本文關(guān)鍵詞：不同張力擴張子宮頸誘導大鼠延髓內(nèi)臟帶Fos及nNOS的表達變化

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【摘要】：背景：分娩痛是臨床上典型的重度內(nèi)臟痛之一,可使產(chǎn)婦產(chǎn)生循環(huán)負荷加重、呼吸性酸堿紊亂、宮縮不協(xié)調(diào)、產(chǎn)程延長等一系列負面影響,最后會危及產(chǎn)婦和胎兒的生命,子宮頸擴張是導致分娩痛尤其是第一產(chǎn)程分娩痛的主要原因,但其詳盡機制尚不明了,臨床上也無理想的分娩鎮(zhèn)痛方法。有研究報道,延髓內(nèi)臟帶參與了內(nèi)臟痛的形成和傳導,然而,分娩痛的形成和傳遞是否與延髓內(nèi)臟帶有關(guān)聯(lián)?至今未見有報道。本實驗首先通過建立大鼠子宮頸擴張模型(Uterine cervical distension, UCD)然后研究不同子宮頸擴張張力下大鼠延髓內(nèi)臟帶神經(jīng)元c-fos% nNOS的表達變化,探討延髓內(nèi)臟帶內(nèi)c-fos、nNOS在子宮頸擴張性疼痛中的作用機制。目的：1.給予不同擴張張力的大鼠急性子宮頸擴張模型,利用延髓內(nèi)臟帶內(nèi)神經(jīng)元c-fos表達的不同變化,分析該動物模型的可行性及可靠性。2.觀察不同張力擴張子宮頸誘導大鼠延髓內(nèi)臟帶神經(jīng)元c-fos、nNOS的表達變化,探討子宮頸擴張性疼痛在延髓水平的傳導機制。材料和方法：成年雌性SD大鼠36只,體重250 g-280 g,隨機分為對照組(UCD 0 g組)、子宮頸擴張50克張力組(UCD 50 g組)和子宮頸擴張100克張力組(UCD 100g組),異氟醚吸入麻醉,利用生物信號采集處理系統(tǒng),連續(xù)監(jiān)測心率。經(jīng)大鼠下腹正中切口暴露宮頸,以二金屬鉤分別穿過兩側(cè)宮頸,一側(cè)金屬鉤尾端固定,另一側(cè)通過滑輪連接不同質(zhì)量砝碼(50 g、100 g),對照組不予實施刺激,實驗組實施UCD30分鐘,恢復二小時后,取延髓組織采用NADPH-d組織化學和c-fos的免疫組化雙重染色的方法,觀察c-fos、nNOS和c-fos/nNOS陽性神經(jīng)元的分布,Western Blot法檢測c-fos, nNOS蛋白水平,RT-PCR法檢測c-fos, nNOS mRNA的表達。比較對照組與UCD組c-fos、nNOS在延髓水平的表達變化。結(jié)果：1.c-fos免疫陽性神經(jīng)元細胞核為棕黃色,呈圓形或卵圓形,胞漿不著色。nNOS陽性神經(jīng)元的胞體和突起呈藍色,胞核不著色,呈空泡狀,c-fos/nNOS雙標神經(jīng)元的胞體和樹突染成藍色,細胞核呈棕黃色,這些神經(jīng)元主要分布于延髓孤束核(thenucleus tractus solitarii, NTS)和外側(cè)網(wǎng)狀核(The lateral reticular nucleus, LRN)內(nèi)。2.與UCDOg組相比,UCD 50 g組和UCD 100 g組大鼠延髓NTS和LRN內(nèi)c-fos, nNOS以及c-fos/nNOS陽性神經(jīng)元數(shù)量明顯增加,染色明顯加深,c-fos, nNOS蛋白及mRNA水平均明顯升高(p0.01), UCD100g組高于UCD 50 g組(p0.05)。結(jié)論：1.該模型與其它內(nèi)臟痛刺激誘導的延髓c-fos表達相一致,并且表現(xiàn)出c-fos張力依賴性表達增加,證實了該模型作為急性子宮頸擴張的可靠性。2.大鼠急性子宮頸擴張可導致延髓孤束核和外側(cè)網(wǎng)狀核神經(jīng)元c-fos及nNOS張力依賴性表達增加,NTS和LRN內(nèi)的nNOS陽性神經(jīng)元可能參與子宮頸擴張性疼痛在延髓水平的傳導。
【關(guān)鍵詞】：子宮頸擴張 延髓內(nèi)臟帶 C-fos 神經(jīng)型一氧化氮合酶
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R714
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 縮略詞表11-14
• 1 緒論14-16
• 2 材料與方法16-30
• 2.1 實驗動物16-21
• 2.2 分組與模型制作21-22
• 2.3 標本提取和處理22-23
• 2.4 NADPH-d組織化學和Fos免疫組化雙重染色觀察延髓c-fos/nNOS陽性神經(jīng)元表達23-24
• 2.5 RT-qPCR檢測延髓c-fos,nNOS mRNA的表達24-26
• 2.6 Western blotting檢測延髓c-fos,nNOS蛋白水平變化26-28
• 2.7 統(tǒng)計分析28-30
• 3 結(jié)果30-39
• 3.1 延髓Fos陽性神經(jīng)元、nNOS陽性神經(jīng)元和Fos/nNOS雙標神經(jīng)元的形態(tài)和分布30-34
• 3.2 延髓組織c-fos,nNOS mRNA水平變化34-36
• 3.3 延髓組織c-fos,nNOS蛋白水平變化36-39
• 4 討論39-41
• 5 結(jié)論41-42
• 參考文獻42-46
• 綜述46-55
• 參考文獻51-55
• 作者簡歷及在學期間所取得的科研成果55

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本文編號：731008