發(fā)布時(shí)間：2017-08-24 11:17

  本文關(guān)鍵詞：不同張力擴(kuò)張子宮頸誘導(dǎo)大鼠延髓內(nèi)臟帶Fos及nNOS的表達(dá)變化

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【摘要】：背景：分娩痛是臨床上典型的重度內(nèi)臟痛之一,可使產(chǎn)婦產(chǎn)生循環(huán)負(fù)荷加重、呼吸性酸堿紊亂、宮縮不協(xié)調(diào)、產(chǎn)程延長(zhǎng)等一系列負(fù)面影響,最后會(huì)危及產(chǎn)婦和胎兒的生命,子宮頸擴(kuò)張是導(dǎo)致分娩痛尤其是第一產(chǎn)程分娩痛的主要原因,但其詳盡機(jī)制尚不明了,臨床上也無(wú)理想的分娩鎮(zhèn)痛方法。有研究報(bào)道,延髓內(nèi)臟帶參與了內(nèi)臟痛的形成和傳導(dǎo),然而,分娩痛的形成和傳遞是否與延髓內(nèi)臟帶有關(guān)聯(lián)?至今未見有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)首先通過(guò)建立大鼠子宮頸擴(kuò)張模型(Uterine cervical distension, UCD)然后研究不同子宮頸擴(kuò)張張力下大鼠延髓內(nèi)臟帶神經(jīng)元c-fos% nNOS的表達(dá)變化,探討延髓內(nèi)臟帶內(nèi)c-fos、nNOS在子宮頸擴(kuò)張性疼痛中的作用機(jī)制。目的：1.給予不同擴(kuò)張張力的大鼠急性子宮頸擴(kuò)張模型,利用延髓內(nèi)臟帶內(nèi)神經(jīng)元c-fos表達(dá)的不同變化,分析該動(dòng)物模型的可行性及可靠性。2.觀察不同張力擴(kuò)張子宮頸誘導(dǎo)大鼠延髓內(nèi)臟帶神經(jīng)元c-fos、nNOS的表達(dá)變化,探討子宮頸擴(kuò)張性疼痛在延髓水平的傳導(dǎo)機(jī)制。材料和方法：成年雌性SD大鼠36只,體重250 g-280 g,隨機(jī)分為對(duì)照組(UCD 0 g組)、子宮頸擴(kuò)張50克張力組(UCD 50 g組)和子宮頸擴(kuò)張100克張力組(UCD 100g組),異氟醚吸入麻醉,利用生物信號(hào)采集處理系統(tǒng),連續(xù)監(jiān)測(cè)心率。經(jīng)大鼠下腹正中切口暴露宮頸,以二金屬鉤分別穿過(guò)兩側(cè)宮頸,一側(cè)金屬鉤尾端固定,另一側(cè)通過(guò)滑輪連接不同質(zhì)量砝碼(50 g、100 g),對(duì)照組不予實(shí)施刺激,實(shí)驗(yàn)組實(shí)施UCD30分鐘,恢復(fù)二小時(shí)后,取延髓組織采用NADPH-d組織化學(xué)和c-fos的免疫組化雙重染色的方法,觀察c-fos、nNOS和c-fos/nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元的分布,Western Blot法檢測(cè)c-fos, nNOS蛋白水平,RT-PCR法檢測(cè)c-fos, nNOS mRNA的表達(dá)。比較對(duì)照組與UCD組c-fos、nNOS在延髓水平的表達(dá)變化。結(jié)果：1.c-fos免疫陽(yáng)性神經(jīng)元細(xì)胞核為棕黃色,呈圓形或卵圓形,胞漿不著色。nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元的胞體和突起呈藍(lán)色,胞核不著色,呈空泡狀,c-fos/nNOS雙標(biāo)神經(jīng)元的胞體和樹突染成藍(lán)色,細(xì)胞核呈棕黃色,這些神經(jīng)元主要分布于延髓孤束核(thenucleus tractus solitarii, NTS)和外側(cè)網(wǎng)狀核(The lateral reticular nucleus, LRN)內(nèi)。2.與UCDOg組相比,UCD 50 g組和UCD 100 g組大鼠延髓NTS和LRN內(nèi)c-fos, nNOS以及c-fos/nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)量明顯增加,染色明顯加深,c-fos, nNOS蛋白及mRNA水平均明顯升高(p0.01), UCD100g組高于UCD 50 g組(p0.05)。結(jié)論：1.該模型與其它內(nèi)臟痛刺激誘導(dǎo)的延髓c-fos表達(dá)相一致,并且表現(xiàn)出c-fos張力依賴性表達(dá)增加,證實(shí)了該模型作為急性子宮頸擴(kuò)張的可靠性。2.大鼠急性子宮頸擴(kuò)張可導(dǎo)致延髓孤束核和外側(cè)網(wǎng)狀核神經(jīng)元c-fos及nNOS張力依賴性表達(dá)增加,NTS和LRN內(nèi)的nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元可能參與子宮頸擴(kuò)張性疼痛在延髓水平的傳導(dǎo)。
【關(guān)鍵詞】：子宮頸擴(kuò)張 延髓內(nèi)臟帶 C-fos 神經(jīng)型一氧化氮合酶
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R714
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 縮略詞表11-14
• 1 緒論14-16
• 2 材料與方法16-30
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物16-21
• 2.2 分組與模型制作21-22
• 2.3 標(biāo)本提取和處理22-23
• 2.4 NADPH-d組織化學(xué)和Fos免疫組化雙重染色觀察延髓c-fos/nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元表達(dá)23-24
• 2.5 RT-qPCR檢測(cè)延髓c-fos,nNOS mRNA的表達(dá)24-26
• 2.6 Western blotting檢測(cè)延髓c-fos,nNOS蛋白水平變化26-28
• 2.7 統(tǒng)計(jì)分析28-30
• 3 結(jié)果30-39
• 3.1 延髓Fos陽(yáng)性神經(jīng)元、nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元和Fos/nNOS雙標(biāo)神經(jīng)元的形態(tài)和分布30-34
• 3.2 延髓組織c-fos,nNOS mRNA水平變化34-36
• 3.3 延髓組織c-fos,nNOS蛋白水平變化36-39
• 4 討論39-41
• 5 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 綜述46-55
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 作者簡(jiǎn)歷及在學(xué)期間所取得的科研成果55

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本文編號(hào)：731008