本文關鍵詞：子癇前期大鼠微循環(huán)改變及選擇素對其影響

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【摘要】：目的:子癇前期(Preeclampsia,PE)是一種妊娠期并發(fā)癥,其臨床特點主要是孕20周出現(xiàn)的高血壓和蛋白尿,或合并其他系統(tǒng)的病變,比如血小板減少、肝酶升高、腎功能不全、肺水腫、視覺障礙和腦功能紊亂。子癇前期是導致母嬰不良妊娠結局的主要原因,其發(fā)病率逐年增長。研究發(fā)現(xiàn)子癇前期與母嬰將來罹患心血管疾病和代謝性疾病有關。炎癥反應、內(nèi)皮細胞損傷和白細胞及血小板的活化可導致全身的微循環(huán)障礙,這是子癇前期的發(fā)病特點。選擇素介導炎癥時白細胞的早期黏附,包括P-選擇素(P-selectin)、E-選擇素(E-selectin)和L-選擇素(L-selectin)。本實驗通過腹腔注射NO合酶抑制劑左旋亞硝基精氨酸甲酯(Nitro-L-arginine methylester,L-NAME)的方法建立子癇前期大鼠模型,擬通過觀察腸系膜微循環(huán)和胎盤超微結構改變,測定選擇素在子癇前期孕鼠的表達情況,探討子癇前期大鼠微循環(huán)改變及選擇素對子癇前期微循環(huán)障礙的影響,為子癇前期的發(fā)病提供新的理論依據(jù)和診療思路。方法:1實驗動物購買10周齡的SD大鼠,雌雄各30只。按雌:雄比例為1:1合籠,觀察飼養(yǎng)籠內(nèi)是否有陰道栓脫落,若看到有陰道栓,則規(guī)定為孕第1天。2動物模型的建立及分組30只孕鼠中隨機選取20只孕鼠用來建立子癇前期孕鼠模型,孕7-11天連續(xù)腹腔注射L-NAME,模型成功13只,其中選取10只作為子癇前期組。剩余10只孕鼠作為對照組,孕7-11天連續(xù)腹腔注射等量的生理鹽水。孕第5、9和17天定時測量兩組孕鼠尾動脈收縮壓(Systolic blood pressure,SBP)和收集24h尿液。模型成功標準是收縮壓升高30mmHg以上。3標本采集和檢測指標孕19天,麻醉兩組孕鼠,待麻醉成功后,使用WX-9B型微循環(huán)顯微鏡觀察腸系膜微循環(huán),待觀察完畢后采血和胎盤組織。使用透射電鏡(transmissionelectronmicroscopy,tem)觀察胎盤的超微結構改變,主要是觀察合體滋養(yǎng)細胞的變化。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linkedimmunosorbentassay,elisa)測定血漿中可溶性p-選擇素(solublep-selectin,sp-selectin)、可溶性e-選擇素(solublee-selectin,se-selectin)和l-選擇素(solublel-selectin,sl-selectin)的含量,使用免疫組織化學技術(immunohistochemistry,ihc)觀察p-selectin和e-selectin在胎盤的表達情況,使用軟件圖像分析得出平均光密度值(meanopticaldensity,mod)。4統(tǒng)計方法采用spss13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,數(shù)據(jù)進行正態(tài)性檢驗和方差齊性分析后,對于符合正態(tài)性檢驗和方差齊的數(shù)據(jù)則使用兩獨立樣本的t檢驗,若數(shù)據(jù)符合正態(tài)性檢驗但方差不齊則使用兩獨立樣本的t'檢驗或非參數(shù)檢驗,若數(shù)據(jù)不符合正態(tài)性檢驗則采用兩獨立樣本的非參數(shù)檢驗。取α=0.05作為檢驗水準,p0.05為差異有統(tǒng)計學意義。結果:1收縮壓和24h尿蛋白濃度:子癇前期組與對照組比較,兩組大鼠孕5天的收縮壓和24h尿蛋白濃度無明顯差異(均p0.05);子癇前期組孕鼠孕9天、孕17天的收縮壓和24h尿蛋白濃度均高于對照組同日的收縮壓和24h尿蛋白濃度,差異有統(tǒng)計學意義(均p0.001)。2孕鼠活體腸系膜微循環(huán)1)對照組的腸系膜微血管壁整齊光滑,形態(tài)柔和,自然彎曲,血管周圍無滲出;子癇前期組的腸系膜微血管壁迂曲,邊緣不整齊,血管周圍有少量滲出。2)子癇前期組腸系膜微靜脈內(nèi)可見大量白細胞貼壁滾動,滾動速度緩慢,白細胞黏附于血管壁并聚集;對照組腸系膜微靜脈內(nèi)僅有白細胞貼壁快速滾動,無白細胞貼壁黏附和白細胞聚集。3)子癇前期組的毛細血管內(nèi)可見紅細胞聚集,而對照組無紅細胞聚集。3電鏡:對照組的胎盤合體滋養(yǎng)細胞內(nèi)含有豐富的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體,細胞質(zhì)內(nèi)含有少量脂滴(空泡狀變性);與對照組相比,子癇前期組的胎盤合體滋養(yǎng)細胞內(nèi)的線粒體腫脹,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張,細胞質(zhì)內(nèi)可見大量脂滴。4血漿選擇素:孕鼠血漿中的sP-selectin、sE-selectin和sL-selectin的濃度,子癇前期組均高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(均P0.001)。5 IHC:P-selectin和E-selectin在孕鼠胎盤中表達主要位于合體滋養(yǎng)細胞和血管內(nèi)皮細胞的細胞膜及細胞質(zhì)。P-selectin和E-selectin在子癇前期組的MOD均高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(均P0.001)。結論:1腹腔注射NO合酶抑制劑L-NAME的方法成功建立子癇前期大鼠模型。2子癇前期大鼠腸系膜微循環(huán)的變化,說明母體全身出現(xiàn)微循環(huán)障礙。3 sP-selectin、sE-selectin和s L-selectin在子癇前期大鼠血漿中的高表達,與腸系膜微循環(huán)改變可能有關,其可能通過參與白細胞活化、內(nèi)皮細胞功能紊亂、炎癥反應和血小板活化,導致子癇前期大鼠的機體微循環(huán)障礙。4子癇前期大鼠胎盤滋養(yǎng)細胞超微結構變化說明胎盤微循環(huán)障礙。5 P-selectin和E-selectin在子癇前期大鼠胎盤中的高表達,與胎盤滋養(yǎng)細胞超微結構改變可能有關,其可能參與胎盤血管內(nèi)皮細胞功能紊亂和血小板活化,影響胎盤局部微循環(huán)。
【關鍵詞】：子癇前期 微循環(huán) 選擇素 胎盤 大鼠
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R714.244
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-20
• 結果20-22
• 附圖22-28
• 附表28-29
• 討論29-38
• 結論38-39
• 參考文獻39-47
• 綜述 妊娠期高血壓疾病微循環(huán)障礙的研究進展47-58
• 參考文獻53-58
• 致謝58-59
• 個人簡歷59

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本文編號：769980