MCL1對(duì)高級(jí)別漿液性卵巢癌生物學(xué)行為的影響及其作用機(jī)制的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-07-19 16:27
本文關(guān)鍵詞:MCL1對(duì)高級(jí)別漿液性卵巢癌生物學(xué)行為的影響及其作用機(jī)制的研究
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【摘要】:研究背景:卵巢癌是病死率最高的女性生殖系統(tǒng)腫瘤,高級(jí)別漿液性卵巢癌(high grade serous ovarian carcinoma, HGSOC)是卵巢癌中高侵襲性的常見(jiàn)類型,多數(shù)患者確診時(shí)已屬晚期,腫瘤已出現(xiàn)廣泛轉(zhuǎn)移,F(xiàn)有的手術(shù)治療和化療可在一定程度上減少腫瘤負(fù)荷,但對(duì)患者遠(yuǎn)期生存率并無(wú)顯著影響。因此,探究卵巢癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制顯得尤為重要。髓細(xì)胞白血病1基因(myeloid cell leukemia-1, MCL1)屬于BCL2家族成員中的抗凋亡因子,功能與BCL2蛋白相似,有抑制細(xì)胞凋亡的作用。MCL1作為凋亡調(diào)節(jié)基因,其表達(dá)失衡可導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生,促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng),促進(jìn)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生對(duì)藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的抵抗作用。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transitions, EMT),是指上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化為間質(zhì)細(xì)胞,從而獲得間質(zhì)細(xì)胞表型的過(guò)程,這一過(guò)程需要經(jīng)過(guò)多種生物化學(xué)變化。EMT不僅參與胚胎發(fā)育、組織重塑、傷口愈合等過(guò)程,也是腫瘤發(fā)生發(fā)展及其轉(zhuǎn)移的重要機(jī)制。EMT過(guò)程中細(xì)胞表面黏附分子減少,細(xì)胞黏附能力下降,侵襲遷移能力增加,促進(jìn)癌細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移。EMT發(fā)生的較經(jīng)典的分子水平變化是E-cadherin減少,N-cadherin增多。體外及體內(nèi)研究均表明,上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在上皮性腫瘤的浸潤(rùn)播散過(guò)程中發(fā)揮作用,是上皮來(lái)源的腫瘤細(xì)胞獲得侵襲性的關(guān)鍵分子事件,在惡性腫瘤的發(fā)展及轉(zhuǎn)移播散過(guò)程中發(fā)揮重要的病理作用。迄今為止,尚無(wú)研究證明MCL1可影響卵巢癌細(xì)胞的侵襲遷移能力,本課題研究MCL1基因在卵巢癌發(fā)生發(fā)展的生物學(xué)作用及其相關(guān)機(jī)制,并探究MCL1對(duì)卵巢癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響及其具體作用機(jī)制。研究方法:(1)采用免疫組化染色方法檢測(cè)63例高級(jí)別漿液性卵巢癌中MCL1蛋白的表達(dá),并分析其表達(dá)水平高低與臨床預(yù)后和臨床相關(guān)病理因素的相互關(guān)系。(2)蛋白印記實(shí)驗(yàn)檢測(cè)高級(jí)別漿液性卵巢癌組織與正常輸卵管傘端上皮組織中MCL1的表達(dá)水平差異。(3)病毒包裝并感染過(guò)表達(dá)及干擾載體建立穩(wěn)定表達(dá)的MCL1卵巢癌細(xì)胞系(MCL1-OVE-A2780和MCL1-OVE-SKOV3與對(duì)照細(xì)胞系;shMCL1-A2780和shMCL1-HEY與對(duì)照細(xì)胞系)。(4)細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)探究MCLl過(guò)表達(dá)和干擾后對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖能力,藥物敏感性(CDDP)和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移能力的影響。(5)以構(gòu)建好的過(guò)表達(dá)及干擾MCL1穩(wěn)定表達(dá)的卵巢癌細(xì)胞系為基礎(chǔ),檢測(cè)相關(guān)EMT分子水平,探究MCL1促進(jìn)腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。(6)通過(guò)裸鼠腹腔內(nèi)注射卵巢癌細(xì)胞,觀察體內(nèi)MCL1表達(dá)水平對(duì)腫瘤的形成和轉(zhuǎn)移的影響。研究結(jié)果:(1)高表達(dá)MCL1與高級(jí)別漿液性卵巢癌的不良預(yù)后相關(guān)(P=0.0089)。并且MCL1表達(dá)水平和CA125高低和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯相關(guān)關(guān)系(P=0.032,P=0.041)(2)與正常輸卵管組織相比,高級(jí)別漿液性卵巢癌組織中的MCL1表達(dá)水平明顯增高,MCL1在不同卵巢癌細(xì)胞系中的表達(dá)水平普遍高于正常輸卵管細(xì)胞系。(3)成功構(gòu)建穩(wěn)定干擾及過(guò)表達(dá)卵巢癌細(xì)胞系,并通過(guò)細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)證實(shí),MCL1增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞增殖能力,降低對(duì)化療藥物的敏感性并促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。(4)MCL1使卵巢癌細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)化轉(zhuǎn)變,并改變了E-cadherin和N-cadherin等EMT相關(guān)標(biāo)記物的表達(dá)水平。(5)體內(nèi)腹腔注射實(shí)驗(yàn)顯示:與對(duì)照組相比,過(guò)表達(dá)MCL1卵巢癌細(xì)胞系腹腔轉(zhuǎn)移灶數(shù)量顯著增多、轉(zhuǎn)移瘤體積更大。研究結(jié)論:(1)MCLl在高級(jí)別漿液性卵巢癌組織中高表達(dá),其高表達(dá)與卵巢癌不良臨床預(yù)后密切相關(guān)。(2)高表達(dá)MCL1與卵巢癌的惡性生物學(xué)行為相關(guān),可增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞增殖能力,降低對(duì)化療藥物的敏感性,同時(shí)增強(qiáng)卵巢癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移能力。(3)MCL1影響卵巢癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的機(jī)制之一為EMT。
【關(guān)鍵詞】:MCL1 生物學(xué)行為 高級(jí)別漿液性卵巢癌 浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移 上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R737.31
【目錄】:
- 中文摘要6-9
- 英文摘要9-12
- 符號(hào)說(shuō)明12-14
- 前言14-16
- 材料方法16-38
- 結(jié)果38-41
- 討論41-44
- 結(jié)論44-45
- 附圖表45-53
- 參考文獻(xiàn)53-55
- 致謝55-57
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文57-58
- 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表58
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
1 韋玉艷;MCL1對(duì)高級(jí)別漿液性卵巢癌生物學(xué)行為的影響及其作用機(jī)制的研究[D];山東大學(xué);2016年
2 沈麗平;FBW7、MCL1在肺腺癌紫杉醇耐藥性中的表達(dá)差異及作用[D];蘇州大學(xué);2015年
,本文編號(hào):563799
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