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GPR30對人類絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲性影響及其與子癇前期發(fā)病關(guān)系的機(jī)制研究

發(fā)布時間:2017-09-14 18:24

  本文關(guān)鍵詞:GPR30對人類絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲性影響及其與子癇前期發(fā)病關(guān)系的機(jī)制研究


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【摘要】:目的:探討GPR30在人類胎盤中的表達(dá),研究其對人類絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲性的影響,及其與子癇前期發(fā)病的關(guān)系。方法:應(yīng)用免疫組化檢測早孕期絨毛、正常產(chǎn)婦胎盤和重度子癇前期患者胎盤組織中GPR30的表達(dá)。以常氧和缺氧復(fù)氧環(huán)境分別模擬正常和子癇妊娠狀態(tài),用17-p-雌二醇(17β-E2)、GPR30激動劑G1和阻滯劑G15預(yù)處理體外培養(yǎng)絨毛組織和人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞株HTR8/SVneo。顯微鏡下觀察體外絨毛組織滋養(yǎng)細(xì)胞生長侵襲范圍,Transwell侵襲實驗檢測HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲能力。免疫熒光法檢測絨毛組織和HTR8/SVneo細(xì)胞中GPR30蛋白表達(dá)情況。Western blot法檢測HTR8/SVneo細(xì)胞中GPR30和MMP-9蛋白表達(dá)。RT-PCR技術(shù)檢測細(xì)胞中GPR30、MMP9及MMP2mRNA。結(jié)果:(1)GPR30在早期絨毛組織和正常末期胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞上都有表達(dá),且早孕期的表達(dá)水平高于正常末期胎盤,但在重度子癇前期胎盤上GPR30蛋白表達(dá)明顯減少;(2)E2及GPR30激動劑G1可增加滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力,阻滯劑G15則可下調(diào)其侵襲性,H/R嚴(yán)重?fù)p害滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力;(3)E2、G1可誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞GPR30蛋白表達(dá)上調(diào),而G15則下調(diào)其表達(dá)。H/R使GPR30蛋白明顯下調(diào)。(4)GPR30蛋白水平與侵襲相關(guān)蛋白MMP-9表達(dá)水平有相關(guān)性。(5)各實驗組之間在GPR30、MMP9和MMP2的mRNA表達(dá)水平上未見明顯差異。結(jié)論:GPR30參與人類滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲力的調(diào)節(jié),對滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲力有正性促進(jìn)作用。GPR30表達(dá)的紊亂可能與子癇前期發(fā)病有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:GPR30 滋養(yǎng)細(xì)胞 侵襲性 子癇前期
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R714.245
【目錄】:
  • 符號說明5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10
  • 1 標(biāo)本、試劑、儀器10-13
  • 2 主要實驗步驟與方法13-18
  • 3 實驗結(jié)果18-22
  • 4 討論22-24
  • 5 結(jié)論24-25
  • 參考文獻(xiàn)25-29
  • 附圖29-39
  • 文獻(xiàn)綜述:雌激素相關(guān)腫瘤中的GPR3039-48
  • 參考文獻(xiàn)44-48
  • 致謝48-49
  • 攻讀碩士期間發(fā)表的論文目錄49

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本文編號:851595

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