孕期母體鉛暴露對仔鼠海馬組織Calsyntenin-1表達(dá)的影響
本文關(guān)鍵詞:孕期母體鉛暴露對仔鼠海馬組織Calsyntenin-1表達(dá)的影響
更多相關(guān)文章: 鉛 海馬 Clstn-1蛋白 免疫組織化學(xué)染色法 蛋白質(zhì)印跡 小鼠
【摘要】:目的:探討母體鉛暴露對仔鼠海馬內(nèi)鈣結(jié)合蛋白-1(Calsyntenin-1,Clstn-1)表達(dá)的影響。方法:采用自由飲水模式建立鉛暴露動物模型,發(fā)現(xiàn)陰栓記為第0天,此刻開始染毒,將40只孕小鼠,隨機(jī)分為對照組和低、中、高劑量染毒組,分別飲用去離子水和1g/L,5 g/L,10 g/L的乙酸鉛水溶液。仔鼠21日齡,分別測其血液和海馬組織中鉛的含量,然后取其海馬組織,分別通過免疫組化方法和western blot技術(shù)檢測各組仔鼠海馬組織中Clstn-1的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:21d仔鼠血鉛、海馬鉛水平均明顯高于對照組(P0.01);免疫組化染色結(jié)果顯示,Clstn-1免疫組化陽性反應(yīng)主要定位于胞漿,在仔鼠海馬組織的CA1區(qū)域中,每個鉛暴露組仔鼠Clstn-1免疫組化陽性反應(yīng)物的面密度與對照組相比增加顯著,但平均灰度值明顯降低(P0.01);Western blot結(jié)果顯示,與對照組相比,鉛暴露組仔鼠Clstn-1蛋白的表達(dá)明顯高于對照組,并隨染毒劑量增加,表達(dá)量增高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:母體鉛暴露可能通過上調(diào)仔鼠海馬內(nèi)鈣結(jié)合蛋白的表達(dá)進(jìn)而造成海馬損傷,引起神經(jīng)毒性。
【關(guān)鍵詞】:鉛 海馬 Clstn-1蛋白 免疫組織化學(xué)染色法 蛋白質(zhì)印跡 小鼠
【學(xué)位授予單位】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R714.2
【目錄】:
- 摘要6-7
- Abstract7-8
- 前言8-9
- 1 文獻(xiàn)綜述9-17
- 1.1 鉛9-10
- 1.2 鉛對神經(jīng)系統(tǒng)的影響10-12
- 1.3 鉛對海馬的影響12
- 1.4 鉛離子對鈣離子的影響12-13
- 1.5 鈣結(jié)合蛋白13-14
- 1.6 毒素鉛其它影響14-16
- 1.7 總結(jié)16-17
- 第一部分 仔鼠血鉛海馬鉛濃度測定17-22
- 1 材料與方法17
- 1.1 試劑及儀器17
- 2 動物模型及分組17-18
- 3 樣品處理18
- 3.1 玻璃器皿處理18
- 3.2 血液處理18
- 3.3 海馬組織消解18
- 4 火焰原子吸收法測量血鉛海馬鉛含量18-20
- 4.1 調(diào)試參數(shù)18-19
- 4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制19-20
- 4.3 結(jié)果計算20
- 4.5 數(shù)據(jù)處理20
- 5 結(jié)果與分析20-22
- 5.1 仔鼠血液和海馬組織中鉛濃度的結(jié)果分析20-22
- 第二部分 免疫組化法研究母體孕期鉛暴露對仔鼠海馬組織Clstn-1 蛋白表達(dá)的影響22-25
- 1 材料與方法22
- 1.1 試劑及儀器22
- 2 動物模型及分組22-23
- 3 免疫組織化學(xué)法23
- 3.123
- 3.223
- 3.323
- 4 仔鼠海馬組織中Clstn-1 蛋白免疫組化的結(jié)果分析23-25
- 第三部分 Western Blot測定海馬Clstn-1 蛋白表達(dá)水平25-30
- 1 試劑及儀器25
- 1.1 試劑及儀器25
- 2 動物模型分組25-26
- 3 Western Blot測定海馬Clstn-1 表達(dá)水平26-29
- 3.1 海馬蛋白的提取26
- 3.2 利用BCA蛋白濃度測定試劑盒進(jìn)行蛋白濃度測定,,并計算得出上樣量26-28
- 3.3 western blot28
- 3.4 數(shù)據(jù)處理28-29
- 4 仔鼠血液和海馬組織中鉛濃度的結(jié)果分析29-30
- 討論30-31
- 結(jié)論31-32
- 參考文獻(xiàn)32-37
- 參與項目37
- 已發(fā)表論文37-38
- 致謝38
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本文編號:520135
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