本文關(guān)鍵詞：GPER基因羥甲基化調(diào)控在胰島素誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜異常增生中的作用及機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 子宮內(nèi)膜癌 胰島素 GPER 子宮內(nèi)膜癌 胰島素 TET1 子宮內(nèi)膜癌 TET1 增殖 子宮內(nèi)膜癌 TET1 GPER

【摘要】：目的:探討子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Hec-1a和Ishikawa中胰島素對(duì)GPER表達(dá)水平的影響和干擾GPER蛋白表達(dá)對(duì)胰島素促子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖能力的影響。方法:Western-blotting和SRB法檢測(cè)不同濃度胰島素對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Hec-1a和Ishikawa細(xì)胞增殖能力的影響;rt-PCR法篩選胰島素對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞發(fā)揮作用的受體;Western-blotting和免疫熒光共聚焦試驗(yàn)檢測(cè)胰島素對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中GPER表達(dá)的影響;應(yīng)用干擾GPER表達(dá)的si RNA轉(zhuǎn)染Hec-1a和Ishikawa細(xì)胞,僅加入轉(zhuǎn)染試劑的細(xì)胞作為陰性對(duì)照;Western-blotting檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率及干擾GPER表達(dá)對(duì)下游信號(hào)通路的影響;SRB法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力改變。結(jié)果:胰島素通過(guò)調(diào)控AKT/PI3K通路磷酸化水平促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Hec-1a和Ishikawa的增殖;胰島素通過(guò)上調(diào)GPER的表達(dá)增加子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì)雌激素的敏感性;GPER參與調(diào)控胰島素促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖過(guò)程。結(jié)論:胰島素可以通過(guò)上調(diào)GPER的表達(dá)增加子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì)雌激素的敏感性,從而調(diào)控AKT/PI3K通路磷酸化水平,促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖,提示胰島素對(duì)子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生和發(fā)展存在促進(jìn)作用。目的:探討子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Hec-1a和Ishikawa中胰島素對(duì)TET1的表達(dá)水平的影響和調(diào)控TET1蛋白表達(dá)對(duì)胰島素促子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖能力的影響。方法:Western-blotting和免疫熒光共聚焦試驗(yàn)檢測(cè)胰島素對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中TET1表達(dá)的影響;應(yīng)用干擾TET1表達(dá)的si RNA轉(zhuǎn)染Hec-1a和Ishikawa細(xì)胞,僅加入轉(zhuǎn)染試劑的細(xì)胞作為陰性對(duì)照;Western-blotting檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率及干擾TET1表達(dá)對(duì)下游信號(hào)通路的影響;SRB法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力改變。結(jié)果:胰島素可以通過(guò)上調(diào)TET1的表達(dá)調(diào)控AKT/PI3K通路磷酸化水平,促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖。結(jié)論:胰島素通過(guò)上調(diào)TET1的表達(dá)調(diào)控子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖,提示胰島素對(duì)子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生和發(fā)展具有促進(jìn)作用。目的:探討不同類(lèi)型子宮內(nèi)膜病變中TET1(Ten-Eleven Translocation 1)的表達(dá)水平和干擾TET1蛋白表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Hec-1a和Ishikawa細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法:免疫組化檢測(cè)組織中TET1的表達(dá);應(yīng)用干擾TET1表達(dá)的si RNA轉(zhuǎn)染Hec-1a和Ishikawa細(xì)胞,僅加入轉(zhuǎn)染試劑的細(xì)胞作為陰性對(duì)照;Western-blotting檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率;SRB法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力改變;Transwell侵襲試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力改變;劃痕試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力改變;流式細(xì)胞學(xué)方法檢測(cè)細(xì)胞周期改變。結(jié)果:子宮內(nèi)膜組織中TET1的表達(dá)隨病理類(lèi)型進(jìn)展而升高;干擾組TET1蛋白表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組;干擾TET1表達(dá)后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲能力均受到不同程度抑制,同時(shí)出現(xiàn)G1/S期細(xì)胞周期阻滯。結(jié)論:子宮內(nèi)膜癌及子宮內(nèi)膜增生性病變組織中TET1表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組織;干擾TET1表達(dá)后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲能力下降,且出現(xiàn)G1/S期細(xì)胞周期阻滯,提示TET1在子宮內(nèi)膜癌的增殖和轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用。目的:探討胰島素對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中GPER啟動(dòng)子區(qū)域羥甲基化水平的調(diào)控及TET1在其中發(fā)揮的作用。方法:組織芯片和免疫組化檢測(cè)不同類(lèi)型子宮內(nèi)膜組織中GPER和TET1的表達(dá)及其相關(guān)性;Western-blotting,熒光素酶報(bào)告基因,Hme Dip檢測(cè)TET1對(duì)GPER啟動(dòng)子區(qū)域活性的調(diào)控。結(jié)果:TET1與GPER在不同病理類(lèi)型的子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)呈正相關(guān),TET1可以上調(diào)GPER啟動(dòng)子區(qū)域活性從而增加子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中GPER的表達(dá)。結(jié)論:TET1在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中通過(guò)羥甲基化調(diào)控GPER的表達(dá)并影響子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖。
