本文關(guān)鍵詞：NF、NCAM-180在女性盆腔器官脫垂患者陰道前壁中的表達(dá)及意義

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【摘要】：盆腔器官脫垂(pelvic organ prolapse,POP)是由盆底的支持結(jié)構(gòu)的功能障礙而引起的盆腔器官的下移,嚴(yán)重影響患者的身心健康。其確切發(fā)病機(jī)制尚不十分明了。近年來,關(guān)于盆底神經(jīng)損傷機(jī)制的研究是眾多學(xué)者關(guān)注的熱點(diǎn)和亟待解決的難題。國(guó)內(nèi)外研究證實(shí)盆腔器官脫垂、壓力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的發(fā)生與盆底的神經(jīng)損傷密切相關(guān)。在盆底神經(jīng)損傷后的修復(fù)過程中,神經(jīng)所在的局部微環(huán)境起到了決定性作用。微環(huán)境改變,勢(shì)必影響盆底神經(jīng)的再生修復(fù)。神經(jīng)細(xì)胞粘附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)作為一種重要的神經(jīng)微環(huán)境成分在神經(jīng)的生長(zhǎng)與發(fā)育、識(shí)別、聚集以及再生修復(fù)等過程中都有參與。NCAM-180亞型主要分布在成熟的神經(jīng)細(xì)胞,可以抑制對(duì)生長(zhǎng)信號(hào)的應(yīng)答從而阻遏神經(jīng)再生,增加細(xì)胞間的粘附作用,從而維持著神經(jīng)與周圍組織間的穩(wěn)定性。其表達(dá)異常能導(dǎo)致永久性的神經(jīng)損傷。神經(jīng)絲蛋白(neurofilament protein,NF)是神經(jīng)細(xì)胞骨架的重要的成分和神經(jīng)元特異性的結(jié)構(gòu)蛋白,具有“腳手架”的功能,維持神經(jīng)元的正常形態(tài)和功能,促進(jìn)軸突生長(zhǎng)、延長(zhǎng)及決定軸突直徑。它的分布及結(jié)構(gòu)變化反應(yīng)神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)及功能狀況,影響神經(jīng)的連接率、再生神經(jīng)纖維的直徑、密度及總數(shù)。目的通過研究NF、NCAM-180亞型在陰道壁中的表達(dá)情況,初步探討它們?cè)赑OP中的作用及機(jī)制,期望為POP的預(yù)防、治療及研究提供新的路徑和依據(jù)。材料與方法1材料選取本院婦科病區(qū)2013年6月至2015年2月收治的58例POP-QⅢ級(jí)及以上的非SUI患者為POP組(絕經(jīng)前29例,絕經(jīng)后29例),手術(shù)方式采用經(jīng)陰道子宮全切術(shù)+前后壁修補(bǔ)術(shù)或盆底重建術(shù)。對(duì)照組39例為同期婦科非激素相關(guān)疾病、宮頸癌前病變或早期癌的非盆底功能障礙性疾病患者(絕經(jīng)前17例,絕經(jīng)后22例),手術(shù)方式采用經(jīng)腹或經(jīng)陰道子宮全切術(shù)。兩組患者的一般資料比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。所有患者無神經(jīng)系統(tǒng)、激素相關(guān)疾病、慢性呼吸系統(tǒng)、代謝性疾病以及結(jié)締組織疾病等。近3個(gè)月未全身應(yīng)用激素類藥物;絕經(jīng)后患者絕經(jīng)年限均在2年以上。獲倫理討論小組批準(zhǔn),征得患者及家屬同意并簽字后,術(shù)中取陰道穹窿近12點(diǎn)方向的陰道前壁全層組織,約1.0cm×1.0cm大小。2方法采用HE染色法觀察陰道前壁的組織形態(tài)學(xué)特點(diǎn);免疫組織化學(xué)染色法(SP法)檢測(cè)NF、NCAM-180的表達(dá)情況,蛋白質(zhì)免疫印跡法(western blot WB)從分子水平檢測(cè)NCAM-180的表達(dá)水平。3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析利用SPSS17.0軟件做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料采用c±s的形式表示。各組間比較采用兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn),Pearson或者Spearman相關(guān)分析NF、NCAM-180和各參數(shù)間的依存關(guān)系以及二者的相關(guān)關(guān)系。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。