本文關鍵詞：低氧誘導下HIF-2α與VE-cadherin在宮頸腺癌中的表達及其相關性研究

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【摘要】：目的:通過檢測正常宮頸組織及宮頸腺癌組織中HIF-2α、VE-cadherin的表達情況,分析其表達的相關性和差異性,從而探討HIF-2α、VE-cadherin的表達在宮頸腺癌發(fā)生發(fā)展中的意義。方法:1、收集60例人宮頸腺癌組織和18例正常宮頸組織,采用免疫組織化學法(Envision法)檢測各組織中HIF-2α、VE-cadherin的表達;2、通過CoCl2試劑造細胞體外缺氧模型;3、體外培養(yǎng)人宮頸腺癌Hela細胞,用(50、100、150、200、250μmol/L)不同濃度的Co Cl2作用于Hela細胞不同時間(0、24、48、72小時)后,用MTT法檢測各組中缺氧對人宮頸腺癌Hela細胞增殖活性的影響;用RT-PCR技術檢測100μmol/LCoCl2作用0、24、48、72小時后人宮頸腺癌Hela細胞中HIF-2α和VE-cadherin在mRNA表達水平上的變化;用Western blot技術檢測100μmol/LCoCl2作用0、24、48、72小時后人宮頸腺癌Hela細胞中HIF-2α和VE-cadherin在蛋白表達水平上的改變。結果:1、檢測60例人宮頸腺癌組織和18例正常宮頸組織后發(fā)現,HIF-2α在人宮頸腺癌中的陽性表達率為56.67%,在正常宮頸組織中的陽性表達率為11.11%,二者相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);VE-cadherin在宮頸腺癌組織中的陽性表達率為65.00%,在正常宮頸組織的宮頸腺中的陽性表達率為5.56%,二者相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。HIF-2α及VE-cadherin的表達與否與宮頸腺癌患者有無淋巴結轉移、臨床分期、腫瘤大小有關(p0.05),與患者的年齡、腫瘤的分化程度無關(p0.05),而且hif-2α與ve-cadherin兩者表達呈正相關關系,相關系數為0.632(p0.05);2、mtt細胞增殖實驗檢測結果表明,50μmol/l和100μmol/lcoc12作用24h組hela細胞增殖力全都高于對照組(p0.05),其中100μmol/l時細胞增殖力最高;50μmol/l和100μmol/l24h組細胞增殖力無統(tǒng)計學差異;50μmol/l和100μmol/lcoc12作用48h、72h組,hela細胞增殖力全都低于對照組(p0.05);150μmol/l、200μmol/l、250μmol/lcocl2作用下,hela細胞增殖力全都低于對照組(p0.05)。3、rt-pcr結果發(fā)現,與對照組相比在cocl2濃度為100μmol/l作用下的各時間組中的hif-2α和ve-cadherin都有增加,并且ve-cadherin的增加在缺氧48小時達到最大值,而hif-2α卻是一直呈上升趨勢。hif-2α和ve-cadherin在mrna表達水平上存在正相關關系,相關系數為0.987,p=0.013(p0.05);4、westernblot結果表明,與對照組相比較在100μmol/lcocl2誘導下,各時間組的人宮頸腺癌hela細胞在缺氧環(huán)境中hif-2α和ve-cadherin蛋白表達量均升高,且ve-cadherin蛋白表達量在缺氧48小時達到最大,隨之有所減少,而hif-2α的蛋白表達量一直呈上升趨勢。hif-2α和ve-cadherin在蛋白表達水平上存在正相關關系,相關系數為0.869,p=0.031(p0.05)。結論:1、hif-2α與ve-cadherin的蛋白表達水平的高低可能對宮頸癌患者腫瘤的轉移、浸潤有一定預警作用;2、hif-2α可能是調控ve-cadherin表達的眾多調控因子之一,hif-2α可能是通過誘導ve-cadherin在蛋白水平的高表達來促進宮頸腺癌侵襲和轉移;3、缺氧在一定時間內可促進宮頸腺癌hela細胞的增殖,隨著濃度的增加和時間的延長,hela細胞增殖將會受到抑制;4、HIF-2α可能通過誘導人宮頸腺癌Hela細胞中VE-cadherin的蛋白表達,減少缺氧對人宮頸腺癌Hela細胞增殖的抑制作用;5、HIF-2α抗血管生成劑及抗體在人宮頸腺癌的治療方面可能具有潛在的臨床研究價值,可能對后續(xù)開發(fā)抗宮頸腺癌的新型藥物提供理論與實驗支持。
【關鍵詞】：HIF-2α VE-cadherin 宮頸腺癌 Hela細胞 CoCl2
【學位授予單位】：四川醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-27
• 結果27-35
• 附圖35-36
• 討論36-40
• 結論40-41
• 參考文獻41-45
• 英漢縮略詞對照表45-46
• 致謝46-47
• 綜述 腫瘤血管生成擬態(tài)的研究進展47-57
• 參考文獻54-57

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本文編號：649333