本文關(guān)鍵詞：低氧誘導(dǎo)下HIF-2α與VE-cadherin在宮頸腺癌中的表達(dá)及其相關(guān)性研究

  更多相關(guān)文章： HIF-2α VE-cadherin 宮頸腺癌 Hela細(xì)胞 CoCl2

【摘要】：目的:通過檢測正常宮頸組織及宮頸腺癌組織中HIF-2α、VE-cadherin的表達(dá)情況,分析其表達(dá)的相關(guān)性和差異性,從而探討HIF-2α、VE-cadherin的表達(dá)在宮頸腺癌發(fā)生發(fā)展中的意義。方法:1、收集60例人宮頸腺癌組織和18例正常宮頸組織,采用免疫組織化學(xué)法(Envision法)檢測各組織中HIF-2α、VE-cadherin的表達(dá);2、通過CoCl2試劑造細(xì)胞體外缺氧模型;3、體外培養(yǎng)人宮頸腺癌Hela細(xì)胞,用(50、100、150、200、250μmol/L)不同濃度的Co Cl2作用于Hela細(xì)胞不同時(shí)間(0、24、48、72小時(shí))后,用MTT法檢測各組中缺氧對人宮頸腺癌Hela細(xì)胞增殖活性的影響;用RT-PCR技術(shù)檢測100μmol/LCoCl2作用0、24、48、72小時(shí)后人宮頸腺癌Hela細(xì)胞中HIF-2α和VE-cadherin在mRNA表達(dá)水平上的變化;用Western blot技術(shù)檢測100μmol/LCoCl2作用0、24、48、72小時(shí)后人宮頸腺癌Hela細(xì)胞中HIF-2α和VE-cadherin在蛋白表達(dá)水平上的改變。結(jié)果:1、檢測60例人宮頸腺癌組織和18例正常宮頸組織后發(fā)現(xiàn),HIF-2α在人宮頸腺癌中的陽性表達(dá)率為56.67%,在正常宮頸組織中的陽性表達(dá)率為11.11%,二者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);VE-cadherin在宮頸腺癌組織中的陽性表達(dá)率為65.00%,在正常宮頸組織的宮頸腺中的陽性表達(dá)率為5.56%,二者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。HIF-2α及VE-cadherin的表達(dá)與否與宮頸腺癌患者有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、腫瘤大小有關(guān)(p0.05),與患者的年齡、腫瘤的分化程度無關(guān)(p0.05),而且hif-2α與ve-cadherin兩者表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.632(p0.05);2、mtt細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果表明,50μmol/l和100μmol/lcoc12作用24h組hela細(xì)胞增殖力全都高于對照組(p0.05),其中100μmol/l時(shí)細(xì)胞增殖力最高;50μmol/l和100μmol/l24h組細(xì)胞增殖力無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;50μmol/l和100μmol/lcoc12作用48h、72h組,hela細(xì)胞增殖力全都低于對照組(p0.05);150μmol/l、200μmol/l、250μmol/lcocl2作用下,hela細(xì)胞增殖力全都低于對照組(p0.05)。3、rt-pcr結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組相比在cocl2濃度為100μmol/l作用下的各時(shí)間組中的hif-2α和ve-cadherin都有增加,并且ve-cadherin的增加在缺氧48小時(shí)達(dá)到最大值,而hif-2α卻是一直呈上升趨勢。hif-2α和ve-cadherin在mrna表達(dá)水平上存在正相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.987,p=0.013(p0.05);4、westernblot結(jié)果表明,與對照組相比較在100μmol/lcocl2誘導(dǎo)下,各時(shí)間組的人宮頸腺癌hela細(xì)胞在缺氧環(huán)境中hif-2α和ve-cadherin蛋白表達(dá)量均升高,且ve-cadherin蛋白表達(dá)量在缺氧48小時(shí)達(dá)到最大,隨之有所減少,而hif-2α的蛋白表達(dá)量一直呈上升趨勢。hif-2α和ve-cadherin在蛋白表達(dá)水平上存在正相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.869,p=0.031(p0.05)。結(jié)論:1、hif-2α與ve-cadherin的蛋白表達(dá)水平的高低可能對宮頸癌患者腫瘤的轉(zhuǎn)移、浸潤有一定預(yù)警作用;2、hif-2α可能是調(diào)控ve-cadherin表達(dá)的眾多調(diào)控因子之一,hif-2α可能是通過誘導(dǎo)ve-cadherin在蛋白水平的高表達(dá)來促進(jìn)宮頸腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移;3、缺氧在一定時(shí)間內(nèi)可促進(jìn)宮頸腺癌hela細(xì)胞的增殖,隨著濃度的增加和時(shí)間的延長,hela細(xì)胞增殖將會(huì)受到抑制;4、HIF-2α可能通過誘導(dǎo)人宮頸腺癌Hela細(xì)胞中VE-cadherin的蛋白表達(dá),減少缺氧對人宮頸腺癌Hela細(xì)胞增殖的抑制作用;5、HIF-2α抗血管生成劑及抗體在人宮頸腺癌的治療方面可能具有潛在的臨床研究價(jià)值,可能對后續(xù)開發(fā)抗宮頸腺癌的新型藥物提供理論與實(shí)驗(yàn)支持。
【關(guān)鍵詞】：HIF-2α VE-cadherin 宮頸腺癌 Hela細(xì)胞 CoCl2
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-27
• 結(jié)果27-35
• 附圖35-36
• 討論36-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 英漢縮略詞對照表45-46
• 致謝46-47
• 綜述 腫瘤血管生成擬態(tài)的研究進(jìn)展47-57
• 參考文獻(xiàn)54-57

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