【關(guān)鍵詞】：子宮內(nèi)膜癌 胰島素 GPER 子宮內(nèi)膜癌 胰島素 TET1 子宮內(nèi)膜癌 TET1 增殖 子宮內(nèi)膜癌 TET1 GPER
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 第一部分 胰島素通過(guò)增加 GPER（G protein-coupled estrogen receptor）表達(dá)促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖8-33
• 摘要8-9
• Abstract9-11
• 1. 引言11-12
• 2. 材料與方法12-26
• 2.1 材料12-17
• 2.1.1 主要試劑、耗材及儀器12-17
• 2.1.2 細(xì)胞系17
• 2.2 方法17-26
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)17
• 2.2.2 轉(zhuǎn)染17-18
• 2.2.3 Western Blotting18-21
• 2.2.4 SRB21-22
• 2.2.5 免疫熒光共聚焦試驗(yàn)22-23
• 2.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)23-26
• 3. 結(jié)果26-32
• 3.1 胰島素通過(guò)調(diào)控AKT/PI3K通路磷酸化水平促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖26-28
• 3.2 胰島素增加子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì)雌激素的敏感性28-30
• 3.3 胰島素在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系中上調(diào)GPER的表達(dá)30-31
• 3.4 GPER參與胰島素促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖過(guò)程31-32
• 4. 討論32-33
• 第二部分 胰島素通過(guò)增加 TET1（Ten Eleven translocation 1）表達(dá)促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖33-47
• 摘要33-34
• Abstract34-35
• 1. 引言35-36
• 2. 材料與方法36-43
• 2.1 材料36-40
• 2.1.1 主要試劑、耗材及儀器36-40
• 2.1.2 細(xì)胞系40
• 2.2 方法40-43
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)40
• 2.2.2 提取基因組DNA40-41
• 2.2.3 點(diǎn)雜交41
• 2.2.4 目的質(zhì)粒擴(kuò)增及提取41-43
• 3. 結(jié)果43-46
• 3.1 胰島素上調(diào)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中TET1的表達(dá)和 544-45
• 3.2 TET1參與胰島素促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖過(guò)程45-46
• 4. 討論46-47
• 第三部分 TET1 在子宮內(nèi)膜病變中的表達(dá)及其對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖和遷移能力的影響47-64
• 摘要47-48
• Abstract48-49
• 1. 引言49-50
• 2. 材料與方法50-57
• 2.1 材料50-54
• 2.1.1 主要試劑、耗材及儀器50-53
• 2.1.2 細(xì)胞系53
• 2.1.3 標(biāo)本收集53-54
• 2.2 方法54-57
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)54
• 2.2.2 劃痕試驗(yàn)54
• 2.2.3 Transwell試驗(yàn)54
• 2.2.4 免疫組化54-56
• 2.2.5 細(xì)胞周期檢測(cè)56
• 2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析56-57
• 3. 結(jié)果57-61
• 3.1 子宮內(nèi)膜增生性病變和子宮內(nèi)膜癌中TET1的表達(dá)隨病變進(jìn)展而升高57-58
• 3.2 干擾TET1表達(dá)后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖能力下降58-59
• 3.3 干擾TET1表達(dá)后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的遷移能力下降59-60
• 3.4 干擾TET1表達(dá)后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的侵襲能力下降60
• 3.5 干擾TET1表達(dá)后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的細(xì)胞周期變化60-61
• 4. 討論61-64
• 第四部分 胰島素通過(guò)上調(diào) TET1 促進(jìn) GPER 啟動(dòng)子區(qū)域羥甲基化增加GPER 表達(dá)64-79
• 摘要64-65
• Abstract65-66
• 1. 引言66
• 2. 材料與方法66-75
• 2.1 材料66-71
• 2.1.1 主要試劑、耗材及儀器66-71
• 2.1.2 細(xì)胞系71
• 2.2 方法71-75
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)71
• 2.2.2 Hme Dip71-73
• 2.2.3 熒光素酶報(bào)告基因73-74
• 2.2.4 組織芯片TMA的制備74-75
• 3 結(jié)果75-78
• 3.1 在不同病理類(lèi)型的子宮內(nèi)膜組織中GPER和TET1呈正相關(guān)性表達(dá)75-77
• 3.2 TET1與GPER的關(guān)系及兩者對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖的影響77-78
• 4 討論78-79
• 參考文獻(xiàn)79-83
• 致謝83-84
• 攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表或錄用的論文84