結(jié)果1各組HE染色,陰道壁病理組織形態(tài)學(xué)特征HE染色鏡下(×400)顯示對(duì)照組:神經(jīng)纖維束的直徑粗大;微血管的形態(tài)正常、結(jié)構(gòu)完整;平滑肌束的直徑粗大且排列整齊;膠原纖維整齊排列。POP組:固有層的結(jié)構(gòu)疏松紊亂;神經(jīng)纖維束萎縮、直徑變細(xì);微血管的管壁變薄且數(shù)量減少;結(jié)締組織、平滑肌束斷裂、細(xì)碎。2免疫組化染色結(jié)果在陰道前壁組織中NF、NCAM-180的陽性表達(dá)呈黃色或棕黃色;采用Leica Owin系統(tǒng)測(cè)定NF、NCAM-180灰度值,免疫組化染色的強(qiáng)弱與灰度值呈正比關(guān)系,陽性物質(zhì)的表達(dá)愈高,染色愈深,灰度值愈大;反之愈小。1)NF在絕經(jīng)前POP組與對(duì)照組、絕經(jīng)后POP與對(duì)照組患者陰道前壁組織表達(dá)的灰度值分別為(107.94±7.58)、(167.25±8.11)、(89.83±3.16)、(142.9±4.90),各對(duì)應(yīng)POP組顯著低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-16.90,p=0.001;t=-28.81,p=0.001)。2)NCAM-180在絕經(jīng)前POP組與對(duì)照組、絕經(jīng)后POP與對(duì)照組患者陰道前壁組織表達(dá)的灰度值分別為(186.08.±14.71)、(86.78±17.29)、(141.00±12.36)、(59.91±10.13),各對(duì)應(yīng)POP組顯著高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=13.83,p=0.001;t=16.05,p=0.001)。3)NF、NCAM-180的表達(dá)與各參數(shù)的關(guān)聯(lián)分析NF的表達(dá)與年齡,絕經(jīng)狀態(tài)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.353,p=0.025;r=-0.429,p=0.006);NCAM-180的表達(dá)與年齡,絕經(jīng)狀態(tài)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.365,p=0.021;r=-0.403,p=0.010)。4)NCAM-180與NF間的關(guān)聯(lián)分析NCAM-180與NF二者的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.718,p=0.001)。3 Western blot結(jié)果采用Bandscan5.0軟件做灰度分析,GAPDH作為內(nèi)參照,分別檢測(cè)NCAM-180及GAPDH的平均積分光密度,NCAM-180/GAPDH的比值代表其表達(dá)的相對(duì)水平。與對(duì)照組比較,絕經(jīng)前POP組NCAM-180的表達(dá)水平增加38.71%(P0.01);絕經(jīng)后POP組的表達(dá)水平增加91.67%(P0.01)結(jié)論P(yáng)OP組患者陰道壁中NCAM-180的高表達(dá),NF的低表達(dá),提示神經(jīng)的損傷及修復(fù)障礙可能參與了POP的發(fā)生。NF、NCAM-180的表達(dá)與年齡、絕經(jīng)狀態(tài)呈負(fù)相關(guān),對(duì)于老年P(guān)OP患者,低雌激素水平與神經(jīng)損傷對(duì)POP的影響,有待于進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：盆腔器官脫垂 神經(jīng)絲蛋白 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子-180亞型
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R711.2
【目錄】：

• 摘要4-8
• Abstract8-14
• 中英文名詞對(duì)照14-15
• 1 引言15-19
• 2 材料與方法19-27
• 3 結(jié)果27-30
• 4 討論30-39
• 5 結(jié)論39-40
• 附圖40-42
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 綜述 女性盆底功能障礙性疾病的神經(jīng)損傷機(jī)制研究進(jìn)展46-61
• 參考文獻(xiàn)58-61
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷及在學(xué)校期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文61-62
• 致謝62

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本文編號(hào)：969059