發(fā)布時間：2017-07-05 02:09

  本文關鍵詞：孕期母體鉛暴露對仔鼠海馬組織Calsyntenin-1表達的影響

  更多相關文章： 鉛 海馬 Clstn-1蛋白 免疫組織化學染色法 蛋白質印跡 小鼠

【摘要】：目的:探討母體鉛暴露對仔鼠海馬內鈣結合蛋白-1(Calsyntenin-1,Clstn-1)表達的影響。方法:采用自由飲水模式建立鉛暴露動物模型,發(fā)現(xiàn)陰栓記為第0天,此刻開始染毒,將40只孕小鼠,隨機分為對照組和低、中、高劑量染毒組,分別飲用去離子水和1g/L,5 g/L,10 g/L的乙酸鉛水溶液。仔鼠21日齡,分別測其血液和海馬組織中鉛的含量,然后取其海馬組織,分別通過免疫組化方法和western blot技術檢測各組仔鼠海馬組織中Clstn-1的蛋白表達情況。結果:21d仔鼠血鉛、海馬鉛水平均明顯高于對照組(P0.01);免疫組化染色結果顯示,Clstn-1免疫組化陽性反應主要定位于胞漿,在仔鼠海馬組織的CA1區(qū)域中,每個鉛暴露組仔鼠Clstn-1免疫組化陽性反應物的面密度與對照組相比增加顯著,但平均灰度值明顯降低(P0.01);Western blot結果顯示,與對照組相比,鉛暴露組仔鼠Clstn-1蛋白的表達明顯高于對照組,并隨染毒劑量增加,表達量增高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結論:母體鉛暴露可能通過上調仔鼠海馬內鈣結合蛋白的表達進而造成海馬損傷,引起神經毒性。
【關鍵詞】：鉛 海馬 Clstn-1蛋白 免疫組織化學染色法 蛋白質印跡 小鼠
【學位授予單位】：河南農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R714.2
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 前言8-9
• 1 文獻綜述9-17
• 1.1 鉛9-10
• 1.2 鉛對神經系統(tǒng)的影響10-12
• 1.3 鉛對海馬的影響12
• 1.4 鉛離子對鈣離子的影響12-13
• 1.5 鈣結合蛋白13-14
• 1.6 毒素鉛其它影響14-16
• 1.7 總結16-17
• 第一部分 仔鼠血鉛海馬鉛濃度測定17-22
• 1 材料與方法17
• 1.1 試劑及儀器17
• 2 動物模型及分組17-18
• 3 樣品處理18
• 3.1 玻璃器皿處理18
• 3.2 血液處理18
• 3.3 海馬組織消解18
• 4 火焰原子吸收法測量血鉛海馬鉛含量18-20
• 4.1 調試參數(shù)18-19
• 4.2 標準曲線的繪制19-20
• 4.3 結果計算20
• 4.5 數(shù)據處理20
• 5 結果與分析20-22
• 5.1 仔鼠血液和海馬組織中鉛濃度的結果分析20-22
• 第二部分 免疫組化法研究母體孕期鉛暴露對仔鼠海馬組織Clstn-1 蛋白表達的影響22-25
• 1 材料與方法22
• 1.1 試劑及儀器22
• 2 動物模型及分組22-23
• 3 免疫組織化學法23
• 3.123
• 3.223
• 3.323
• 4 仔鼠海馬組織中Clstn-1 蛋白免疫組化的結果分析23-25
• 第三部分 Western Blot測定海馬Clstn-1 蛋白表達水平25-30
• 1 試劑及儀器25
• 1.1 試劑及儀器25
• 2 動物模型分組25-26
• 3 Western Blot測定海馬Clstn-1 表達水平26-29
• 3.1 海馬蛋白的提取26
• 3.2 利用BCA蛋白濃度測定試劑盒進行蛋白濃度測定，，并計算得出上樣量26-28
• 3.3 western blot28
• 3.4 數(shù)據處理28-29
• 4 仔鼠血液和海馬組織中鉛濃度的結果分析29-30
• 討論30-31
• 結論31-32
• 參考文獻32-37
• 參與項目37
• 已發(fā)表論文37-38
• 致謝38

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本文編號：520135