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 Cooley S.;Yuddandi V.;Walsh T.;張劍萍;;子宮內(nèi)膜去除術(shù)治療的近期及遠(yuǎn)期預(yù)后[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè));2005年12期

2 張慧;子宮內(nèi)膜鈣化1例[J];四川醫(yī)學(xué);2005年04期

3 鄭鳳英;時(shí)青云;吳姍姍;;絕經(jīng)后子宮內(nèi)膜增厚的臨床與病理分析[J];中國(guó)婦幼保健;2007年02期

4 董燕君;周堅(jiān)紅;;子宮內(nèi)膜厚度在絕經(jīng)前婦女子宮內(nèi)膜疾病中的診斷價(jià)值[J];腫瘤學(xué)雜志;2011年10期

5 薛愛(ài)玲,陳貴安;子宮內(nèi)膜凋亡的相關(guān)因素[J];生殖醫(yī)學(xué)雜志;1999年02期

6 劉艷;;為什么我的子宮內(nèi)膜會(huì)長(zhǎng)到肺上[J];婚姻與家庭(性情讀本);2008年10期

7 鄭雨龍;;特別注意子宮內(nèi)膜“出逃”[J];健康天地;2009年05期

8 陳會(huì)昌;;流產(chǎn),“流走”了子宮內(nèi)膜[J];婚育與健康;2010年30期

9 阿靜 ,雪生;警惕子宮內(nèi)膜"移民"顛覆你的生育大計(jì)[J];現(xiàn)代保健;2004年05期

10 林斯其;;“擅離職守”的子宮內(nèi)膜[J];健康博覽;1998年12期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王麗娜;;子宮內(nèi)膜血流與子宮內(nèi)膜容受性[A];婦科內(nèi)分泌與輔助生殖論壇論文集[C];2011年

2 陳貴安;王海燕;;子宮內(nèi)膜出血機(jī)理及修復(fù)[A];高泌乳素血癥和功能失調(diào)性子宮出血專(zhuān)題研討會(huì)論文集[C];2007年

3 辛廖冰;范盈盈;;絕經(jīng)后子宮內(nèi)膜增厚的臨床與病理分析[A];2012年浙江省婦產(chǎn)科學(xué)及圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)暨《婦產(chǎn)科常見(jiàn)疾病規(guī)范化治療新進(jìn)展》及《圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)熱點(diǎn)追蹤》學(xué)習(xí)班論文集[C];2012年

4 林俊;阮菲;;子宮內(nèi)膜去除術(shù)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)會(huì)議婦科內(nèi)鏡會(huì)場(chǎng)（婦科內(nèi)鏡學(xué)組）論文匯編[C];2012年

5 田文儒;何劍斌;叢霞;曹榮峰;姜忠玲;宋學(xué)雄;;產(chǎn)后奶牛子宮內(nèi)膜的掃描電鏡觀察[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2003年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2003年

6 周亮;王榮;李蓉;;妊娠和妊娠失敗患者在超排周期第10天子宮內(nèi)膜差異基因表達(dá)譜[A];第一屆中華醫(yī)學(xué)會(huì)生殖醫(yī)學(xué)分會(huì)、中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)生殖生物學(xué)分會(huì)聯(lián)合年會(huì)論文匯編[C];2007年

7 馬彩輝;李予;王文軍;麥美琪;楊冬梓;陳向紅;張清學(xué);古少君;;體外受精-胚胎移植失敗者子宮內(nèi)膜整合素β3與細(xì)胞問(wèn)隙連接蛋白43表達(dá)的研究[A];第二屆全國(guó)不育癥研討會(huì)論文匯編[C];2007年

8 張靜;劉莉;;絕經(jīng)期子宮內(nèi)膜增厚天然孕酮治療67例臨床觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第三次全國(guó)絕經(jīng)學(xué)術(shù)會(huì)議暨絕經(jīng)相關(guān)問(wèn)題學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2011年

9 尹素芳;陳曉娜;陳曉光;;取子宮內(nèi)膜組織190例病理性診斷研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)婦科腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

