下調(diào)miR-221表達(dá)抑制子宮頸癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為及其作用機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2017-08-18 01:03
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【摘要】:目的:探討下調(diào)miR-221表達(dá)對(duì)子宮頸癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響及其作用機(jī)制。方法:運(yùn)用脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染法將miR-221抑制劑和陰性對(duì)照核苷酸片段(NC)轉(zhuǎn)染子宮頸癌細(xì)胞HeLa、C33A、SiHa和Caski細(xì)胞,用Western blotting和Real-time PCR分別檢測(cè)ARID1A(miR-221靶蛋白)、cleaved caspase 3、caspase 3、cleaved PARP、PARP、MMP-9、MMP-13、TIMP-3蛋白表達(dá)水平和miR-221、MMP-9、MMP-13、TIMP-3 mRNA的表達(dá)水平;用MTT法、克隆形成實(shí)驗(yàn)、Annexin V-FITC/PI染色結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)分別測(cè)定細(xì)胞增殖、克隆形成率和細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:與陰性對(duì)照組比較,(1)miR-221抑制劑轉(zhuǎn)染的He La、CC3A、SiHa和Caski細(xì)胞miR-221表達(dá)量均顯著降低[(0.23±0.01)、(0.31±0.02)、(0.34±0.01)、(0.37±0.02),F=25.44,P0.05];(2)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加細(xì)胞存活率逐漸下降,具有時(shí)間依賴效應(yīng),48 h之后細(xì)胞存活率顯著低于陰性對(duì)照組(F=37.42,P0.05);細(xì)胞的克隆形成率顯著降低(F=43.58,P0.05);培養(yǎng)72 h時(shí)細(xì)胞凋亡率分別為:He La(27.92±3.47)%、C33A(20.84±4.31)%、Si Ha(18.81±2.18)%、Caski(19.86±3.82)%,均顯著高于對(duì)照組(F=54.78,P0.05);(3)轉(zhuǎn)染細(xì)胞下調(diào)miR-221表達(dá)后促進(jìn)cleaved caspase 3、cleaved PARP、TIMP-3蛋白表達(dá),抑制MMP-13蛋白表達(dá);降低MMP-13 mRNA表達(dá)(t=37.50,P0.05),增加TIMP-3 mRNA表達(dá)(t=46.30,P0.05)。結(jié)論:下調(diào)miR-221表達(dá)能抑制子宮頸癌細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為,其機(jī)制與激活caspase信號(hào)通路從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡以及調(diào)控MMP-13和TIMP-3的表達(dá)有關(guān)。
【作者單位】: 濟(jì)南市第五人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;中國(guó)計(jì)劃生育研究所細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 子宮頸癌 miR-抑制劑 細(xì)胞凋亡 惡性生物學(xué)行為 作用機(jī)制
【基金】:山東省醫(yī)藥衛(wèi)生資助項(xiàng)目(No.2013WS0010)~~
【分類號(hào)】:R737.33
【正文快照】: 細(xì)胞生物實(shí)驗(yàn)室,北京100081)[Chin J Cancer Biother,2016,23(5):640-645.DOI:10.3872/j.issn.1007-385X.2016.05.009]子宮頸癌是造成婦女死亡的主要惡性腫瘤之一,全球每年有近50萬(wàn)新增子宮頸癌病例,85%患者發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家[1-2]。目前,我國(guó)子宮頸癌患者趨于年輕化[3]。該病
【相似文獻(xiàn)】
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1 盧美松;鄧鎖;王澤華;;體外模擬二氧化碳人工氣腹對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響[J];中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志;2007年01期
2 周晨慧;;干擾素-γ對(duì)宮頸癌細(xì)胞免疫分子表達(dá)的影響[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2007年01期
3 潘惠艷;趙群;詹陽(yáng);趙麗紅;張衛(wèi)華;吳玉梅;;電壓門控鈉離子通道表達(dá)對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖侵襲轉(zhuǎn)移作用的研究[J];中國(guó)腫瘤臨床;2012年04期
4 馮理達(dá);錢菊卿;陳淑琴;張s,
本文編號(hào):691920
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