本文關(guān)鍵詞：p110δ在胎盤形成中的表達(dá)和功能作用的初步研究

  更多相關(guān)文章： p110δ 滋養(yǎng)層巨細(xì)胞 胎盤 流產(chǎn)

【摘要】：背景和目的:生命繁衍是人類社會持續(xù)發(fā)展的基礎(chǔ)。但是隨著人類文明的不斷發(fā)展,由于工作壓力、環(huán)境污染等來自各方各面的外部因素導(dǎo)致世界范圍內(nèi)不孕不育人口顯著增加,人類的繁衍能力已亮起了警報(bào)燈。生殖健康問題日漸引起人們的高度緊張與重視。不孕不育的發(fā)生病例中有近一半為病因不明的重復(fù)性流產(chǎn),生殖免疫學(xué)觀點(diǎn)認(rèn)為這與免疫因素有關(guān)。磷脂酰肌醇3-激酶/絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶信號通路是具有酶活性的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,可從增殖、凋亡、分化、炎性反應(yīng)、免疫等多方面影響機(jī)體功能。磷脂酰肌醇3-激酶共有四個p110催化亞基:α,β,δ,γ,其中p110α或p110β的缺失將導(dǎo)致胚胎致死,原因與胚胎血管生成相關(guān)。p110δ主要高表達(dá)于白細(xì)胞表面,這對研究其在生殖免疫過程中的作用十分有利。本課題預(yù)探索p110δ與在生殖中發(fā)揮的作用。方法和結(jié)果:首先利用p110δ突變失活小鼠模型(p110δD910A/D910A)進(jìn)行配種繁殖,觀察小鼠生殖發(fā)育情況,發(fā)現(xiàn)小鼠存在產(chǎn)崽數(shù)減少情況,且這種生育異�，F(xiàn)象主要與雌性小鼠的p110δ基因型相關(guān)。進(jìn)一步地取材觀察后發(fā)現(xiàn),p110δ突變失活引發(fā)的產(chǎn)崽數(shù)減少主要是因?yàn)榕咛ト焉镏衅?即胎盤生成后的胚胎流產(chǎn)所造成。隨后,通過對生殖系統(tǒng)相關(guān)器官的組織學(xué)觀察及病理技術(shù)染色發(fā)現(xiàn),p110δ突變失活對蛻膜組織、胎膜及胎盤的血管系統(tǒng)構(gòu)成具有一定影響,主要表現(xiàn)為組織中血管稀疏、不連續(xù),血管網(wǎng)絡(luò)形成受限;此外,p110δ特異性地高表達(dá)于蛻膜時期的壁滋養(yǎng)層巨細(xì)胞(包括初級和次級的),缺失p110δ及其下游通路的激活,干擾了正常的滋養(yǎng)層細(xì)胞的功能活化,包括增殖、分化及與侵潤能力相關(guān)的MMPs的分泌情況。最后,通過PCR技術(shù)就上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,對血管生成和滋養(yǎng)層細(xì)胞功能相關(guān)的基因的核酸轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行了進(jìn)一步的驗(yàn)證。結(jié)論:p110δ突變失活導(dǎo)致妊娠期的血管生成系統(tǒng)及滋養(yǎng)層細(xì)胞功能異常,進(jìn)而促使胎兒于妊娠中期,即胎盤生成時期,流產(chǎn)死亡。
【關(guān)鍵詞】：p110δ 滋養(yǎng)層巨細(xì)胞 胎盤 流產(chǎn)
【學(xué)位授予單位】：廣東藥學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R711.6
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 序言10-17
• 課題的研究思路17-18
• 材料與方法18-32
• 1. 材料18-22
• 1.1 常規(guī)試劑配制：18-20
• 1.2 其他試劑信息列表20-21
• 1.3 抗體信息列表21-22
• 1.4 主要儀器信息列表22
• 2. 方法22-32
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)與管理22-26
• 2.2 動物標(biāo)本取材26-28
• 2.3 動情周期的檢測方法28
• 2.4 組織包埋與切片28-29
• 2.5 HE染色步驟29
• 2.6 天狼星紅染色法29
• 2.7 免疫組化（IHC）步驟29-30
• 2.8 免疫熒光步驟（石蠟切片）30
• 2.9 總RNA抽提與PCR30-32
• 2.10 EPC體外培養(yǎng)步驟32
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-49
• 1. PI3K-p110δ突變失活對C57BL/6J小鼠的體癥體態(tài)的觀察32-33
• 2. PI3K-p110δ突變失活對C57BL/6J小鼠的生殖發(fā)育能力的影響24 3. PI3K-p110δ 在卵巢、子宮、胎盤中的表達(dá)情況33-35
• 4. PI3K-p110δ突變失活對雌性C57BL/6J小鼠的生殖系統(tǒng)的影響26 5. PI3K-p110δ突變失活對胚胎生長發(fā)育過程中產(chǎn)生的影響35-38
• 5. PI3K-p110δ突變失活對胚胎生長發(fā)育過程中產(chǎn)生的影響38-44
• 6. PI3K-p110δ特異性地表達(dá)于蛻膜時期的滋養(yǎng)層巨細(xì)胞44-46
• 7. PI3K-p110δ突變失活影響胚胎發(fā)育的細(xì)胞增殖和分化46-48
• 8. PI3K-p110δ突變失活影響胚胎發(fā)育過程中MMPs的表達(dá)48-49
• 小結(jié)49-51
• 討論51-58
• 參考文獻(xiàn)58-65
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文及其他科研成果65-66
• 附件66-74
• 附錄 英文縮略詞匯74-75
• 致謝75

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 徐宏;鄒琳;張保平;彭婧;張莉;況海斌;;小鼠外胎盤錐次級滋養(yǎng)層巨細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定[J];激光生物學(xué)報(bào);2010年02期

2 李靖;李炫誠;吳云霞;;確定小鼠動情周期的三種方法[J];實(shí)驗(yàn)動物科學(xué);2007年03期

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本文編號：883896