10 楊開(kāi)選;徐煉;萬(wàn)宇;宋波;何英;葉綠;吳秀麗;楊帆;孫亮;;418例子宮內(nèi)膜良性疾病會(huì)診結(jié)果的病理分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)暨第九屆全國(guó)病理大會(huì)論文匯編[C];2007年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馮瑤邋記者 楊麗佳;子宮內(nèi)膜“搬家”到肺獲復(fù)原[N];健康報(bào);2007年

2 海軍總醫(yī)院婦產(chǎn)科 王藹明 王明凱;子宮內(nèi)膜也會(huì)沙化[N];健康報(bào);2013年

3 徐飛;子宮內(nèi)膜不安分 “游走”全身惹禍端[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2008年

4 上海市浦東新區(qū)公利醫(yī)院 中醫(yī)科 吳昆倉(cāng) 主任醫(yī)師;子宮內(nèi)膜增厚的形成與控制[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2008年

5 庚萬(wàn)煬;當(dāng)心：子宮內(nèi)膜亂跑[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

6 韋立功 　 覃江萍;微波子宮內(nèi)膜消除術(shù)治療月經(jīng)過(guò)多[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

7 本報(bào)記者 王建影;子宮內(nèi)膜為何在子宮外瘋長(zhǎng)[N];保健時(shí)報(bào);2004年

8 趙藍(lán)韻;“長(zhǎng)腿”的子宮內(nèi)膜[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2006年

9 河北省河間市人民醫(yī)院 程懷孟;經(jīng)期氣胸：子宮內(nèi)膜跑到胸腔[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2012年

10 滕成梅;子宮內(nèi)膜“亂走”怎么辦[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 冉靜;鋅指轉(zhuǎn)錄因子ZEB1促進(jìn)子宮內(nèi)膜EMT在胚胎著床的功能及機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

2 高偉;X射線對(duì)子宮內(nèi)膜及卵巢生殖功能影響的分子機(jī)制的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2015年

3 鄭圣霞;月經(jīng)血源性子宮內(nèi)膜干細(xì)胞移植治療重度宮腔粘連的臨床前期研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

4 許春燕;基于miR-135a調(diào)控作用探討歸腎丸治療腎虛—薄型子宮內(nèi)膜大鼠的機(jī)制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年

5 周峰;低劑量米非司酮對(duì)人植入窗期子宮內(nèi)膜水通道蛋白1的影響[D];浙江大學(xué);2016年

6 包珊;功血雌激素誘導(dǎo)VEGF-MMPs途徑及其血清標(biāo)志物研究[D];南華大學(xué);2015年

7 陽(yáng)艷軍;子宮內(nèi)膜異位癥人體組織學(xué)模型構(gòu)建及內(nèi)異癥和非內(nèi)異癥患者子宮內(nèi)膜粘附特點(diǎn)分析[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

8 路軍麗;連續(xù)聯(lián)合雌、孕激素補(bǔ)充治療中子宮內(nèi)膜的改變及監(jiān)測(cè)的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

9 趙靜;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療薄型子宮內(nèi)膜的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2013年

10 潘曉玉;Claudin-3和claudin-4在子宮內(nèi)膜惡性轉(zhuǎn)化中的意義[D];山東大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊陽(yáng);內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)中CB1受體及水解酶FAAH在多囊卵巢綜合征患者子宮內(nèi)膜的表達(dá)與分析[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 王常燕;內(nèi)源性大麻素系列對(duì)不明原因性不孕患者種植窗期子宮內(nèi)膜的影響及其作用機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉上飛;缺氧影響奶牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞OPN和cyclinG1的表達(dá)[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 賀田芳媛;凋膜止崩膏宮腔應(yīng)用對(duì)子宮內(nèi)膜癌前病變相關(guān)抑癌基因Rb2/pl30表達(dá)的影響[D];陜西中醫(yī)藥大學(xué);2015年

5 劉潔;缺氧調(diào)節(jié)奶牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞表達(dá)MUC1和S100A11的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

6 孫艷艷;GRIM-19在小鼠圍著床期子宮內(nèi)膜中表達(dá)及其作用的研究[D];山東大學(xué);2015年

7 趙永玲;促血管生成素評(píng)估IVF患者子宮內(nèi)膜血管形成及內(nèi)膜容受性[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 郭文娟;咖啡酸抗LPS誘導(dǎo)的犬子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞炎性損傷作用[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 李雪婷;薄型子宮內(nèi)膜治療的新進(jìn)展[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2015年

10 鄭婷;腔內(nèi)理療對(duì)反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜HOXA10及Emx2的影響[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：644025