本文關(guān)鍵詞：PcG蛋白HPC2的生物信息學(xué)分析及其在不同HPV感染狀態(tài)的宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)研究

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【摘要】：目的:宮頸癌是全球女性惡性腫瘤中的常見疾病,嚴(yán)重威脅著女性的生命健康。作為發(fā)展中國(guó)家的中國(guó)每年的新發(fā)病例占世界總新發(fā)病例的30%左右,且宮頸癌患者以每年2%-3%的速度增長(zhǎng)。近年來(lái)多個(gè)宮頸癌普查顯示發(fā)病年齡趨于年輕化。現(xiàn)已有大量的研究表明HPV感染特別是高危型HPV病毒的感染是絕大多數(shù)宮頸癌癌前病變和宮頸癌的主要原因。而HPV16與HPV18在致宮頸癌的高危型HPV中最常見。多梳基因(Polycomb group,PcG)是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一個(gè)腫瘤相關(guān)基因。其已被證實(shí)為發(fā)育時(shí)維持同源異形基因穩(wěn)定表現(xiàn)的重要因子,在胚胎發(fā)育、腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移以及干細(xì)胞的維持中有著重要的作用�，F(xiàn)已有多項(xiàng)研究表明PcG是一種腫瘤相關(guān)基因,參與鼻咽癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌等多種人類腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。HPC2屬于PcG基因家族成員,在多種癌組織中有大量表達(dá)。研究證實(shí)PcG蛋白HPC2在誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡、調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)等方面的作用,并有研究表明HPC2在宮頸癌中的表達(dá)較正常宮頸組織明顯增高,但其在宮頸癌組織中的表達(dá)及作用途徑仍不明晰,需要進(jìn)一步研究證實(shí)。因此深入了解與深入研究PcG蛋白HPC2的生物信息學(xué)功能及其與宮頸癌的關(guān)系很有必要,希望能為宮頸癌的發(fā)病機(jī)制的研究提供新的方向。本實(shí)驗(yàn)先通過(guò)生物信息學(xué)方法,對(duì)HPC2蛋白的氨基酸序列進(jìn)行理化性質(zhì)分析、親/疏水性分析、細(xì)胞內(nèi)的定位情況、結(jié)構(gòu)域分析,并對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)演化關(guān)系預(yù)測(cè),為日后開展HPC2的相關(guān)研究提供理論依據(jù)。后通過(guò)體外培養(yǎng)不同HPV感染狀態(tài)的宮頸癌細(xì)胞Siha(HPV16感染),HeLa(HPV18感染),C-33a(無(wú)HPV感染),探討PcG蛋白HPC2在3種宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)情況,并比較PcG蛋白HPC2在不同HPV感染狀態(tài)的宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)是否存在差異,旨在為HPV致宮頸癌的作用機(jī)制提供一個(gè)新的研究方向。方法:1.體外培養(yǎng)三種宮頸癌細(xì)胞株;2.采用熒光定量RT-PCR,觀察不同HPV感染狀態(tài)的宮頸癌細(xì)胞中HPC2基因的表達(dá)情況。比較Siha,HeLa,C-33a細(xì)胞中HPC2的表達(dá)有無(wú)差異;3.采用western blot技術(shù),比較Siha,Hela,C-33a宮頸癌細(xì)胞中PcG蛋白HPC2的表達(dá)是否存在差異。結(jié)果:1.熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示:不同HPV感染狀態(tài)下的宮頸癌細(xì)胞均有HPC2基因的表達(dá)。Hela、Siha細(xì)胞中的HPC2基因的表達(dá)較C-33a細(xì)胞明顯下調(diào),P值均小于0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Hela與Siha細(xì)胞間HPC2基因的表達(dá)無(wú)明顯差異,P=0.3180.05。2.Western Blot結(jié)果顯示三種宮頸癌細(xì)胞中均有HPC2蛋白的表達(dá),且C-33a中蛋白的表達(dá)比Hela、Siha細(xì)胞多,與RT-PCR結(jié)果一致。結(jié)論:1.宮頸癌SiHa,HeLa,C-33a細(xì)胞中均有PcG蛋白HPC2的表達(dá)。2.存在HPV感染的Siha,Hela細(xì)胞的HPC2表達(dá)與無(wú)HPV感染的C-33a細(xì)胞相比明顯降低,而均被HPV感染的Siha、Hela細(xì)胞的HPC2表達(dá)無(wú)明顯差異。3.HPC2蛋白的表達(dá)情況與HPV病毒感染具有相關(guān)性。
【關(guān)鍵詞】：宮頸癌 PcG蛋白HPC2 生物信息學(xué) Siha細(xì)胞 HeLa細(xì)胞 C-33a細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-8
• 前言8-11
• 第一部分:PcG蛋白HPC2的生物信息學(xué)分析11-15
• 一、材料11
• 二、方法：對(duì)HPC2蛋白的進(jìn)行生物信息學(xué)分析11
• 三、結(jié)果11-14
• 四、討論14-15
• 第二部分:不同HPV感染狀態(tài)下的宮頸癌細(xì)胞中HPC2的表達(dá)研究15-38
• 材料與方法15-28
• 結(jié)果28-32
• 討論32-38
• 結(jié)論38
• 參考文獻(xiàn)38-45
• 主要縮略詞中英對(duì)照表45-47
• 致謝47-48
• PcG蛋白HPC2在宮頸癌發(fā)生中的作用 綜述48-58
• 參考文獻(xiàn)54-58

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 盧美松;鄧鎖;王澤華;;體外模擬二氧化碳人工氣腹對(duì)宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響[J];中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志;2007年01期

2 周晨慧;;干擾素-γ對(duì)宮頸癌細(xì)胞免疫分子表達(dá)的影響[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2007年01期

3 潘惠艷;趙群;詹陽(yáng);趙麗紅;張衛(wèi)華;吳玉梅;;電壓門控鈉離子通道表達(dá)對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖侵襲轉(zhuǎn)移作用的研究[J];中國(guó)腫瘤臨床;2012年04期

4 馮理達(dá);錢菊卿;陳淑琴;張s，

本文編號(hào)：685674