(yáng)性標(biāo)本中僅3.97%(95%CI=1.68-6.26%)為HPV35,癌變組與正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:我們認(rèn)為卵巢上皮癌的發(fā)生發(fā)展可能與HPV感染相關(guān)。高危亞型HPV16可能對(duì)卵巢組織具有較強(qiáng)的致癌作用,HPV35也可能在卵巢癌的形成中起到一定作用。
【關(guān)鍵詞】：甲醛固定石蠟包埋組織 DNA PCR 高危亞型 HPV感染
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.31
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 前言11-14
• 第一章 高危型HPV與卵巢上皮癌發(fā)病的關(guān)聯(lián)14-30
• 1.1 材料與方法14-21
• 1.1.1 標(biāo)本來(lái)源14
• 1.1.2 主要試劑14-15
• 1.1.3 主要儀器設(shè)備15-16
• 1.1.4 主要耗材16
• 1.1.5 主要方法16-18
• 1.1.6 PCR18-20
• 1.1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20-21
• 1.2 結(jié)果21-23
• 1.2.1 HPV PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果21-22
• 1.2.2 HPV PCR產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果比對(duì)分析22
• 1.2.3 HPV PCR結(jié)果統(tǒng)計(jì)與分析22-23
• 1.3 討論23-30
• 第二章 HPV16、HPV35感染與卵巢上皮癌發(fā)病的關(guān)聯(lián)30-39
• 2.1 材料與方法30-33
• 2.1.1 標(biāo)本來(lái)源30
• 2.1.2 主要試劑30-31
• 2.1.3 主要儀器設(shè)備31
• 2.1.4 主要耗材31
• 2.1.5 主要方法31-33
• 2.1.6 統(tǒng)計(jì)分析33
• 2.2 結(jié)果33-36
• 2.2.1 HPV亞型PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果33-34
• 2.2.2 HPV亞型PCR產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果比對(duì)分析34-36
• 2.2.3 HPV16和HPV35 PCR結(jié)果統(tǒng)計(jì)與分析36
• 2.3 討論36-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-47
• 綜述47-58
• 參考文獻(xiàn)53-58
• 攻讀學(xué)位期間主要研究成果58-59
• 中英文縮略詞對(duì)照表59-60
• 致謝60

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