發(fā)布時(shí)間：2017-09-16 02:03

  本文關(guān)鍵詞：小鼠非同步移植子宮內(nèi)膜HOXA10表達(dá)變化研究

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【摘要】：背景快速發(fā)展的輔助生殖技術(shù)克服了許多不孕因素,但是種植失敗導(dǎo)致體外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠成功率仍然較低,約2/3的妊娠失敗被認(rèn)為與非同步移植有關(guān)。雖然還未有確切證據(jù)證明人類(lèi)IVF-ET過(guò)程中非同步移植會(huì)增加后代畸形率,但動(dòng)物試驗(yàn)表明非同步移植會(huì)對(duì)妊娠造成包括種植失敗、流產(chǎn)、胚胎發(fā)育進(jìn)程異常甚至畸形等不良影響。因此明確非同步移植對(duì)妊娠影響的相關(guān)機(jī)制對(duì)于改善IVF-ET結(jié)局具有重要意義。為了探討非同步移植對(duì)子宮內(nèi)膜容受性的影響機(jī)制,需要一些標(biāo)志物來(lái)衡量。同源框基因A10(HOXA10)是子宮內(nèi)膜容受性標(biāo)志分子之一。整合素β3(ITGp3)是HOXA10的下游靶基因,胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1(IGFBP-1)是蛻膜化標(biāo)記分子。因此可以通過(guò)檢測(cè)這三種因子的表達(dá)水平來(lái)探討非同步移植改變子宮內(nèi)膜容受性的機(jī)制。目的探討非同步移植是否通過(guò)改變HOXA10等子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)而改變了子宮內(nèi)膜容受性。驗(yàn)證非同步移植誘導(dǎo)的種植窗適應(yīng)性調(diào)節(jié)是一種病理性異常改變。方法選擇6-8周健康ICR小鼠,通過(guò)藥物促排卵后自然交配妊娠構(gòu)建超數(shù)排卵妊娠小鼠模型、結(jié)扎雄鼠構(gòu)建不育雄鼠模型、性成熟的雌鼠交配不育雄鼠構(gòu)建假孕鼠模型。收集超促排卵妊娠小鼠孕2天位于輸卵管內(nèi)的胚胎,將2-細(xì)胞胚胎隨機(jī)平均分成兩部分,一份冷凍備存；另一部分繼續(xù)培養(yǎng)至孕3天胚胎冷凍備存。選擇假孕3天小鼠,復(fù)蘇孕2天、孕3天小鼠胚胎,將復(fù)蘇不同時(shí)期胚胎分別對(duì)假孕小鼠行左右輸卵管移植,形成同步移植和非同步移植自身對(duì)照。于孕5天剖取小鼠子宮內(nèi)膜組織。通過(guò)芝加哥藍(lán)染色來(lái)判斷胚胎種植情況,HE染色光鏡下觀察內(nèi)膜組織病理變化,RT-PCR檢測(cè)Hoxa10, Itgβ3, Igfbp-1 mRNA表達(dá)情況,Westernblot技術(shù)檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)情況。結(jié)果(1)非同步移植側(cè)內(nèi)膜著床位點(diǎn)數(shù)少于同步移植側(cè)內(nèi)膜,非同步移植顯著降低小鼠胚胎種植率(P=0.002)；(2)光鏡下觀察非同步移植與同步移植相比,可見(jiàn)內(nèi)膜分泌反應(yīng)整體不良,發(fā)育較滯后；(3)非同步移植子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)基因Hoxa10(P0.05),Itgβ3(P0.05),Igfbp-1(P0.01)mRNA表達(dá)較同步移植降低；(4)非同步移植子宮內(nèi)膜容受性相關(guān)基因HOXA10(P0.05),ITGβ3(P0.05) IGFBP-1(P0.05)蛋白表達(dá)較同步移植降低。結(jié)論 以上結(jié)果提示非同步移植可能通過(guò)降低Hoxa10, Itgβ3, Igfbp1表達(dá),降低子宮內(nèi)膜容受性,并引起胚胎種植率下降。
【關(guān)鍵詞】：HOXA10 非同步移植 子宮內(nèi)膜容受性
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R714.8
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-21
• 結(jié)果21-28
• 討論28-34
• 結(jié)論34
• 參考文獻(xiàn)34-40
• 附錄40-41
• 致謝41
• 綜述41-51
• 參考文獻(xiàn)46-51

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本文編號(hào)：860211