發(fā)布時(shí)間：2017-09-21 15:03

  本文關(guān)鍵詞：Dyrk1B在卵巢癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及意義

  更多相關(guān)文章： 卵巢癌 Dyrk1B 細(xì)胞凋亡 免疫組化 蛋白印跡法

【摘要】：目的:檢測(cè)Dyrk1B在卵巢癌組織和細(xì)胞系中的表達(dá),并使用Dyrk1B抑制劑AZ191干預(yù)卵巢癌細(xì)胞,觀察其對(duì)卵巢癌細(xì)胞的增殖、凋亡及Dyrk1B蛋白表達(dá)的影響,以探討Dyrk1B在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及意義。方法:(1)蛋白印跡法檢測(cè)多種卵巢癌細(xì)胞中Dyrk1B蛋白的表達(dá),并檢測(cè)Dyrk1B抑制劑AZ191對(duì)卵巢癌細(xì)胞Dyrk1B蛋白表達(dá)的影響;(2)MTT比色法檢測(cè)AZ191對(duì)OV2008、C13、A2780S和A2780CP細(xì)胞增殖活性的影響;(2)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)AZ191對(duì)OV2008、C13、A2780S和A2780CP細(xì)胞凋亡的影響;(4)免疫組化法檢測(cè)Dyrk1B蛋白在卵巢癌組織中的表達(dá)。結(jié)果:(1)卵巢癌細(xì)胞Dyrk1B蛋白表達(dá):A2780S、A2780CP、OV2008、C13、SKOV3、OVCAR3、OVCAR4、OVCAR5和OVCAR8細(xì)胞中普遍表達(dá)Dyrk1B蛋白,加入Dyrk1B抑制劑AZ191后,OV2008、A2780CP細(xì)胞Dyrk1B蛋白表達(dá)水平均明顯降低;(2)AZ191作用卵巢癌細(xì)胞后生長(zhǎng)抑制率的比較:MTT比色法檢測(cè)顯示,不同濃度(1、5、10、25μM)Dyrk1B抑制劑AZ191干預(yù)OV2008、C13、A2780S和A2780CP細(xì)胞48h后,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率隨著抑制劑濃度增加而增大,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(3)AZ191作用卵巢癌細(xì)胞后細(xì)胞凋亡率的變化:5μM、10μM AZ191干預(yù)OV2008、C13、A2780S和A2780CP細(xì)胞,四種細(xì)胞凋亡倍數(shù)(實(shí)驗(yàn)組凋亡率/對(duì)照組凋亡率)均隨抑制劑濃度的增加而增高;(4)免疫組化檢測(cè)Dyrk1B在119例卵巢癌臨床標(biāo)本中的表達(dá),包括漿液性癌77例、粘液性癌17例、子宮內(nèi)膜樣癌15例、透明細(xì)胞癌10例,并以19例正常卵巢組織作為對(duì)照,結(jié)果發(fā)現(xiàn)Dyrk1B在卵巢癌組織中呈高表達(dá),表達(dá)率為90.8%(108/119),而在正常卵巢組織中Dyrk1B的表達(dá)率僅為15.7%(3/19),二者相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000);卵巢癌組織中Dyrk1B的表達(dá)與手術(shù)病理分期、病理分化程度無(wú)明顯相關(guān)(P均0.05)。結(jié)論:Dyrk1B在卵巢癌組織和細(xì)胞中均有表達(dá),Dyrk1B抑制劑AZ191對(duì)各種人卵巢癌細(xì)胞株(OV2008、C13、A2780S和A2780CP)的增殖均有明顯抑制作用,AZ191在下調(diào)卵巢癌細(xì)胞Dyrk1B蛋白表達(dá)同時(shí)誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡。研究結(jié)果提示Dyrk1B可能在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用,臨床上可能成為卵巢癌分子靶向治療的新靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：卵巢癌 Dyrk1B 細(xì)胞凋亡 免疫組化 蛋白印跡法
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.31
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• （一）前言11-12
• （二）材料和方法12-21
• 一、實(shí)驗(yàn)材料12-14
• 1．細(xì)胞來(lái)源12
• 2．組織標(biāo)本來(lái)源12-13
• 3．主要試劑及來(lái)源13
• 4．主要儀器設(shè)備及來(lái)源13-14
• 5．主要試劑的配置14
• 二、方法14-20
• 1．細(xì)胞培養(yǎng)14-15
• 2．蛋白印跡法檢測(cè)卵巢癌細(xì)胞Dyrk1B蛋白的表達(dá)15-18
• 3． MTT法檢測(cè)卵巢癌細(xì)胞的活力18-19
• 4．流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)分析細(xì)胞凋亡19
• 5．免疫組化法檢測(cè)Dyrk1B的表達(dá)19-20
• 三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理20-21
• （三）結(jié)果21-27
• 1．蛋白印跡法檢測(cè)卵巢癌細(xì)胞中Dyrk1B蛋白表達(dá)及AZ191對(duì)卵巢癌細(xì)胞中Dyrk1B蛋白表達(dá)的影響21
• 2．MTT法檢測(cè)AZ191對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖的影響21-23
• 3．流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)分析AZ191對(duì)卵巢癌細(xì)胞凋亡影響23-24
• 4．免疫組化法檢測(cè)Dyrk1B在卵巢癌組織中的表達(dá)差異24-27
• （四）討論27-29
• 1．Dyrk1B在卵巢癌中的表達(dá)27-28
• 2．Dyrk1B抑制細(xì)胞凋亡的作用28
• 3．Dyrk1B在卵巢癌組織中的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系28-29
• 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-32
• 綜述32-39
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 致謝39-40

【相似文獻(xiàn)】

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