本文關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒PCR-金磁微粒層析快速檢測方法的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：宮頸癌是全球女性常見的惡性腫瘤。高危型人乳頭瘤病毒(HPV)的持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的主要誘因,其病毒DNA的檢測對(duì)于宮頸癌篩查和預(yù)防具有重要意義�；赑CR-金磁微粒層析原理,本研究建立了快速檢測HPV病毒的方法。對(duì)HPV病毒通用引物GP5+/6+進(jìn)行相應(yīng)的標(biāo)記,PCR擴(kuò)增HPV病毒DNA目的片段,擴(kuò)增產(chǎn)物以構(gòu)建的金磁微粒層析裝置進(jìn)行檢測,結(jié)果以目視化方式讀取。該方法對(duì)110例宮頸脫落細(xì)胞樣本進(jìn)行檢測,結(jié)果與PCR-反向點(diǎn)雜交法進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果表明,對(duì)于110例宮頸脫落細(xì)胞樣本,PCR-金磁微粒層析法與PCR-反向點(diǎn)雜交法的檢測結(jié)果的一致率為85.5%(94/110),陰性樣本一致率為94.2%(65/69),陽性樣本一致率為70.7%(29/41),Kappa值為0.676。對(duì)陰性樣本檢測結(jié)果表明方法具有較好的特異性。對(duì)臨床陽性樣本檢測結(jié)果也達(dá)到文獻(xiàn)報(bào)道的HPV篩查方法檢出率的水平。因此,PCR-金磁微粒層析法是一種快速、操作簡便、成本低廉的HPV病毒DNA檢測方法,在進(jìn)一步提高PCR-金磁微粒層析方法靈敏度的基礎(chǔ)上,該方法對(duì)于宮頸癌篩查具有廣泛的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：HPV DNA檢測 GP5+/6+PCR 層析試紙 宮頸癌篩查
【學(xué)位授予單位】：西北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R440;R737.33
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 第一章：緒論7-19
• 1.1 HPV病毒簡介7
• 1.2 HPV病毒的分類7-8
• 1.3 HPV病毒致病機(jī)理8-10
• 1.4 宮頸癌的預(yù)防10-12
• 1.5 HPV病毒常用檢測方法12-17
• 1.6 論文的立題及意義17-19
• 第二章：HPV病毒PCR-金磁微粒層析檢測法的初步建立19-35
• 2.1 實(shí)驗(yàn)原理19-20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料20-23
• 2.2.1 主要試劑20-21
• 2.2.2 主要儀器21
• 2.2.3 溶液配制21-22
• 2.2.4 臨床樣本22-23
• 2.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)23
• 2.3 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容23-33
• 2.3.1 HPV病毒DNA粗提與純化23-25
• 2.3.2 HPV病毒DNA裂解方法的優(yōu)化25-27
• 2.3.3 PCR擴(kuò)增通用引物的選擇27-31
• 2.3.4 樣本檢測及質(zhì)粒評(píng)價(jià)31-33
• 2.4 本章小結(jié)33-35
• 第三章：尿嘧啶糖苷酶防污染系統(tǒng)的PCR-金磁微粒層析法的建立35-46
• 3.1 實(shí)驗(yàn)原理35
• 3.2 實(shí)驗(yàn)材料35
• 3.2.1 主要試劑35
• 3.2.2 主要儀器35
• 3.3 實(shí)驗(yàn)優(yōu)化35-38
• 3.3.1 HotMaster酶體系與Taq酶體系的比較35-36
• 3.3.2 體系體積的優(yōu)化36
• 3.3.3 引物濃度的選擇36
• 3.3.4 模板預(yù)變性的優(yōu)化36
• 3.3.5 模板用量的比較36-37
• 3.3.6 兩步法PCR與三步法PCR的比較37
• 3.3.7 三步法PCR程序時(shí)間的比較37-38
• 3.3.8 循環(huán)數(shù)的優(yōu)化38
• 3.3.9 MgCl2濃度的優(yōu)化38
• 3.4 結(jié)果與討論38-44
• 3.4.1 HotMaster酶體系與Taq酶體系的比較38-39
• 3.4.2 體系體積的優(yōu)化39
• 3.4.3 模板預(yù)變性的優(yōu)化39-40
• 3.4.4 引物濃度的選擇40-41
• 3.4.5 模板用量的比較41
• 3.4.6 兩步法PCR與三步法PCR的比較41-42
• 3.4.7 三步法PCR程序時(shí)間的比較42
• 3.4.8 循環(huán)數(shù)的優(yōu)化42-44
• 3.4.9 MgCl2濃度的優(yōu)化44
• 3.5 體系確定44
• 3.6 臨床樣本檢測44-46
• 全文總結(jié)46-48
• 參考文獻(xiàn)48-57
• 附錄57-58
• 攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果58-59
• 致謝59

【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒PCR-金磁微粒層析快速檢測方法的建立，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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