發(fā)布時(shí)間：2017-09-07 22:56

  本文關(guān)鍵詞：PDIA3在胎膜早破患者胎盤及胎膜組織中的表達(dá)及意義

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【摘要】：胎膜早破(premature rupture of membrane,PROM)指孕婦胎膜于臨產(chǎn)前發(fā)生自發(fā)性破裂,目前可以據(jù)破膜發(fā)生時(shí)的孕周將胎膜早破分為足月胎膜早破(term premature rupture of membrane,TPROM)和未足月胎膜早破(preterm premature rupture of membrane,PPROM)。PROM約占妊娠的10%,80%~90%的PROM在24h內(nèi)自然臨產(chǎn),90%的PPROM在7天內(nèi)臨產(chǎn)[1]。PROM可致早產(chǎn)率升高,宮內(nèi)感染率升高,圍生兒病死率增加,產(chǎn)褥感染率升高[2],是圍生期最常見的并發(fā)癥[3]。PROM的病因有許多,但是其基本的病理變化是炎癥、應(yīng)激反應(yīng)以及細(xì)胞凋亡等,胎盤胎膜處的這些反應(yīng)不僅可以弱化胎膜結(jié)構(gòu),也可激活孕婦的免疫系統(tǒng),引起胎膜破裂。本課題組前期已完成對(duì)PPROM和正常足月妊娠患者胎盤組織總蛋白質(zhì)的分離,并用MALDI-TOF/TOF-MS鑒定出16個(gè)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)[4],我們選擇其中的蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(protein disulfide isomerase,PDI)作為研究對(duì)象,PDI是一種主要位于哺乳動(dòng)物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的巰基-二硫鍵氧化還原酶,屬折疊酶[5]。這種蛋白在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、鈣穩(wěn)態(tài)、蛋白質(zhì)降解途徑、抗原呈遞、病毒入侵、精子卵子融合、免疫和損傷應(yīng)激、信號(hào)調(diào)控、癌變等方面起重要作用[6]。PDIA3又稱ERp57,是該家族中巰基蛋白氧化還原酶的重要組分,屬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號(hào)通道蛋白,能催化形成二硫鍵,具有分子伴侶活性。本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)PDIA3在胎膜早破患者胎盤以及胎膜組織中的表達(dá),探討其在胎膜早破發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮的作用,可能為預(yù)防及檢測(cè)PROM的發(fā)病提供新的方向。目的本課題通過研究pdia3mrna及其蛋白在pprom組,tprom組,正常足月妊娠組和早產(chǎn)組胎盤胎膜組織中的表達(dá)與定位,探討pdia3在胎膜早破發(fā)生、發(fā)展過程中的作用機(jī)制。材料和方法1.研究對(duì)象收取2013年9月至2014年9月,至河南省婦幼保健院經(jīng)剖宮產(chǎn)分娩的tprom患者、pprom患者各30例作為實(shí)驗(yàn)組。同時(shí)隨機(jī)抽取同時(shí)期入院經(jīng)剖宮產(chǎn)分娩的正常足月產(chǎn)、因計(jì)劃外妊娠行中孕引產(chǎn)者各30例作為對(duì)照組。2.方法(1)運(yùn)用免疫組織化學(xué)sp法對(duì)以上各組胎盤和胎膜組織中的pdia3蛋白的表達(dá)進(jìn)行定位和半定量檢測(cè)。(2)運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量pcr(rt-pcr)法對(duì)以上各組胎盤和胎膜組織中的pdia3mrna的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均采用spss20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。記量資料用sx±表示,兩組組間符合正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),不符合正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)采用mannwhitneyu檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用率表示,兩組間比較采用卡方檢驗(yàn)。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。結(jié)果1.實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組患者一般臨床情況的數(shù)據(jù)比較tprom組、pprom組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組產(chǎn)婦平均年齡分別為27.1士3.7歲、27.0士4.4歲、26.3士2.9歲、26.6士4.1歲。孕周分別為38.6±1.9周、30.2±1.3周、29.5±1.7周、38.9±1.4周。四組孕婦年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);正常足月妊娠組與tprom組孕周比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);早產(chǎn)組與pprom組孕周比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。2.實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組胎盤組織中pdia3蛋白的定位和表達(dá)在胎盤組織中,pdia3蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì),經(jīng)sp染色呈黃色顆粒狀,pdia3蛋白在tprom組、pprom組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組胎盤組織中的陽性率分別為93.33%、90.00%、43.33%、60.00%,tprom組與正常足月妊娠組相比,pdia3蛋白的表達(dá)量明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);pprom組與早產(chǎn)組相比,pdia3蛋白的表達(dá)量明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。3.實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組胎膜組織中pdia3蛋白的定位和表達(dá)在胎膜組織中,pdia3蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì),少量位于細(xì)胞核和細(xì)胞膜,經(jīng)sp染色呈黃色顆粒狀,pdia3蛋白在tprom組、pprom組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組胎膜組織中的陽性率分別為86.67%、83.33%、46.67%、50.00%,tprom組與正常足月妊娠組相比,pdia3蛋白的表達(dá)量明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);pprom組與早產(chǎn)組相比,pdia3蛋白的表達(dá)量明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。4.實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組胎盤組織中pdia3mrna的表達(dá)在胎盤組織中,pdia3mrna在tprom組、pprom組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組中的相對(duì)表達(dá)量分別是:2.025±0.180、2.012±0.188、0.995±0.278、0.958±0.418。tprom組與正常足月妊娠組相比,pdia3mrna的表達(dá)量明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);pprom組與早產(chǎn)組相比,pdia3mrna的表達(dá)量明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。5.實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組胎膜組織中pdia3mrna的表達(dá)在胎膜組織中,pdia3mrna在tprom組、pprom組、早產(chǎn)組、正常足月妊娠組中的相對(duì)表達(dá)量分別是:1.440±0.053、1.452±0.056、1.035±0.035、1.024±0.049。tprom組與正常足月妊娠組相比,pdia3mrna的表達(dá)量明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);pprom組與早產(chǎn)組相比,pdia3mrna的表達(dá)量明顯升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論P(yáng)DIA3蛋白和mRNA在胎膜早破患者胎盤以及胎膜組織中的表達(dá)量升高,PDIA3可能通過多種途徑參與胎膜早破的發(fā)生、發(fā)展,是胎膜早破的一種可能的生物標(biāo)記物。
【關(guān)鍵詞】：胎膜早破 胎盤組織 胎膜組織 PDIA3
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R714.433
【目錄】：

• 摘要4-8
• Abstract8-14
• 中英文縮略詞對(duì)照表14-15
• 1 引言15-17
• 2 材料和方法17-22
• 3 結(jié)果22-26
• 4 討論26-31
• 5 結(jié)論31-32
• 6 附圖32-35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 綜述部分 PDIA3蛋白的研究現(xiàn)狀38-49
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文49-50
• 致謝50

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