自噬在熊果酸抑制人宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖中的作用
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【摘要】:[目的]分析自噬在熊果酸抑制人宮頸癌He La細(xì)胞增殖中的作用。[方法]體外培養(yǎng)人宮頸癌He La細(xì)胞,不同濃度(5、10、20μmol/L)的熊果酸處理48h后,采用MTT法檢測(cè)He La細(xì)胞增殖抑制率的變化;透射電鏡觀察細(xì)胞自噬超微結(jié)構(gòu)的改變;Western blotting檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白p62及Beclin-1的表達(dá)情況;微管相關(guān)蛋白1輕鏈3A/B(microtubule-associated protein 1 light chain 3 A/B,LC3A/B)免疫熒光檢測(cè)熊果酸對(duì)He La細(xì)胞自噬水平的影響;檢測(cè)自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑制自噬前后對(duì)熊果酸增殖抑制作用的影響。[結(jié)果]不同濃度(5、10、20μmol/L)的熊果酸處理組對(duì)He La細(xì)胞的抑制率分別為20.1%±1.3%、35.6%±2.6%和49.0%±1.0%,熊果酸可抑制He La細(xì)胞增殖并呈劑量依賴性(F=446.177,P0.001);熊果酸能誘導(dǎo)He La細(xì)胞發(fā)生自噬:透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)經(jīng)熊果酸處理后He La細(xì)胞中自噬囊泡明顯增加;Western blotting分析表明熊果酸可呈劑量依賴性增加Beclin-1的表達(dá),降低p62的表達(dá);免疫熒光檢測(cè)顯示熊果酸處理后,He La細(xì)胞的熒光強(qiáng)度與對(duì)照組相比明顯增強(qiáng);3-MA與熊果酸聯(lián)合作用于He La細(xì)胞時(shí)可抑制細(xì)胞增殖。[結(jié)論]熊果酸抑制He La細(xì)胞增殖,并誘導(dǎo)其發(fā)生自噬,自噬抑制劑3-MA能夠增強(qiáng)熊果酸對(duì)He La細(xì)胞的增殖抑制作用。
【作者單位】: 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院;哈爾濱醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所;哈爾濱紅十字中心醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 熊果酸 自噬 宮頸癌 p Beclin- -MA
【基金】:黑龍江省自然科學(xué)基金(D201136) 黑龍江省博士后科學(xué)研究基金(LBH-Z06252)
【分類號(hào)】:R737.33
【正文快照】: 宮頸癌是婦科最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,持續(xù)感染高危型人乳頭瘤病毒(HPV)是宮頸癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的明確病理因素。宮頸癌是少數(shù)能早期預(yù)防、早期診斷和治療的惡性腫瘤之一,隨著宮頸癌篩查技術(shù)的開(kāi)展,大量癌前病變、早期宮頸癌和年輕宮頸癌都被早期診斷和治療[1]。但近年來(lái),宮頸癌
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,本文編號(hào):833552
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