發(fā)布時間：2017-09-26 17:03

  本文關鍵詞：NHEJ信號通路關鍵基因與宮頸鱗癌同步放化療敏感性的關系

  更多相關文章： 宮頸鱗癌 同步放化療 NHEJ信號通路 實時熒光定量PCR

【摘要】：宮頸鱗癌是宮頸癌的一種主要類型,嚴重威脅著女性的身體健康。目前,放療與以順鉑為基礎的化學藥物相結合的治療方式,已成為臨床上治療中晚期宮頸癌的標準方法,通常稱之為同步放化療(concurrent chemoradiotherapy, CCRT)。相對于傳統(tǒng)的單獨放療及其他治療手段,接受CCRT的患者群體擁有更長的生存期和更為輕微的毒副作用。然而,仍有一部分患者無法從中受益。發(fā)現(xiàn)預測宮頸鱗癌放化療敏感性的分子標志物對臨床治療具有重要意義。CCRT直接或間接作用于DNA或DNA代謝過程,誘發(fā)DNA雙鏈斷裂(DNA double strand break, DSB),以達到殺死腫瘤細胞的效果。而細胞主要通過NHEJ信號通路來修復DSB,因此腫瘤細胞NHEJ修復能力與放療或化療敏感性密切相關。大量研究表明,NHEJ信號通路中XRCC4、XRCC5、XRCC6、LIG4、PRKDC及DCLRE1CmRNA表達及單核苷酸多態(tài)性(Single Nucleotide Polymorphisms, SNP)影響細胞對放／化療的敏感性。本文以42例宮頸鱗癌活檢樣本為研究對象,首先利用real time-PCR技術分析NHEJ信號通路6個關鍵基因(XRCC4、XRCC5、XRCC6、LIG4、PRKDC及DCLREIC) mRNA表達水平,然后將檢測結果與患者對CCRT敏感性進行關聯(lián)分析。結果表明,XRCC6 mRNA高表達患者應答率為47.6%,低表達患者應答率為90.5%(P=0.003)；其他5個關鍵基因的mRNA表達水平與患者的應答率無顯著性關聯(lián)。此外,我們進一步分析了XRCC6基因rs2267437多態(tài)性與CCRT敏感性的關系。結果顯示,該多態(tài)性與患者的應答率無關。XRCC6mRNA表達水平可作為預測宮頸鱗癌患者CCRT療效的分子標志物。
【關鍵詞】：宮頸鱗癌 同步放化療 NHEJ信號通路 實時熒光定量PCR
【學位授予單位】：西北大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-6
• 英文~.略語表6-10
• 前言10-11
• 第一章 緒論11-22
• 1.1 宮頸癌及其治療現(xiàn)狀11-12
• 1.1.1 宮頸癌11
• 1.1.2 宮頸癌治療現(xiàn)狀11-12
• 1.2 NHEJ信號通路及同步放化療12-17
• 1.2.1 DNA損傷12-14
• 1.2.2 HEJ信號通路14-15
• 1.2.3 NHEJ信號通路關鍵基因mRNA表達與放療或化療的關系15-16
• 1.2.4 NHEJ信號通路關鍵基因多態(tài)性與放療或化療的關系16-17
• 1.3 常見基因mRNA表達及SNP的檢測方法17-20
• 1.3.1 常見的基因mRNA表達檢測方法17-19
• 1.3.2 常見SNP的檢測方法19-20
• 1.4 立題背景及意義20-22
• 第二章 宮頸鱗癌樣本臨床信息22-24
• 2.1 病例基礎信息22
• 2.2 病例入選標準22
• 2.3 治療標準22
• 2.4 臨床療效評價標準22-23
• 2.5 小結23-24
• 第三章 Real Time-PCR技術檢測NHEJ信號通路關鍵基因mRNA表達反應體系的建立及樣本檢測24-37
• 3.1 實驗原理24-25
• 3.2 實驗材料與儀器25-26
• 3.2.1 材料25
• 3.2.2 試劑25
• 3.2.3 儀器25
• 3.2.4 溶液配制25-26
• 3.3 實驗過程26-31
• 3.3.1 引物與探針的設計26-28
• 3.3.2 RNA提取28-29
• 3.3.3 Real time-PCR最終實驗體系及條件29-31
• 3.3.4 檢測引物及探針的擴增效率31
• 3.3.5 檢測SCC樣本中NHEJ信號通路關鍵基因mRNA表達31
• 3.4 實驗結果31-35
• 3.4.1 SCC樣本RNA檢測結果31-32
• 3.4.2 引物及探針的擴增效率32-34
• 3.4.3 SCC樣本中NHEJ信號通路關鍵基因mRNA表達結果34-35
• 3.5 小結35-37
• 第四章 焦磷酸測序技術檢測XRCC6 rs2267437多態(tài)性反應體系的建立及樣本檢測37-45
• 4.1 實驗原理37-38
• 4.2 實驗材料與儀器38-39
• 4.2.1 材料38
• 4.2.2 試劑38
• 4.2.3 儀器38-39
• 4.2.4 溶液配制39
• 4.3 實驗過程39-42
• 4.3.1 引物的設計39
• 4.3.2 樣本DNA提取39-40
• 4.3.3 焦磷酸測序最終實驗體系及條件40-41
• 4.3.4 SCC樣本中rs2267437多態(tài)性檢測41-42
• 4.4 實驗結果與分析42-44
• 4.4.1 PCR擴增產物電泳圖42
• 4.4.2 焦磷酸測序結果42-43
• 4.4.3 SCC樣本中rs2267437多態(tài)性檢測結果43-44
• 4.5 小結44-45
• 第五章 宮頸鱗癌同步放化療敏感性預測分子的鑒定45-50
• 5.1 NHEJ信號通路關鍵基因mRNA表達與SCC患者CCRT敏感性的關系45-48
• 5.1.1 NHEJ信號通路關鍵基因mRNA表達與患者臨床信息之間的關系45-46
• 5.1.2 DNA-PK復合物中基因mRNA表達相關性分析46
• 5.1.3 NHEJ信號通路關鍵基因mRNA表達與SCC患者CCRT敏感性的關系.46-47
• 5.1.4 SCC患者CCRT敏感性多因素Logistic回歸分析47-48
• 5.2 Rs2267437與SCC患者CCRT敏感性的關系48
• 5.2.1 Rs2267437多態(tài)性與患者臨床信息之間的關系48
• 5.2.2 Rs2267437多態(tài)性與SCC患者CCRT敏感性的關系48
• 5.3 XRCC6基因mRNA表達水平與rs2267437多態(tài)性的關系48-49
• 5.4 小結49-50
• 全文小結50-51
• 參考文獻51-59
• 攻讀碩士學位期間參加的主要科研項目59-60
• 致謝60

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前2條

1 陳旭;齊鳳坤;康立功;李景富;;實時熒光定量PCR技術研究進展及其應用[J];東北農業(yè)大學學報;2010年08期

2 唐永凱;賈永義;;熒光定量PCR數(shù)據處理方法的探討[J];生物技術;2008年03期

，

本文編號：924667