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妊娠期糖尿病胎盤PPARγ水平及其對新生兒體脂的影響

發(fā)布時間:2017-10-04 17:41

  本文關(guān)鍵詞:妊娠期糖尿病胎盤PPARγ水平及其對新生兒體脂的影響


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【摘要】:目的:本研究旨在探討妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)胎盤PPARγ水平以及其對新生兒體脂的影響。方法:采用前瞻性隊列研究的方法,選取2014年5月-2015年5月在銅陵市婦幼保健院產(chǎn)前門診做常規(guī)產(chǎn)檢,并在此分娩的孕早期單胎孕婦,排除患有肝腎疾病、代謝性疾病、遺傳性疾病等患者以及孕前糖尿病患者。于孕24-28周,對所有研究對象進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)試驗,并根據(jù)OGTT結(jié)果分為兩組,即正常組與GDM組。隨訪研究對象至胎兒出生,收集胎盤及臍血樣本;并于胎兒出生24小時內(nèi),進(jìn)行體格指標(biāo)測量。后期進(jìn)行胎盤PPARγ的表達(dá)水平檢測,即實時逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和蛋白質(zhì)印跡實驗。結(jié)果:(1)按照納入和排除標(biāo)準(zhǔn),本次研究共收集孕早期研究對象783人,由于失訪、流產(chǎn)、死產(chǎn)、后期拒絕合作等原因,研究對象中失訪151人,最終觀察到632人。根據(jù)孕24-28周OGTT結(jié)果,觀察隊列中GDM組189例,正常組孕婦443例。至研究隊列隨訪結(jié)束,最終收集到研究對象的孕中期血樣612例,孕晚期血樣444例,胎盤272例,臍血樣本266例。(2)GDM組新生兒出生體重3.40±0.50kg,正常組新生兒出生體重為3.36±0.45 kg,兩組新生兒出生體重之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.305)。但GDM組新生兒體脂百分含量為(18.37±5.92)%,正常組新生兒體脂百分含量為(15.45±4.89)%,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。(3)RT-PCR結(jié)果顯示兩組之間PPARγm RNA表達(dá)水平的差異有統(tǒng)計學(xué)意義,GDM組呈下調(diào)趨勢(P0.05)。兩組之間的CD36、FABPpm、FATP-1、FATP-2、FATP-3和FATP-4m RNA表達(dá)水平的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),GDM組均呈下調(diào)趨勢(P0.05);FATP-5和FATP-6 m RNA表達(dá)水平在兩組之間的差異無統(tǒng)計學(xué)學(xué)意義。(4)Western blot結(jié)果顯示正常組與GDM組PPARγ胎盤蛋白表達(dá)水平的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.013),GDM組胎盤PPARγ蛋白呈下調(diào)趨勢,表達(dá)水平降低。其對胎盤脂肪酸相關(guān)蛋白的表達(dá)水平產(chǎn)生影響:FATP-1(P=0.008)、FATP-3(P=0.006)蛋白的表達(dá)水平在兩組之間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,GDM組低于正常組。而FATP-2(P=0.006)蛋白的表達(dá)呈上調(diào)趨勢,其他胎盤脂肪酸相關(guān)蛋白CD36、FABPpm、FATP-4、FATP-5及FATP-6蛋白的表達(dá)水平尚未觀察到變化,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P(29)0.05)。(5)相關(guān)分析表明胎盤PPARγ蛋白含量與新生兒體脂含量之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,r=-0.693,P(27)0.001。結(jié)論:PPARγ表達(dá)水平降低影響了某些脂肪酸調(diào)控基因的表達(dá)水平,從而影響脂肪酸結(jié)合蛋白、脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的正常表達(dá),引起GDM孕婦體內(nèi)脂肪酸代謝紊亂,導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)脂肪增多及脂肪生成比例失調(diào),體脂含量較正常孕婦分娩的子代高。
【關(guān)鍵詞】:妊娠期糖尿病 PPARγ 脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 胎盤 體脂
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R714.256
【目錄】:
  • 摘要7-9
  • Abstract9-11
  • 1 前言11-13
  • 2 資料與方法13-25
  • 2.1 研究對象13-14
  • 2.2 方法14-17
  • 2.2.1 GDM診斷標(biāo)準(zhǔn)14
  • 2.2.2 體格測量14-15
  • 2.2.3 新生兒體脂百分含量的估計15-16
  • 2.2.4 血樣、胎盤采集16-17
  • 2.3 實時逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)17-20
  • 2.3.1 RNA提取準(zhǔn)備工作17
  • 2.3.2 RNA提取步驟17-18
  • 2.3.3 逆轉(zhuǎn)錄18
  • 2.3.4 實時定量PCR18-20
  • 2.4 蛋白提取20-21
  • 2.4.1 組織裂解20
  • 2.4.2 蛋白定量20
  • 2.4.3 分裝、保存樣品20-21
  • 2.5 蛋白質(zhì)印跡試驗21-24
  • 2.5.1 SDS-PAGE電泳21-22
  • 2.5.2 轉(zhuǎn)膜22-23
  • 2.5.3 免疫反應(yīng)23
  • 2.5.4 化學(xué)發(fā)光與顯影23-24
  • 2.6 糖化血紅蛋白檢測24
  • 2.7 血糖檢測24
  • 2.8 統(tǒng)計學(xué)分析24-25
  • 2.9 技術(shù)路線圖25
  • 3 結(jié)果25-35
  • 3.1 研究對象人口學(xué)基本特征25-27
  • 3.2 研究對象孕期生化指標(biāo)比較27
  • 3.3 新生兒體格測量指標(biāo)27-28
  • 3.4 新生兒體脂百分含量的比較28
  • 3.5 GDM對新生兒體脂百分含量影響的多元線性回歸分析28-29
  • 3.6 胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)子m RNA的表達(dá)水平29-32
  • 3.7 胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的檢測結(jié)果32-34
  • 3.8 PPARγ m RNA與胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)子m RNA之間的相關(guān)分析34
  • 3.9 PPARγ 蛋白與胎盤脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白含量之間的相關(guān)分析34-35
  • 3.10 胎盤PPARγ 蛋白含量與新生兒體脂含量之間的相關(guān)分析35
  • 4 討論35-40
  • 4.1 新生兒體脂百分含量的監(jiān)測與評價35-36
  • 4.2 脂肪酸在母體-胎兒之間的轉(zhuǎn)運(yùn)36-37
  • 4.3 GDM胎盤內(nèi)環(huán)境對脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)水平的影響37-38
  • 4.4 PPARγ 與胎盤脂代謝之間的關(guān)系38-39
  • 4.5 GDM胎盤PPARγ 水平變化對新生兒體脂的影響39-40
  • 5 結(jié)論40-41
  • 參考文獻(xiàn)41-43
  • 附錄43-44
  • 致謝44-45
  • 綜述45-55
  • 參考文獻(xiàn)54-55

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本文編號:971980

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